iv id = „C1BC8A763B” 
Acest text de Carmen Sánchez de Rivas a apărut inițial la numărul 14 (2013) al rețelei CIC și îl reproducă în integritatea sa pentru interesul dvs.
cu dispariția recentă a lui François Jacob (19 aprilie 2013), ultimul dintre cei trei cercetători care au primit Premiul Nobel pentru Fiziologie și Medicină în 1965 (Iacov, Monod și Lwoff) au dispărut. Acest premiu a traversat lucrările privind reglementarea expresiei genetice a sintezei enzimelor și a virusurilor bacteriene, pentru multe consacrare a operonului.
astăzi, când au trecut mai mult de 50 de ani de la publicarea acestor lucrări , este important să se sublinieze conjuncția cunoștințelor și a interesului implicat atât în elucidarea regulamentului lisogeniei, cât și sinteza enzimelor metabolice. Au fost studiile efectuate pe virușii bacterieni, din lisogenia și inducerea Profagosului, a transferului de gene prin conjugare, a inducției de țige, desfășurate în primul rând de André Lwoff, apoi de François Jacob și Elie Wollman, cei care Ei au efectuat Monod și Iacov să fie asociate cu elucidarea acestui complex de reglementare care ar permite, de asemenea, să explice modul în care bacteriile Escherichia coli reglementează genele implicate în utilizarea lactozei ca sursă de carbon.
în timpul și după războiul II Lumea, un grup semnificativ de cercetători se aduna sub protecția și auspiciile lui A. Lwoff, care au fost depuse la minciunile Institutului Pasteur (Le Grenier) din clădirea de chimie biologică. Monod mai întâi și apoi Iacov, s-au întâlnit aici după ce au participat foarte activ în război. Jacques Monod a avut o participare foarte intensă la rezistență însoțitoare de Partidul Comunist, deși rar a vorbit despre asta. Cu toate acestea, el ia adus dificultăți importante pentru a obține vizele în fiecare călătorie care a făcut SUA. Iacov, cu propoziții de 20 de ani și doar a inițiat doar studiile medicale, sa alăturat generalului de Gaulle din Londra, a fost ulterior trimis să lupte în Africa de Nord și a lucrat ca un chirurg. În timpul aterizării Normandiei a fost grav rănit. În acest sens, Iacov a fost unul dintre puținele combatante compamenon ale eliberării numit de General de Gaulle.
Div id = „C1BC8A763B”> 
În 1954-55, după câțiva ani de coexistență pe Loft, J. Monod a fost numit șef de serviciu și sa mutat la parterul în care a primit o zonă importantă, care ar putea solicita serviciul de către Biochimie Celulare. Acest lucru a permis creșterea posibilităților „Grenier” și împărtășiți bibliotecile în care au fost făcute seminarii și o sală de mese. În 1958, după finalizarea a 3 ani de studii tehnice în biochimie, am avut ocazia să încep să lucrez cu Jacques Monod. În acel moment, Monodul a intervievat tinerii, asistenți potențiali, pentru a finaliza grupul care avea nevoie de el și colegii săi din noul departament. Monod ma angajat pe echipa sa și mi-a început o mare aventură personală a cercetării științifice. Monod ma introdus la A. Lwoff pentru a interveni în numirea mea ca o tehnică IP. Figura de LWOFF a infuzat un respect mare și chiar un punct de teamă de setul de tehnicieni și cercetători; Trebuie să spun că biroul său era într-un colț ascuns al mansardei, iar ușa a fost protejată de secretarii săi. Cu toate acestea, este adevărat că el mi-a primit mereu cu cel mai mare zâmbet și sa distrat să mă vadă în seminarii, deoarece nu era obișnuită să vadă tehnici tinere în mediul ăsta.
repede, monod introdus Eu în studioul curbelor de inducție de β-galactozidază, teste enzimologice și imunologice. În acel moment, pentru a studia ß-Gal într-un număr mare de tulpini, culturile cu detergent și toluen au fost mai întâi permeabilizate și apoi se adaugă substratul (ONPG) și să măsoare enzima prin culoarea galbenă a orto-fenol eliberată. Asta ne-a determinat să punem un tampon care a permis cea mai mare activitate reproductibilă, pe care am numit-o PM2 și ulterior a fost redenumită ca „tampon Z …”; Și am introdus, de asemenea, bicarbonatul de sodiu pentru a reduce reacția.Măsurarea permeazurilor, de la trancheacesele din mutanți, cu diferite inductori liberi sau nu, au fost elementele de lucru zilnice. Am învățat să organizez protocoale și experimente, să scriem și să analizăm rezultatele și apoi să le spunem cu profesorul Monod.
la prânz sau odată ce seminarii, cercetători, tehnicieni și vizitatori ai ambelor grupuri folosite pentru a mânca în „Sala de mese”, a fost un alergător mare cu geam lângă bibliotecă. Unul dintre ritualuri a fost cafeaua pe care Sarah Rapkine îl pregătește. Majoritatea oamenilor de știință care au fost „construiți” biologia moleculară au efectuat camere diferite în laborator. Între mansardă și serviciul nostru, a existat un lift îngust fără prea multă siguranță – mai mult ca stivuitoarele unui șantier de construcții – care au permis tranzitul tuburilor, plăcilor Petri și idei între cele două echipe.
IV ID . Iacov obișnuia să treacă rapid prin laboratorul nostru înainte de a se bloca cu tehnicile sale, Martine și Danièle, pentru a analiza coloniile colonii din plăcile Petri, rezultând din eficiența degradării lactozei, a tulpinilor supuse mutagensului ca UV, RX … , și replicați, izolați și programați în detaliu următoarele experimente. După vizualizarea plăcilor, a selectat o mulțime de „mutanți” care apoi „a coborât” la laboratorul nostru. Madeleine Jolit (cealaltă tehnică Monod) a fost responsabilă pentru cartografierea acestora. Am analizat enzimele sistemului în diferite condiții de creștere. Datele au fost analizate și contabilizate în funcție de inducție sau nu și repetate. O nomenclatură adecvată a tulpinilor și mutanților ne-a permis să știm dacă este tulpina HFR (Dadoras) sau receptorii F pentru conjugare; De la tulpini sălbatice pentru mutanții lactoză sau mutanți UV sau RX într-una din genele sale, auxurile etc. Iacov, pe care le-am numit Le Grand François, sa întors după-amiaza la laboratorul nostru pentru a „controla” rezultatele și discutăm cu monod. Biroul său a fost comunicat cu laboratorul și în acel program obișnuiam să împărtășim ceaiul cu Madeleine, David Perrin, Gérard Butin și alți oaspeți. El a rămas doar străin lui Shiro Nao, care nu a împărtășit limba sau obiceiurile culinare, și chiar mai puțin „ceai”, dar el ne-a dat cel mai bun zâmbet drept oriental bine educat.
Discuțiile au fost Intense, iar David a intervenit continuu. Little cu puțin, monod folosit pentru a implementa o hartă pe biroul unde au fost localizate mutante și activități enzimatice, indusă sau nu. „Modelul” a apărut și a analizat ce experimente și construcții lipsesc pentru a fi mai convingătoare. Izolarea plasmidelor F’permise obține merodiploide stabile pentru Lac Operon, construi fuziuni lacuri la altele se deschide și avansează cu modelul. Multe după-amieze, Iacov a mers cu o nerăbdare așteptând rezultatele: apariția galbenului în tuburile experimentului în curs de desfășurare! „Experimentele secolului” au fost în fiecare zi și am crezut cu toții în ele, până după câteva ore sau zile de muncă, ne-au convins că rezultatul nu a fost cel potrivit și a fost „îngropat în dulapul rezultat non-explicabil”. Iacov A dispărut de îndată ce a văzut că rezultatul a fost negativ. Multe zile au venit să ne convingă de experimentul important, „copierea” lui Monod care a explicat ca principiu atât obiectivele experimentelor, cât și bazele tehnicilor și dispozitivelor utilizate.
Îmi amintesc că multe nopți m-am întors la laborator, înainte de a închide intrarea principală a Institutului, bine pentru a pune capăt unor experimente, schimbă mostrele în contorul de scintilație, replicați culturile etc. Apoi a ascultat la trecerea lui Serene că a fost destul de oprirea gazului și a luminilor, lăsându-și sunetul slab care a deranjat tăcerea nopții; părea un caracter roman sinist. Nu trebuia să sarut poarta pentru a intra ca și Mulți dintre colegii mei, dar am mers mai mult de o ocazie prin accesul spitalului din Institutul de Fizico Chimie, în cartierul latin, unde s-au făcut mai multe seminarii importante (Physiologie Celulaire Club) cu prezența oaspeților străini. Monod a vrut de la început că am fost prezent în toate seminarii și apoi am avut un examen și am scris un raport despre el.
Îmi amintesc tipul de genetică pe care Iacov a dictat-o în Collège de France, pe care ei le-a dictat au fost o adevărată plăcere pentru calitatea, imaginația și umorul lor.Clasa inaugurală a lui Monod din Collège de France, în 1967, unde a prezentat primul său eseu despre analiza filosofică a științei, a ridicat o mulțime de controverse și a afectat atât oamenii de știință, cât și filosofii.
„Cum un om de știință îndrăznește să vorbească despre filosofie? ” Acesta a fost începutul noilor sale preocupări, care l-au identificat în cartea sa Le Hasard et La Nécessité, chiar și astăzi temă de analiză și discuție în clasele de filosofie. Prezența monodului în seminarii a fost în același timp apreciat și temut, de când el a avut capacitatea de a deranja pe cineva care a făcut o întrebare că el a considerat absurd sau puțin elaborat. Privirea lui a lăsat-o pe unul în scaunul său, iar reflecțiile lui ar putea deveni descalificatoare. Pe de altă parte, capacitatea sa de analiză, sinteză, a permis El să explice expozantului de sfera de aplicare a rezultatelor sale, experimentele care lipseau …, chiar și pe uscat, care nu au fost legați direct de specialitatea sa, care sunt cele mai admirate și respectate.
entuziast, cordial, atent, Care a fost „Jacques” pe care îl descrie și Iacov și este cel care mi-a stimulat angajamentul față de știință, care mi-a permis să-mi termin studiile universitare. Am avut noroc să particip la cea mare aventură a operonului și mai târziu în UE Foria de la alteria am participat la numeroase experimente pe enzimele alostale cu JP Changeryux. La sfârșitul gradului meu, ei au avut încredere în mine să analizez GDH (glutamic-dehidrogenază) de E. coli pentru a-și implementa dovezile proprietățile aluzale. Purificare, cinetică de tot felul, determinarea vitezei de sedimentare, km și ki de diferite substraturi în cele două direcții … toate au arătat comportamentul așteptat pentru o enzimă Alostérica, dar nici o proprietate nouă pentru „modelul”, așa numai A rămas în notebook-urile mele. După mai mult de un an, această linie de muncă a fost abandonată; Nimic nu a fost publicat că nu a fost considerat roman și acceptat de Leton. Care ar fi fost uimirea (și bucuria) dacă ar fi descoperit că represorul, represorul său de lac, este o proteină alostală!
Când cariera mea științifică a fost îndreptată, Monod a pus o lumină de alertă: „Carmen , acest birou este foarte greu, să-i dăm băieților! „) Orice opinie explicită care arată cât de dificilă a fost pentru accesul femeilor la lumea științei, ca analize Sandra Legout. Deși mulți oameni de știință care lucrează în laboratorul său, Cred că am fost singura femeie care a făcut o teză sub direcția sa.
Am întâlnit și celălalt protagonist, „Monod”. Așa cum am putea vedea și apreciam creativitatea și inteligența lui, ar putea să fie extrem de rigid în modificarea oricărui aspect referitor la „dogma centrală”: ADN-> RNNA. Nu a fost ușor să accepți regulamentul pozitiv al Arabinosa (Engelsbeg în 5) și mai aproape pentru noi, maltoza (M Schwart în 5). În acest context rezultatele mele de teză pe „represiunea catabolică în lactoză operon”, care a propus o reglementare translațională sau prezența unui al doilea promotor pentru începerea traducerii (care ar fi apoi o secvență strălucitoare delgariană), nu au fost binevenite și au fost Nu este publicat! El a preferat să se deplaseze în studiile represiunii catabolice cu efectele AMPC, unde efectele de reglementare au fost evidente la nivel transcripțional. Ei ar arăta în curând o muncă care să prezinte efecte de reglementare a represiunii catabolice la nivel de traducere; Eu însumi, departe de institut, am reușit să furnizez date în această privință.
Cu trecerea timpului, Monodul a câștigat teren. Acest lucru a fost exacerbat de nevoia de incomprehensibilă de curte pe care unii încurajați. Mulți păreau, din păcate, trecerea lor de ceai la whisky înconjurată de o instanță dependentă, deoarece, în opinia noastră, nu avea nevoie de ea pentru a fi evaluată. Intransigența sa în acceptarea unor rezultate diferite, mai ales când rotoarele sale nu au participat la „Curte”, l-au determinat să comită nedreptate. Acesta este modul în care el nu a înțeles sau a acceptat rezultatele „transcriptazei inverse” în bacterii, care a descris deja Mirko Beljanski în 1967 în propriul său serviciu înainte de H. Temin a făcut-o în virus, care ia câștigat premiul Nobel împreună cu D. Balimore și R. Dulbecco în 1975. În schimb, o mare discriminare a fost comisă cu Mirko atât în termeni științifici, cât și în ceea ce privește resursele furnizate de Institut. Tocmai la acel moment, în timpul experimentelor mele privind represiunea catabolică, am sugerat că alte mecanisme diferite de represor ar putea interveni în regulamentul Lacului. Apoi am crezut că o transcriptază inversă ar putea juca un rol în acel tip de reglementare. Am măsurat această enzimă în condiții sau nu a represiunii catabolice și am observat diferențe semnificative care ar putea justifica un tip de reglementare de către un alt traseu. În ciuda avertismentelor lui David (Patron N’Aimera Pas ça!), când am întâlnit-o pe Monod pentru a analiza progresul muncii mele, a încercat mai întâi să mă convingă de datele nesigure (și de „enzima lui Mirko”) și, după rezistența și insistența mea pe o analiză mai științifică, am fost Redirecționate pentru a abandona acea linie.
spre anii ’70, Iacov a fost dedicat studiului organismelor eucariote (șoareci) și sa mutat la noua clădire Monod Jacques, pe cealaltă parte a străzii. A fost o întreagă aventură pentru a traversa pe strada Dr. Roux, unde pasteur cripta și biblioteca centrală, martori din altă epocă. În acel loc, în Anul Nou, directorii au oferit personalului dorințele lor de fericire. De asemenea, la data morții lui Pasteur, a existat o comemorare cu tot personalul pe care îl paradăm prin cripta pentru a da condoleanțele autorităților! Două ocazii importante de traversare a străzii!
monod, pe de altă parte, a părăsit laboratorul pentru Direcția Institutului Pasteur, unde a reorganizat atât resursele, cât și distribuția grupurilor: proiectele de cercetare vor fi efectuate la Paris; Aplicațiile și producția în glaschete, o întreagă amestecare, la Institutul Pasteur! Într-o conversație am avut cu F. Iacov în 2010, analizăm viziunea noastră asupra științei actuale: prea justificată spre „aplicații”. Pentru ambele a fost o plăcere să ne amintim de ce a fost perioada interesantă pe care trebuia să o trăim, ceea ce unii au denomurat „febra biologică moleculară”. Doar 2 perioade de viață au fost atât de interesante, cealaltă a fost experiența sa în Africa de Nord în timpul luptelor și ca doctor în timpul celui de-al doilea război mondial.
astăzi, la 50 de ani după aceste experiențe și mulți kilometri de la, Continuăm cât de important a fost să se întâlnească acolo la acel moment și cu acest mediu atât de excepțional, ceea ce a aprins flacăra stimulativă (Le Feu Sacré) care îmi permite să continuu întotdeauna mai departe, în ciuda obstacolelor cu care ne-am dat peste zi .
bibliografie
1960 „L’OPÉRON: Grupul de Gènes à expresie coordonnée pereche un opérară”. F. Jacob, D. Perrin, C. Sanchez et J. Monod. Compt. Redad. SCI. 250, 1727 1729
1961 „Mecanisme de reglementare genetică în sinteza proteinelor.” F. Iacov & J. monod. Jmol Biol 3: 318- 336
1963 „proteine alosterice și sisteme de control celular”. Monod, J., Changeux, J.-P., Iacov, F. (1963) J. MOL. Biol. 6, 306-329
1987. „Statuia Intériere”. Filii lui Jacob Odile Jacob
1980. „Les Originea de la Biologie Moleculaire: Hommage à Jacques Monod”. A. LWOFF & A. Ullmannn. COLECȚIA ACADEMICĂ PRESĂ
1970. „Hasard Nécessité. Essai Sur La Filosofie Naturelle de la Biologie Moderne”. J. Monod, édids du seuil
1964-1965- „Caracterizare și enzime parametrii L-glutamic-dehidrogenazei de E. coli „. C. Sánchez, J.Monod & JP ChangeryUx. Nepublicat
1966. – Sur les Proprietățile desaminazei L-triconinei de biosithèse d ‘un mutant d’e.coli k12 „. C. Sanchez, JP Chanchux. Bull. Soc. Chi. Biol. 48, 705 713
2009″. Allossy în familia Laci / Garr: variații pe o temă „. L. Swint-Kruse și Ks Matthews. Avizul actual în Microbiologie 12: 129-137
1968 – „Etude de L ‘Efet Glucose Sur L’ Opéron Lactoza d’E.coli K12”. C. Sánchez, Teza Ciclului 3 în Biochimie, Universitatea De Paris VI. Noiembrie 1968. Director: J. Monod
1968- „Cicloc ca un antagonist al represiunii catabolitice din Escherichia coli”. Ullmann A. &. Monodul J. FEBS Litere Vol2 Nº1: 57-60
1969- „Catabolite represiunea Lac Operon: reprimarea traducerii.” MD Yudkin și V. Moise. Biochem. J. (1969) 113, 423
1976- „Efectele translaționale catabolite asupra ARN-ului Messenger LAC din E. coli K12”. C. SANCHEZ-RIVAS & B. Mendez. Molec. Gen. Genet. 148, 98 104.
1972 Synthèse in vitro a lui L’ADN SUR ONE MATRICE D’ARN PENTRU UN TRANCRIPTASE D’Escherichicia coli. Beljanski M. compt Grand Acad SCI Hebd Seatances Acad Sci D. 1972 1 mai 5; 274 (20): 2801-4.
1972 „Virusurile tumorii ARN-fundal și prim-plan”. Temin Hm. Proc Natl Acad Sci U.S.A. 1972 Apr; 69 (4): 1016-20
2013 „Les Femmes Pasteuriennes: Din bucătăria” à la Paillas. „Sandra Legout. Conférence Cultlelle du Musee Pasteur. 21 Février 2013.
Note:
Pentru o anumită funcție (metabolismul lactozei) sunt necesare o serie de enzime (ß-galactozidază, ß-galactozil permes, tranchetate). Genele corespunzătoare sunt asociate structural și au răspuns în mod coordonat la o echipă de reglementări (proteine și secvențe de operare) care formează un operon.Interacțiunile de mediu vor permite (regulament pozitiv) sau nu (reglementare negativă) transcrierea comunității (unității transcripționale) și apoi producerea proteinelor necesare funcției. În cazul reglementării negative (cum ar fi LAC), inductorul (lactoză și / sau alolactoză) interceptează asocierea represorului la ADN (operator) și permite transcrierea setului. Prezența glucozei, a sursei de carbon preferate, interferează capacitatea de inducție a lactozei care exercită represiune catabolică. Numai atunci când glucoza este epuizată, genele lacurilor sunt exprimate; În aceste condiții, curbele de creștere arată 2 etape cu diferite rate de creștere separate de un platou (diaruxie) Mudos „în interiorul gazdei dvs. sub forma unui profago și se spune că oaspetele dvs. este lizat pentru acel fag. Aceasta implică faptul că bacteriile sunt imune la viruși similari; Cu toate acestea, în anumite condiții (stres), Profago se poate trezi și minciuna oaspetelui.
conjugare
a fost evident în bacterii, mai întâi în Escherichia coli, ceea ce a permis să vorbească despre Sexualitatea bacteriilor. Unele tulpini au capacitatea de a se transfera cu o eficiență ridicată a genomului său (HFR, frecvența înaltă de recombinare) la alte bacterii acceptor într-o secvență de timp legată de poziția genelor de pe cromozom. Se datorează prezenței unei fabrici F integrat în genomul său absent în acceptor (F-). În unele cazuri, am fost capabili să fim tulpini izolate ale factorului F sub formă de plasmidă decât atunci când s-au izolat genomul bacterian, unele dintre gene (F’o F Premium). Acest lucru permite construind diploi parțiali pentru acele gene (merodiploide). Atunci când ADN-ul primitor este transportator de la un procago, iar bacteriile de primire sunt susceptibile la acel fag, în momentul în care profanul intră în tulpina de primire, aceasta provoacă liză (inducție de cartil). Acest lucru se datorează absenței represorului ciclului litic în receptor.
Alteria
Proteinele alostéric sunt multimeri în care legarea unei molecule efectoare (substrat sau inhibitor) la Unul dintre monomerii săi (protomer) provoacă o schimbare conformațională care modifică afinitatea (km, ki) și / sau viteza reacției (Vmax) de către efectoare.
Transcriptaza inversă
Sunt enzime decât de la ARN, sintetizează ADN-ul. Virușii ale căror genom este ARN, necesită această enzimă să rămână și să se asocieze cu genomul oaspeților.
Carmen Sánchez de Rivas (Barcelona, 1939): licență de chimie și fiziologie, doctor în biochimie (Université de Paris vi). El și-a dezvoltat cariera științifică între Franța (Institutul Pasteur și Universitatea din Orsay) și Argentina (Universitatea din Buenos Aires). În prezent participă la un grup de cercetare privind bacteriile gram pozitive, fagii și stresul lor. Este un cercetător ad-onoreem al CONICET (Consiliul Național al Științei și Tehnologiei) din Argentina.
Ediția efectuată de César Tomé López din materialele furnizate de rețeaua CIC