T1 – Projeto de exibição de mRNA de intrabodies baseados em fibronectina que detectam e inibem a síndrome respiratória aguda grave proteína nucleocapsid de coronavírus
au – liao, hsiang I.
au – Olson, C. Anders
au – Hwang, seungmin
au – Deng, Hongyu
au – Wong, Elaine
au – Barico, Ralph s.
au – roberts, Richard w.
au – sol, ren
py – 2009 / 6/26
Y1 – 2009/6/26
N2 – A proteína nucleocapsid (n) de síndrome respiratória aguda grave (SARS) O coronavírus desempenha papéis importantes em ambas as replicações virais e modulação de processos de células host. Novos ligandos que alvo a proteína N podem, portanto, fornecer ferramentas para rastrear as células de proteína dentro, detectar manchas quentes de interação na superfície da proteína e descobrir sites que poderiam ser usados para desenvolver novas terapias anti-SARS. Usando a seleção de exibição de mRNA e a evolução direcionada, projetamos novos reagentes de afinidade de proteínas semelhantes a anticorpos que alvo SARS n proteína com alta afinidade e seletividade. Nossas bibliotecas foram baseadas em uma variante de 88 resíduos do dio de fibronectina tipo III da fibronectina humana (10FN3). Essa seleção resultou em oito intrabodies independentes de 10FN3, dois que exigem o domínio N-terminal para ligao e seis que reconhecem o terminal C, um com kd = 1,7 nm. Os intrabodies 10FN3 são bem expressos nas células de mamíferos e são relocalizados por n em células infectadas pelo SARS. Sete dos intrabodies selecionados testados não perturbam a função celular quando expressa isolada no vivo e inibir a replicação de vírus de 11 a 5900 vezes quando expressas em células antes da infecção. Segmentando dois sites na SARS-N simultaneamente usando dois resultados distintos 10FN3s em inibição sinérgica da replicação de vírus. © 2009 pela Sociedade Americana de Bioquímica e Biologia Molecular, Inc.
AB – A proteína nucleocapsídica (n) da síndrome respiratória aguda grave (SARS) O coronavírus desempenha papéis importantes na replicação viral e na modulação da célula hospedeira processos. Novos ligandos que alvo a proteína N podem, portanto, fornecer ferramentas para rastrear as células de proteína dentro, detectar manchas quentes de interação na superfície da proteína e descobrir sites que poderiam ser usados para desenvolver novas terapias anti-SARS. Usando a seleção de exibição de mRNA e a evolução direcionada, projetamos novos reagentes de afinidade de proteínas semelhantes a anticorpos que alvo SARS n proteína com alta afinidade e seletividade. Nossas bibliotecas foram baseadas em uma variante de 88 resíduos do dio de fibronectina tipo III da fibronectina humana (10FN3). Essa seleção resultou em oito intrabodies independentes de 10FN3, dois que exigem o domínio N-terminal para ligao e seis que reconhecem o terminal C, um com kd = 1,7 nm. Os intrabodies 10FN3 são bem expressos nas células de mamíferos e são relocalizados por n em células infectadas pelo SARS. Sete dos intrabodies selecionados testados não perturbam a função celular quando expressa isolada no vivo e inibir a replicação de vírus de 11 a 5900 vezes quando expressas em células antes da infecção. Segmentando dois sites na SARS-N simultaneamente usando dois resultados distintos 10FN3s em inibição sinérgica da replicação de vírus. © 2009 pela Sociedade Americana de Bioquímica e Biologia Molecular, Inc.
ur – http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=67650555401&partnerID=8YFLogxK