Factori extrinseci și intrinseci asociați cu populațiile fungice micotoxigene de boabe de porumb (Zea Mays L.) stocate în Silos Burse de Valori în Argentina | Revista Argentinei de Microbiologie

Speciile Fusarium au fost izolate la 82,3% din probele totale analizate în cele 5 luni de depozitare. Pe baza caracteristicilor macroscopice ale coloniilor și microscopice ale structurilor de reproducere și a studiului filogenetic cu markerul Tef1, au fost identificate următoarele specii Fusarium: Fusarium Verticilioides (SACC.) Nirenberg, Fusarium proliferatum (Matsushima) Nirenberg, Fusarium Subglutinans (Wollenw și mătură) Nelson, Toussoun și Marasas și F. Oxysporum Schlecht. Enorme Snyd. și Hans.

privind Aspergillus spp., Din caracterizarea morfologică a izolatelor și a studiului secvențelor ITS a identificat 2 specii în primul timp de depozitare, în toate sacile Silos. Specia menționată a aparținut subgendașului circumdati, secțiunea Flavi, A. Flavus Link și secția Nigri, Aspergillus Niger Tiegh.

Prezența Eurotium spp. Sa observat în a doua și în a treia eșantionare în 10% și, respectiv, 37,8% din eșantioane. Speciile predominante a fost Eurotium Amstelodami L. Margin.

În ceea ce privește drojdie, 27,8% din probele de porumb colectate la începutul depozitării au arătat contaminarea cu acest grup microbian, în timp ce la sfârșitul perioadei au fost izolate 58% dintre aceștia. Numărul mediu a fost de 3,3 ± 0,70 log10 UFC / g și 4,62 (± 0,74) Log10 UFC / g la începutul și la sfârșitul stocării, respectiv. Speciile dominante a fost Hyphopichia Burtonii (Bidin și colab.) Arx Van der Walt, izolat pe 91,9% din probele de boabe. Specii rămase au fost clasificate ca aparținând genului Candida.

specii fungice cu capacitate potențială de a produce micotoxine

f. Verticilioides, F. Proliferatum, A. Flavus, P. Citrinum, P. Verrucosum și E. Amstelodami au fost speciile izolate de probe de cereale din toate sacile Silos. Frecvența izolării și a numărului de specii de fusarium au fost reduse la sfârșitul perioadei analizate, iar Aspergillus nu a fost găsit la acel moment. A. Flavus a fost izolat pe 11,44% din probele de timp 1, cu un număr de 2,73 ± 0,71 log10 UFC / g. Procentul de eșantioane contaminate cu speciile Fusarium a fost redus la 5 luni la o valoare de 54,4%, în ciuda faptului că numărul nu a prezentat variații semnificative (p = 0,0552) între prima (2,83 ± 0, 92 log10 UFC / g) și cel de-al treilea timp de eșantionare (3,18 ± 0,77 log10 UFC / g). Dimpotrivă, specia de peniciliu și Eurotium și-au sporit frecvența de izolare și abundența spre sfârșitul depozitării. P. Citrinum a fost izolat la mostre de cereale de 3,30% din a doua jumătate și cu un număr de 3,53 ± 0,60 log10 UFC / g, în timp ce P. Verrucosum a fost izolat din probele de cereale colectate în a doua (0,55% din eșantioane și numărătoare de 2,3 ± 0,00 log10 UFC / g) și în a treia oară de stocare (3,88% din eșantioane și numărătoare de 2,98 ± 1,00 log10 UFC / g) Numărul populațiilor Eurotium SPP. A crescut între al doilea și al treilea timp de depozitare și a fost de 2,08 ± 0,49 și 2,57 ± 0,49 log10 UFC / G.

Mycotoxine

Probele totale analizate au prezentat contaminarea cu fumonisinele, în timp ce 40% a dezvăluit prezența prezenței aflatoxine. Fumonisinele FB1 au fost detectate în 100% din eșantioane, fumonisine FB2 la fumonisinele de 86% și FB3 la 53%. Pe de altă parte, 18,4% din eșantioane au prezentat doar FB1; 18,4%, FB1 + FB2 și 47,3%, FB1 + FB2 + FB3 (Tabelul 5).

Cuando las analizaron este af latoxinas solo este Detecto la presencia ro B1 din AFLA concentraciones mínimas de 0,0003mg / kg de 0,0008mg máximas y / kg.

Los valores de micotoxinas determinados colaboratorii finale del almacenamiento sau registraron incrementos de los niveles măsurilor legate detectados, astfel încât 90 Dias (Cardoso, personal COMUNICACION). Las micotoxinas ZEA y ENTER sau detectadas fueron por empleadas las técnicas.

Discusión

La Temperatura, la actividad Agua (aw) y la Humedad de los Granos pentru Factores condicionantes de la colonización fúngica y de la PRODUCCIÓN de micotoxinas Durante El almacenamiento de los granos23. Că embargo, hasta el Sonido sau este realizaron Estudios sobre la composición gazelor de la atmosfera intergranaria y de la acidez de los Granos, Factores que podrían Contribuir la explicar el comportamiento de las poblaciones fúngicas en Sistemas de almacenamiento como los silozurile bolsa.

El incremento de la Humedad registrado hacia el finală del almacenamiento en el estrato Superior de los silozuri bolsa estudiados podría Ser explicado por la existencia de estratificación de la Humedad de los Granos ubicados en Areas de contacto con la Cubierta PLASTICA, causado posiblemente por ciclos repetidos de adsorción condensación de Agua y, consecuencia de la Como variación diaria de la ambiente Temperatura. Casini et al.5 comunicaron estratificación de Humedad en la capa superficială a Granos de girasol almacenados PLÁSTICAS en Bolsas y con la la relacionaron disminución de la Temperatura nocturna, que una provocó condensación de la superficie de los Granos y de la Cubierta PLASTICA.

Los cambios en la composición O2 y de CO2 Durante el periodo de la actividad almacenamiento reflejaron metabólica en el interior de los silozuri bolsa. Así que es la de los Granos respiración y de la microfilm asociada redujo el de O2 este Nivel incrementó el de CO2 Nivel, generando una anaerobia Atmosfera. Estos Resultados con los reportados coinciden en Italia para el almacenamiento de Granos de maíz de Trigo y en bolsa18 silozuri. Por otro lado, en la zona 1 (Cierre de la bolsa) de los 5 silozuri bolsa al finala del almacenamiento este determinó la Mayor concentración O2, lo que podría indicar ne Cierre inadecuado de aquellas; en consecuencia, este favorecería la PRODUCCIÓN de microambientes para el Desarrollo de la micobiota aerobica. Del pH de măsurilor legate los Granos este determinó su disminución en los Granos ubicados en el estrato Superior hacia el tercer almacenamiento del Tiempo. Este resultado podría Ser explicado la partir del Registro de primar al ONU Numero de UFC / g totales en los Granos dispuestos en dicho estrato, ocasionado por la actividad Mayor metabólica. El comportamiento variabilei Esta en condiciones de almacenamiento hermético sau estudiado fue hasta el Sonido. Por ello, el Monitoreo de la acidez de los Granos Durante el almacenamiento PUEDE Contribuir la comprender y explicar à la DINAMICA de las poblaciones fúngicas, micotoxigénicas y en Particular la de las asociadas un ellos.

El recuento totală de la micobiota colonizó que los Granos de maíz sau presentó variaciones la Traves del Tiempo, coincidiendo informado con lo por otros en investigadores Argentina28. Estos resultados determinados podrían estar por el incremento de la concentración CO2 acidez y la de los Granos, y por la reducción del O2 Nivel, que la actividad afectaron metabólica. Por el contrario en Italia los reportes indicaron una reducción en el recuento de hongos totales Durante el almacenamiento de maíz en silozuri bolsa18.

Otro aspecto relevante de Este estudio determinó que los recuentos fúngicos totales fueron afectados por el estrato (posición de los Granos en el perfil del silozuri verticale bolsa): este encontraron los Mayores valores en el estrato Superior y los menores en el inferior.Această constatare diferențială în numărul populației influențată de localizarea boabelor nu a fost niciodată raportată; Acest lucru se poate datora celor 3 factori extrinseci explicați mai sus: a) creșterea temperaturii în stratul superior al sacului, ca răspuns la variațiile zilnice ale temperaturii ambientale; b) existența variației umidității în boabele individuale situate în stratul superior al sacului, cauzat de variațiile diurne și nocturne ale temperaturii, ceea ce determină condensarea pe suprafața boabelor și c) influența unui schimb mai mare de gaze între mediul înconjurător și interiorul sacului de pe boabele situate în stratul superior35. În stratul inferior, au fost generate și microembles, în cazul în care temperatura și umiditatea scăzută și cea mai mică schimb de schimburi gazoase influențate negativ metabolismul respirator, care ar fi putut afecta supraviețuirea diferitelor specii fungice, inclusiv micotoxgenicul.

în ceea ce privește compoziția din compoziția lui Populații fungice, sa observat că prezența diferitelor specii a fost influențată de condițiile dinamice de mediu care au dominat interiorul vasului. La începutul depozitării, speciile de fusarium și aspergillus au fost izolate împreună cu alte specii asociate cu boabe. Cu toate acestea, generarea unui mediu anaerob și creșterea temperaturii și acidității cerealelor ca timp de depozitare a avansat o micobiota dominată de peniciliu, eurotium și specii de drojdie. Creșterea numărului de eșantioane pozitive cu Eurotium spre sfârșitul depozitării ar putea fi datorată faptului că acest sex este tolerant la stres, sporii săi germinează la o temperatură optimă la 30 ° C și este capabilă să se adapteze mai mult la acid Ph16. De asemenea, frecvența izolării și a numărătorilor de drojdie au crescut spre sfârșitul perioadei luate în considerare. În timp ce aceste rezultate nu au coincid cu cele raportate de alți cercetători în condiții similare28, creșterea ar putea fi explicată prin dominația unei atmosfere anaerobe.

frecvența izolării speciilor producătoare potențial (A. Flavus și fumonisine (F. Verticilioides și F. Proliferatum) au fost reduse la capătul depozitării. Unii cercetători au raportat că speciile Aspergillus ar fi mai bine adaptate la creșterea substraturilor cu pH43 alcalin, astfel încât pH-ul de boabe ar fi putut afecta supraviețuirea unor astfel de specii. Pe de altă parte, se poate deduce că, deși A. Flavus este considerat o specie favorizată de condițiile de depozitare4, probabil că ar avea inconveniente să se adapteze la condițiile de mediu de stocare în sacul Silos, cu restricții importante privind concentrația O2 și cu creșterea concentrației O2 aciditate. Identificarea A. Flavus în porumb în diferite condiții de depozitare a coincis cu cei informați de alți cercetători din diferite regiuni agroecologice din Argentina10,17,32.

Frecvența de izolare Fusarium SPP. A fost redusă la sfârșitul depozitării; Cu toate acestea, numărul său de populație nu a înregistrat variații. Aceste rezultate sunt de acord cu cele raportate de alți cercetători în Argentina6,14 și alte țări13,31.

Spre deosebire de ceea ce sa întâmplat cu numărul total de populații fungice, care a fost afectat de stratul de granar, fără efect al poziției a boabelor a fost detectată în sac pe baza speciei Fusarium. Pentru prima dată se comunică că poziția boabelor din interiorul sacului de siloz nu a afectat numărul populației; Eventual, acest lucru se datorează faptului că speciile din acest gen sunt asociate cu substratul de porumb și sunt mai puțin influențate de condițiile de mediu din interiorul silozului Bolsa21,33.

capacitatea speciilor Fusarium și a. Flavus Pentru a produce fumonisine și aflatoxine în porumb a fost demonstrat în diferite investigații efectuate în țara noastră3. Cu toate acestea, în Argentina există doar o legislație pentru aflatoxinele totale și acest lucru specifică limitele maxime pentru arahide, porumb și derivații acestora și pentru aflatoxina M1 în lapte de fluid și pulbere (http://www.anmat.gov.ar/alimentos/codigoa, consultat în Aprilie 2015). Pentru micotoxinele rămase, Argentina consideră limitele de toleranță indicate de legislația în vigoare în Comunitatea Europeană12.

Nivelurile totale fumonisine au depășit valorile maxime permise de 4 mg / kg11 în 3 probe analizate, corespunzătoare 3 la același sac de siloz (sac de siloz 3).Boabele acestui sac de siloz erau pamperi în luna august, astfel încât concentrațiile ridicate determinate să poată fi explicate printr-o mai mare permanență a boabelor în cultură, unde speciile Fusarium au avantaje adaptive mai mari pentru a coloniza boabele și a produce micotoxinul9. Acest aspect este relevant, deoarece ar putea fi dedus că o întârziere a recoltei ar cauza o acumulare de fumonisine în boabele din domeniu. Acei cercetători care au analizat fumonisinele totale în porumb în diferite domenii de producție ale nivelurilor determinate din Argentina, care au fost de la 2,525 mg / kg la 11.528 mg / kg14 și de la 0,01 mg / kg la 31,108mg / kg28, date care manifestă o variabilitate marcată.

În ceea ce privește aflatoxinele, nivelurile înregistrate au fost mai mici decât limitele stabilite în țara noastră pentru boabe de porumb (0,020 mg / kg), care ar putea fi legate de cea mai mică adaptare a A. Flavus la condițiile descrieri de mediu pentru zona de studiu . Această specie este izolată în mod obișnuit în porumbul cultivat în regiunile centrale și nordice ale Argentinei, unde este favorizată de temperaturi mai mari de 30 ° C24.

între micotoxinele produse de Penicillium spp. Ocratoxina A (OTA), Patulina și Citrinine27 se remarcă. În acest studiu, P. Citrinum și P. Verrucosum, potențialii producători de citrinină și OTA, respectiv, au fost izolați cu frecvență joasă. Eventual, compoziția gazelor din atmosferă și creșterea acidității nu au favorizat dezvoltarea lor.

Cu referire la creșterea E. Amstelodami, în prezent nu sunt cunoscute rapoarte despre producția OTA pentru această specie din porumb stocate în sacul Silos. Cu toate acestea, sa raportat că această specie a produs OTA în boabe de cereale în depozit1, astfel încât ar fi necesare studii privind producția OTA de către Eurotium spp. În boabele de porumb stocate în sacul Silosului, deoarece acest micotoxin, precum și cele deja menționate, reprezintă un risc potențial pentru sănătatea umană și animală.

În timp ce depozitarea boabelor în Silos Sac constituie un sistem simplu de stocare și cu Costul scăzut al investițiilor pentru a păstra cerealele, este necesar să se monitorizeze starea boabelor înainte de a fi ambalate și periodice în depozit, pentru a-și detecta cu precizie posibila deteriorare datorită dezvoltării ciupercilor. Datele privind dinamica populațiilor micotoxigene și factorii care condiționează apariția și proliferarea acestora furnizate de acest studiu ar putea contribui la proiectarea strategiilor care vizează evitarea modificării calității boabelor în timpul depozitării. S-ar putea să fie legată de utilizarea diferitelor amestecuri de gaze (cu un conținut ridicat de CO2), având în vedere caracteristica de permeabilitate scăzută a vasului. În acest fel, ar fi o alternativă valabilă pentru reducerea pierderilor de calitate a boabelor destinate consumului uman și animal cauzate de producerea de metaboliți toxici, atunci când cei stocați pentru perioade mai mari de 5 luni.

în ceea ce privește Legislație care stabilește limite de toleranță pentru diferite micotoxine din materii prime și elaborarea alimentelor, ar fi relevantă pentru stabilirea unor valori maxime de toleranță pentru fumonisine, deoarece prezența sa a fost detectată într-un procent ridicat de probe de cereale de porumb analizate în ultimii ani în Argentina, O situație care ar putea fi o problemă pentru marketingul și industrializarea boabelor, fie pentru consumul uman, fie pentru animale.

Responsabilități eticeProtecția persoanelor și a animalelor

Autorii declară că pentru această cercetare nu a fost efectuată experimente la om sau animale.

Confidențialitatea datelor

Autorii Acestea declară că, în acest articol, nu apare date privind pacientul.

Dreptul la confidențialitate și consimțământul informat

Autorii declară că datele pacientului nu figurează în acest articol.

Finanțarea

Lucrarea de față a fost finanțată de către Universitatea Națională din Mar del Plata (Proiectul AGR375 / 12) și Institutul Național de Tehnologie Agricolă (Proiectul AEAI 274.420, zona strategică Agroindustrie) și a fost prezentată de Claudia C. Castellari ca cerință parțială de a obține gradul academic de doctor În știința agricolă de la Universitatea Națională din Mar del Plata, Argentina.

Conflictul de interese

Autorii declară că nu au un conflict de interese.