Alterații în metabolismul de calciu-fosfor sunt o problemă predominantă și de mare importanță pacienților cu CKD (boală renală cronică) .1-8 adecvate și mai devreme Evaluarea, precum și tratamentul este esențial pentru controlul optim al pacienților noștri.
Metoda ideală de diagnosticare pentru gradul și tipul de osteodistrofie renală este încă biopsie de creastă Iliac după etichetarea dublă tetracicline, 9-25, dar, datorită la natura sa invazivă și toililomă, este de aplicare dificilă în practica clinică zilnică.26 În prezent, diagnosticul și tratamentul acestor modificări se bazează pe determinarea nivelurilor plasmatice ale hormonului paratiroid intact (iPTH) .10,17,27-31 Cu toate acestea, determinarea acestui hormon nu este simplă și este supusă unei variabilități mari.32-34 În plus față de aceasta, metodele utilizate pentru procesarea eșantioanelor iPTH nu sunt standardizate, fapt care ar putea fi o sursă importantă de variabilitate pre-test.
Scopul studiului
la Ana Variabilitatea redusă a rezultatelor determinării iPTH comparativ cu diferite metode de prelucrare a aceluiași probă de plasmă tratată cu acid etilendiaminetetraacetic la pacienții cu CKD în diferite etape de dezvoltare.
Material și metodă
În studiul nostru, am analizat 294 de eșantioane de sânge de la 49 de pacienți cu boală renală cronică (CKD) în diferite etape de dezvoltare, 18 au fost de la pacienții transplantați la unitatea de transplant renal (36,7%) și 31 de la unitatea de hemodializă cronică la spitalul nostru ( 63,3%).
Toate probele de sânge au fost colectate dimineața (între 8 și 9:00) după o rapidă și predializă de opt ore pentru pacienții supuși unui tratament de rinichi substitutiv. Sângele a fost atras la serviciul de hemodializă al spitalului nostru. Trei tuburi de EDTA au fost extrase de la fiecare pacient: două tuburi de 5 ml și un tub de 10 ml. Imediat după extracție, acestea au fost trimise la frigider la Departamentul de Medicină Nucleară, în care fiecare a fost procesat diferit, așa cum va fi descris aici.
Grup de referință sau grupul 1 (EDTA 5ML TUBE):
– probă de sânge colectată (și trimisă rapid la frigider la Departamentul de Medicină Nucleară).
– centrifugare frigorifică
– plasmă imediat înghețată.
Grupa 2 (tubul EDTA 10ml):
– Proba de sânge colectată
– menținută o oră la temperatura camerei.
– centrifugare normală.
– separat în 3 tuburi:
– unul dintre tuburi este imediat înghețat. Grupa 2A
– un tub este refrigerat timp de opt ore și apoi înghețat. Grupa 2B
– Un alt tub este refrigerat pentru > 24 ore și înghețate. Grupa 2C
Grupa 3 (tubul EDTA 5ml):
– Proba de sânge colectată
– Menținerea > 3 ore la temperatura camerei.
– centrifugare normală.
– separat în două tuburi:
– imediat înghețat. Grupa 3A
– un tub este refrigerat pentru > 8 ore și înghețate. Grupa 3B
Metodele de procesare utilizate pentru probele de sânge din studiul nostru au fost cele aplicate de obicei în acest domeniu. IPTH a fost măsurată utilizând testul imunoradiometric (testul de scanticorpi intacte Irma total, generația a 2-a). Variabilitatea unică obținută a fost mai mică de 2,5%. Grupul 1 a fost considerat standardul de aur, deoarece acestea sunt condițiile general recomandate pentru acest tip de probe, independent de metoda sau conservantul utilizat (EDTA sau citrat).
A două prin două comparații a fost efectuată între iPth înseamnă valori în grupul de referință și celelalte. Prin urmare, normalitatea de distribuție a fost verificată mai întâi prin aplicarea testelor de variație de omogenitate și de normalitate. Ulterior, am efectuat o comparație prin perechi cu testul T, inclusiv corecția Bonferroni. Nivelul de semnificație a fost stabilit la p
rezultate
Vârsta medie a populației studiate a fost de 60,88 ± 17,65 și vârsta cuprinsă între 26 și 90 de ani. Dintre cei 49 de pacienți incluși în studiu, 25 au fost femei și 24 de sex masculin, care corespunde cu 51 și respectiv 49%. Cauza principală a bolii renale cronice este non-afiliată, urmată de origine vasculară și glomerulară. Caracteristicile descriptive rămase ale populației noastre de studiu sunt afișate în tabelul 1.
Valoarea medie din grupul de referință a fost de 202,25 ± 199,72pg / ml. Valorile medii ale iPTh intacte în celelalte grupe analizate, afișate în tabelul 2, au fost de 196 ± 203,23pg / ml, 202,8 ± 200,2pg / ml, 200,06 ± 194,87pg / ml, 204,08 ± 204,073pg / ml și 197,94 ± 182,31pg / ml. După cum se poate observa în figura 1, rezultatele au fost practic identice pentru fiecare grup, fără diferențe importante în ceea ce privește grupul de referință (p = 0,87, p = 0,99, p = 0,95, p = 0,96, p = 0,90), când Comparând cu grupele 2A, 2B, 2C, 3A și 3B, respectiv).
Discuție
Determinarea serului de parateon este dificil de cuantificat, deoarece este destul de instabil atât în ser cât și în sânge43-45 (Av. 5 minute). Metoda de referință se bazează pe filarea frigorifică și înghețarea probei imediat după extracție. Cu toate acestea, această procedură este foarte dificilă în practica clinică zilnică, deoarece activitatea de nefrologie nu este limitată numai la domeniul spitalului. În general, eșantioanele sunt atrase la clinici și apoi trimise la spitalele de trimitere pentru analiză. Cu ocazia, aceste clinici sunt la o distanță destul de mare de spitale. Majoritatea eșantioanelor nu sunt rotite sau separate în locul de extracție, deoarece nu au mijloacele necesare pentru a face acest lucru. În plus, probele sunt rotite la temperatura camerei. Putem deriva din aceasta importanța cunoașterii și reducerii variabilității la un maxim în manipularea probelor.
În prezent, nu există o metodă standardizată de procesare a acestora. Există unele controverse cu privire la stabilitatea parateonului în ser sau plasmă tratată cu EDTA. Mai multe studii menționează că determinarea iPTH în ser este mai puțin stabilă decât cea obținută din plasmă și probă de sânge conservată în tuburi tratate cu EDTA.35-42, cu toate acestea, Omar et al.38 în 2001 a observat că nivelurile de iPTH din EDTA au scăzut 14.8 % după ce a rămas la temperatura camerei timp de 48 de ore. În plus, recent, Cavalier et al.42 a demonstrat că eșantioanele prelucrate cu EDTA nu sunt întotdeauna mai stabile decât în ser. Acestea susțin că stabilitatea iPTH după 24 de ore la -20 ° C este mai mare în ser decât pentru plasma tratată cu EDTA.
în aproape toate studiile efectuate până la data, serul și EDTA sunt comparate.35-42 Cu toate acestea, una dintre limitările pe care le prezintă studiul nostru este că nu a fost stabilit un grup de control cu ser (citrat). Prin urmare, nu putem evalua determinările iPTH în ser și plasmă (EDTA) odată înghețate la -20 ° C și nici nu compara acest lucru cu rezultatele lui Cavalier și colab. În plus, nu am analizat ceea ce apare după 48 de ore la temperatura camerei pentru a compara cu Omar et al. Rezultate.
Constatările acestui studiu nu prezintă diferențe semnificative între grupul de referință și celelalte grupuri analizate. Se confirmă faptul că eșantioanele plasmatice tratate cu EDTA sunt stabile și se recomandă utilizarea acestuia cu centrifugare frigorifică și înghețarea imediată este dificil de realizat.
Concluzie
Utilizarea EDTA ca conservant În prelucrarea probelor analitice pentru determinarea sângelui iPTH permite o perioadă de procesare mai mare fără cerința de înghețare imediată, afișarea unei variabilități minime în rezultatele obținute în funcție de diferite metode de prelucrare. Aceste rezultate pot ajuta la stabilirea unor strategii logistice pentru prelucrarea probelor de sânge la pacienții cu CKD.
Tabelul 1. Caracteristicile descriptive ale populației de studiu
Figura 1.