imunocolocação de espermadeiras PSP-I / PSP-II no esperma de javali


Resumo

O Heterodimer PSP-I / PSP-II é o maior componente proteico do seminal plasma do javali. Neste trabalho, o padrão de ligação do heterodímero PSP-I / PSP-II foi investigado no esperma do javali do seu armazenamento no epidídimo para o local de fertilização. Para isso, os espermatozóides foram coletados da cauda do epidídimo, do ejaculado de javali sexualmente maduro e o oviduto de porcas multíparas que haviam sido cobertas por um javali e sacrificados aproximadamente 6-8 horas após a ovulação. A imunocolocação foi realizada com anticorpos policlonais monoespecíficos anti-PSP-II obtidos pela imunização de coelho por injeções subcutâneas. Foi usado como um anticorpo secundário um anticorpo de cabra anti-coelho rotulado com partículas de ouro de 10 nm. Após incubação com o anticorpo secundário, as amostras foram submetidas a amplificação com prata. Para o exame da distribuição da distribuição de heterodímero PSP-I / PSP-II, foi utilizada microscopia óptica e microscopia eletrônica de transmissão. O esperma da epidídimo foi constantemente imunonegativo. Por outro lado, quando o esperma decorrente do ejaculado, eles mostraram grandes agregados prateados ao revestir a região acrosal do espermatozóide. Quando o esperma veio do oviduct, encontramos duas subpopulações de espermatozóides, com ou sem o Heterodimer PSP-I / PSP-II na região acrosal, fazendo-nos pensar que a formação espermática poderia estar relacionada à eliminação do PSP-I / PSP -Ii heterodímero da superfície do esperma. Em conclusão, nossos resultados sugerem que o heterodímero PSP-I / PSP-II se junta ao espermatozóide e sua liberação pode estar relacionada a mudanças na membrana plasmática de esperma antes da fertilização.

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