Introdução
O câncer cervical é o terceiro câncer mais frequente em mulheres do mundo, com 529.828 novos casos e 275.128 mortes, dos quais 31.712 estavam na América Latina e no Caribe. 85% dos novos casos ocorre nos países em desenvolvimento. A taxa de incidência padronizada de idade na América do Sul é de 24,1 x 100.000 mulheres. No Paraguai, a taxa de incidência e mortalidade é de 35,0 e 16,6 x 100.000 mulheres, respectivamente. Esta taxa é muito maior do que os registrados em outros países vizinhos, como a Argentina, o Brasil, o Uruguai e o Chile1.
O papilomavírus humano (HPV) é um fator necessário para o desenvolvimento do câncer cervical, existem mais de 100 tipos de HPV, de aproximadamente 40 infectarem a mucosa anogenital, estes são classificados de acordo com seu potencial oncogênico em vírus de alto risco (HPV) e baixo risco (LR-HPV), com HR-HPV (16, 18, 31 , 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 e 66) detectados em mais de 95% dos casos de câncer cervical2-5.
Cytology é uma simples e baixa Método de custo usado para detectar o efeito citopático produzido pelo vírus, mas não determina o tipo viral. Como o HPV não cresce em culturas de células convencionais, os métodos moleculares têm sido usados nos últimos anos que podem detectar genótipos virais como captura híbrida II (R) (CH II (R)), que detecta 13 tipos de HR-HPV e fornece uma estimativa Valor da carga viral 6.7.
Ainda não há tratamento para eliminar a infecção relacionada ao HPV, mas se para lesões produzidas pelo vírus. As metodologias usadas para tratamento são: processo eletrocirúrgico eletrocirúrgico, crioterapia e conização eletrocirúrgica (loop eletrocirúrgico. Apesar da possibilidade de tratar lesões intraepiteliais produzidas pelo HPV, há probabilidade de recorrência ou desenvolvimento do câncer cervical. Se a lesão se estender à margem endocervical, o risco de insuficiência de tratamento é maior, incluindo mulheres que têm margens livres de lesões têm risco de insuficiência de tratamento de 2-6%, independentemente do tratamento utilizado. A razão acumulada de invasão em 8 anos após o tratamento é de 5,8 por 1000 mulheres, que por sua vez é 5 vezes maior do que na população geral8-14.
Além de considerar as margens cirúrgicas cometidas como fator de recorrência, Existem outros cofactores que favorecem a persistência ou a recorrência de lesões escamosas intraepiteliais após tratamento, como idade, paridade, diagnóstico citológico e grau de lesão antes do tratamento15.
para o precedente é importante um valor contínuo e meticuloso acompanhamento após o tratamento. Estudos recentes sugerem que o uso combinado da citologia junto com o Chi II (R), aumente a eficácia de selecionar mulheres tratadas em risco de desenvolver lesão residual ou recorrente intraepitelial (sil), a seis meses de tratamento16-19.
No Paraguai, estudos anteriores observaram uma alta frequência de HR-HPV em mulheres com a ausência de lesão cervical, bem como fatores de risco (alto número de casais sexuais, multiplicar, entre outros) associados ao desenvolvimento do câncer do colo do útero, comparável ou maior que os detectados em outros países em desenvolvimento, que poderiam explicar parcialmente a alta incidência deste câncer em nosso país20-23.
No país não há trabalho na frequência de HR-HPV em mulheres tratados por SIL, portanto, considerando o comportamento sexual das mulheres paraguaios que poderiam favorecer a aquisição de infecção viral pós-tratamento e aumentar o risco de recorrência, O objetivo do presente estudo preliminar foi determinar a frequência do HR-HPV por CH II (R) de acordo com os resultados citológicos em mulheres tratadas por SIL do Cervix, período de 2006-2010.
Materiais e métodos
Estudo descritivo de corte transversal de uma série de casos, realizados com 122 mulheres tratadas lesões cervicais que vieram consecutivamente para o Departamento de Saúde Pública e Epidemiologia do Instituto de pesquisa em Ciências da Saúde (IICS) da Universidade Nacional de Assunção (1) no período 2006/2010 com uma indicação médica para a detecção de HR-HPV por CH II (R).
As mulheres foram derivadas da IICS, uma, de diferentes centros públicos e privados de saúde do Departamento Central do Paraguai. Neste estudo, as mulheres que tiveram um diagnóstico citológico da lesão antes do tratamento foram incluídas, que foram tratadas com uma antecedência de pelo menos 6 meses e que após o tratamento teve um diagnóstico citológico atualizado no momento da detecção de HR-HPV por CH II (R). Aqueles que foram para a IICS, um, com mais de 2 anos de tratamento foram excluídos. O tratamento aplicado dependia dos critérios médicos e baseou-se no manual nacional de normas e procedimentos para a prevenção e controle do câncer do colo do útero do Ministério da Saúde Pública e do Bem-Estar Social do Paraguai24.
antes do tratamento, Das 122 mulheres, 79 apresentadas confirmadas diagnóstico histológico de SIL de baixa qualidade (LSIL) e 43 SIL de alta qualidade (HSIL). Das mulheres totais, 97 foram tratadas com LEEP e 25 com conização.
Todas as mulheres incluídas foram realizadas um questionário que consistia em dados demográficos, comportamento socioeconômico, gineco-obstétrico e sexual. Todas as informações foram processadas respeitando a confidencialidade dos pacientes. O trabalho foi aprovado pelo Comitê de Ética da IICS da Universidade Nacional de Assunção de Assunção, no M07 / 10.
O tamanho mínimo da amostra de 144 mulheres tratadas foi calculada usando a tabela Apêndice 13e para um estudo descritivo com variável dicotômica considerando 30% a frequência esperada de HR-HPV após o tratamento, com uma amplitude (?) de 0,15 e uma gama de confiança de 95%.
Detecção de lesões de pescoço uterino em mulheres tratadas por citologia
O estudo citológico foi realizado nos centros de saúde participantes. A tomada de amostra consistia em uma escovação cervical que foi colocada em uma folha fosca corretamente identificada. Resumidamente, as folhas foram submersas por 15 minutos em um recipiente de boca larga com álcool retificado (96%) suficiente para cobrir toda a superfície dele. Em seguida, a lâmina do recipiente foi removida deixando secar por 10 minutos e spray fixo foi colocado. Os resultados citológicos foram classificados de acordo com o sistema Bethesda 200126.
HR-HPV Detecção em mulheres tratadas por CH IG
A amostra foi coletada no IICS, um, usando um endocervical de escova (Cytobrush), que foi introduzido em um tubo de colecionador, fornecido pelo fabricante, Qiagen (Alemanha).
Amostras foram processadas pelo método Chi II detectando 13 tipos de HR-HPV: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 e 68. Após o protocolo do fabricante, as amostras cervicais foram tratadas com hidróxido de sódio, a fim de desnaturar o DNA. O DNA simples foi hibridizado em solução com um coco de RNA dos 13 tipos de HR-HPV. Cada mistura reaccional contendo algum híbrido RNA-DNA foi transferida para uma microplaca bem sensibilizada bem sensibilizada, permitindo a sua imobilização. O RNA-DNA híbrido ligado ao anticorpo foi contactado com um segundo anticorpo conjugado a uma fosfatase alcalina. O material unligado foi removido por sucessivo lavado, em seguida, foi adicionado um reagente quimioluminescente (lumi-pHS 530), como substrato para fosfatase alcalina. O luminescência produzido pela reacção foi medido por um luminômetro. A unidade de medição de luz foi expressa como unidades relativas de luz (RUS). Os controles positivos e negativos fornecidos pelo Qiagen foram utilizados por triplicado.
O valor de carga viral relativo foi obtido comparando os URLs da amostra com os do controle positivo (URL / CP). A amostra com valores de URL / CP foi considerada positiva positiva? 1,0 pg / ml. A carga viral relativa foi dividida em quatro categorias de acordo com seus valores de PG / ML; De 1 a menos de 10 pg / ml (carga viral relativa baixa), de 10 a menos de 100 (carga viral relativa intermediária), de 100 a menos de 1000 (carga viral relativa alta), igual ou superior a 1000 (viral carga parente muito alta) 27.
Deve-se notar, que os profissionais que participaram do processamento das amostras e relatórios de resultados de CH II (R) não conheciam os resultados da citologia, portanto, Houve independência nos resultados da leitura de ambas as metodologias.
Análise estatística
A análise dos dados foi realizada usando procedimentos de estatística descritiva e o programa (CDC, ATLANTA) EPIIINFO versão 3.2. Para identificar a associação entre o tipo de tratamento, o tempo decorrido do tratamento e frequência da infecção por HPV, a análise do qui-quadrado foi realizada pelo programa EPIIINFO versão 3,2. Para todas as análises de dados realizadas, os valores de p < 0,05 foram considerados estatisticamente significativos.
Resultados
A idade média do 122 As mulheres incluídas no estudo foram 34 ± 10 anos (IC95% 17-67). Foi possível obter informações sobre as características socioeconômicas, história obstétrica e comportamento sexual de 86% da população em estudo (105/122 mulheres) (Tabela 1).
no total, 28% foi observado (34/122) Tratado por SIL positivo para o HR-HPV, detectando a infecção viral em 20% das mulheres com ausência de SIL (NSIL) (22/108), 83% das mulheres com LSIL (10/12) e 100% das mulheres com HSIL (2 / 2) (Tabela 2).
deve ser notado, que não foram observadas diferenças significativas entre as frequências de HR-HPV de acordo com o tipo de tratamento, apresentando presença de infecção Viral 27/97 (28%) mulheres tratadas com Leip e 7/25 (28%) mulheres tratadas com conização (p = 0,7).
Com relação ao tempo decorrido do tratamento, não diferença significativa entre As frequências de RH-HPV foram observadas em mulheres que compareceram a tomar detecção de infecção viral até 1 ano após o tratamento (32% de mulheres), e aqueles que compareceram após ano (20%, 9/4 mulheres), p = 0,1.
Em relação à carga viral relativa, das mulheres positivas totais para HR-HPV foi de 29% (10/34) com altos ou mais valores. De acordo com o diagnóstico citológico, apresentaram valores relativos de carga viral alta ou mais 28% das mulheres com NSIL, 30% com LSIL e 50% com HSIL. Deve-se notar que em mulheres com valores de carga virais relativos baixos foram observados (Tabela 3).
Frequência de mulheres tratadas por escamosos intraepiteliais positivos Lesões para HR -HPV por CH II (R) de acordo com valores relativos de carga viral.
discussão
el paraguai, é um país com alta incidência de pré-lesões -neoplássica e câncer cervical, considerando este problema de saúde pública. O estudo realizado apresenta resultados preliminares de detecção de HR-HPV por CH II (R) de acordo com o diagnóstico citológico em mulheres tratadas por SIL.
No presente trabalho, a frequência de mulheres tratadas por SIL positiva para HR – O HPV (28%) foi comparável ou maior do que os detectados no Brasil de 33% (22/67 mulheres) e 22% (16/74 mulheres); Coréia de 18% (44/243 mulheres) e Bélgica de 29% (21/72 mulheres), apresentando nestes estudos mulheres positivas para HR-HPV uma alta frequência de 18 a 44% da recorrência de Sil16.28-30 . Que sugere, que realiza a detecção de HR-HPV pós-tratamento, pode ser uma ferramenta útil no acompanhamento e orientação das mulheres tratadas.
em relação à citologia, 20% das mulheres com NSIL foram positivos para HR-HPV. Essa falta de concordância entre CH II (R) e citologia pode ser devida ao fato de que a técnica Chi II (R) permite detectar a presença viral mesmo na ausência de lesões6,22. Estudos anteriores sugerem que as mulheres com NSIL e HR-HPV positiva têm maior risco de desenvolver lesões cervicais, observando Koutsky et al, que 30% das mulheres com diagnóstico citológico normal e positivo para o HR-HPV desenvolveram lesão na intraepithel durante o curso de 2 anos . Deve-se notar, que 80% (86/122) de mulheres com o NSIL apresentaram resultados negativos para o HR-HPV, que, considerando o alto valor preditivo negativo da CH II (R), apresentam um risco reduzido de desenvolver lesões de alto nível14, 16-18.31-35.
Os resultados observados no presente trabalho sugerem que a frequência de HR-HPV em mulheres tratadas não varia em relação ao tipo de tratamento e o tempo decorrido para realizar o tratamento pós-tratamento Controle (até 2 anos), que pode ser devido ao fato de que existem outros fatores que poderiam influenciar a persistência da infecção por HPV após o tratamento.Estudos anteriores observaram que as mulheres com HSil infectadas com o HPV 16, 18, 33 e 45, bem como com múltiplos tipos de pré-leep ou conticionamento de HPV, têm uma frequência significativamente maior de recorrência ou recorrência de infecção viral após tratamento15,36, 37 .
Com relação à carga viral relativa, o trabalho anterior sugere que os pacientes com carga viral relativa alta e persistente têm um risco aumentado para desenvolver o HSIL em um curto período de tempo, mesmo na ausência de alterações citológicas detectáveis38, 39. De acordo com os resultados observados neste estudo, em relação ao diagnóstico citológico, aumentando a gravidade da SIL foi observada uma maior frequência de mulheres com uma carga viral alta ou muito alta. Deve-se notar, que em mulheres com HSIL não observaram baixos valores de carga virais relativos, que indica, bem como outros trabalhos que mulheres positivas para o HPV com baixa carga viral relativa têm menor probabilidade de desenvolver lesões de HSIL. Portanto, os resultados sugerem que os valores relativos de carga viral podem contribuir para orientar o controle pós-tratamento das mulheres, identificando as mulheres em risco de re-desenvolvimento de lesões de pescoço uterino38.39.
a O presente estudo tem algumas limitações, porque não foi possível completar o tamanho da amostra de 144 mulheres e não foram contados com os dados relativos de carga viral antes do tratamento, os resultados observados sugerem que o uso do CH II (R) para detecção de A RH-HPV e a determinação da carga viral relativa de forma complementar à citologia podem contribuir para identificar mulheres tratadas por lesões pré-neoplásicas em maior risco de desenvolver recorrências. Os dados obtidos poderiam contribuir para fortalecer o programa nacional para a prevenção, detecção e tratamento do câncer do colo do útero, o ministério da saúde pública e o bem-estar social (MSP e BS), que visa melhorar o serviço nas unidades de atenção primária ( APS).