Valutazione della cromatografia ionica per favorire il suo utilizzo in studi di ricerca e post-laurea nella scienza dell’acqua

Training-Trenning-Vol. 2 Nº1-2009, P.: 7-16

Articoli

Valutazione della cromatografia dei ioni per incoraggiare il proprio utilizzo in ricerca e studi post-laurea in Scienze Acqua

Valutazione di cromatografia ionica per motivare il suo utilizzo in ricerca e studi di laurea in Scienze dell’acqua

Eduardo Trujillo, Guadalupe Fonseca, Miriam A. García e Verónica Martínez
Universidad Autónoma del Stato Messico, Facoltà di Ingegneria , Cerro de Coatepec S / N, Cu, 50130 Toluca, Edo. Dal Messico-Messico
(E-mail: [email protected], [email protected])

Summary

La tecnica della cromatografia ionica è stata valutata per incoraggiare il proprio uso in Studi di ricerca e post-laurea nelle scienze dell’acqua. I campioni di acqua naturale sono stati analizzati con tecniche convenzionali e HPLC e si è scoperto che la cromatografia ionica genera meno della metà del volume di rifiuti in relazione alle tecniche convenzionali, detriti che sono meno tossici e in concentrazioni di mg / l. Inoltre, i costi sono diminuiti di 3,5 volte quando si utilizza HPLC, i tempi medi sono ridotti da 3 giorni a 4 ore e gli errori sperimentali sono minori. I risultati trovati consentono di affermare che la cromatografia ionica è una tecnica analitica qualitativa e quantitativa, veloce, economicamente, sensibile e affidabile e che può essere eseguita da studenti addestrati, non richiedendo una lunga specializzazione.

Parole chiave: cromatografia Ionic, attività di ricerca, scienze idriche, insegnamento

Astratto

In questo documento, la tecnica di cromatografia ionica è stata valutata per motivare il suo uso in studi di ricerca e laureati nelle scienze dell’acqua. I campioni di acqua sono stati analizzati da tecniche convenzionali che da HPLC e fu scoperto che la cromatografia ionica genera meno di metà dei rifiuti tecniche convenzionali, sprechi che sono meno tossici e con un livello di concentrazione di mg / l anche, quando è utilizzato HPLC, I costi sono ridotti di un fattore di 3,5, il tempo medio diminuisce da 3 giorni a 4 ore e gli errori sperimentali sono inferiori. I risultati mostrano che la cromatografia ionica è una tecnica analitica veloce, economica, sensibile e affidabile che può essere eseguita da studenti formati, non richiedendo personale altamente specializzato.

Parole chiave: cromotografia ionica, attività di ricerca, scienze dell’acqua, insegnamento

Introduzione

Negli ultimi 35 anni, l’HPLC (cromatografia liquida ad alte prestazioni – cromatografia liquida ad alta risoluzione) è diventata il metodo della separazione analitica per eccellenza, diventando il terzo team standard in I laboratori analitici, dopo squame e potenziometri (Kromidas, 2005). La cromatografia liquida può essere classificata in base alla natura della fase stazionaria in cromatografia liquida liquida, adsorbimento, esclusione molecolare e scambio di ioni o comunemente chiamato cromatografia ionica (Skoog e Haller, 2003). La costante ricerca della crescente produttività del laboratorio ha portato allo sviluppo di sistemi completamente automatizzati, rendendo l’HPLC uno strumento ideale per l’analisi di una vasta gamma di composti termici non adeguati all’analisi della cromatografia del gas (soniasy et al. , 1994).

Attualmente, le nuove tecniche HPLC identificano, purificano e quantificano, essendo di grande rilevanza in quasi tutte le aree dell’analisi strumentale per diversi motivi: a) il grado di automazione che ha raggiunto con i computer e il software, b) la capacità e la varietà delle loro colonne, c) la diversità delle fasi mobili da utilizzare, d) i rilevatori non distruttivi, E) l’iniezione diretta di miscele complesse, f) la loro efficienza e velocità nell’analisi di composti e / o ioni, rispetto ai metodi convenzionali, e g) il rilevamento di ioni inorganici a basse concentrazioni (Skoog e Ovest, 2004). Tradizionalmente, HPLC è stato applicato principalmente nella separazione di vitamine, steroidi e lipidi idrosolubili; Vitamine solubili in grassi, carboidrati e acidi; Nucleomico; Proteomica; per il monitoraggio clinico e forense del farmaco; per il monitoraggio ambientale di aria e acqua; E anche per analizzare gli inquinanti ambientali come pesticidi polinucleari e aromatici (McMaster, 2007). In generale, HPLC viene applicato per determinare numerosi composti organici in tutti i tipi di campioni, essendo particolarmente adatti per composti poco volatili, intermedia e priorità intermedia e come una tecnica complementare alla cromatografia del gas.

Per quanto riguarda l’analisi dell’acqua Con HPLC, il lavoro è stato effettuato da diversi approcci. Dawson et al. (2003), misurava le concentrazioni di cloramina in acqua destinate alla coltivazione del pesce; Vichkovitten et al.(2007) hanno identificato basse concentrazioni di trihalose in sedimenti delle acque costiere. D’altra parte, Amaro et al. (2005), hanno studiato il contenuto di CR (VI) e CR (III) nelle acque di un’industria cromata prima e dopo essere passata attraverso un processo di conversione ed eliminazione. Zhou et al. (1994), hanno determinato che nitriti in acqua, Moliner (2005) determinavano l’ammonio tra gli altri parametri di qualità dell’acqua, mentre, Bruzzoniti et al. (2008) determinati acidi solforici e alchil solfati in acqua. Nei sistemi del suolo ad acqua, Shimamoto e Takahashi (2008) hanno portato a HPLC per determinare le specie di iodio, mentre la valle et al. (1996) rilevato Caat (cloodiamine-S-Triacina) in campioni di acque sotterranee e pavimenti. In relazione alle acque naturali dei fiumi cloacali e liquidi, vela e delfino (2001) determinati composti fenolici. Dionex Corporation ha identificato composti esplosivi e sostanze relative all’acqua per bere (Dionex, 2007); fenoli in acqua minerale in bottiglia e bevendo (Dionex, 2008); Allo stesso modo, ha eseguito un’analisi di anonioni inorganiche in acqua per bere (Dionex, 2003) e Aguas ambientali (Dionex, 2001).

Molte opere ambientali relative alla risorsa idrica sono solitamente collegate alla determinazione del singolo Ioni con metodi convenzionali (spettrometria volumetrica, turbidimetrica e assorbimento atomico). La cromatografia ionica diventa importante in questo settore poiché può essere identificata e quantificata le anoni e le cazioni in concentrazioni molto basse (0,05 mg / l o meno, a seconda del rilevatore, della definizione di fase mobile e della colonna utilizzata), senza utilizzare reagenti pericolosi. Poiché per HPLC non esiste un sistema di rilevamento universale con alta sensibilità come per la cromatografia del gas, il rilevatore da utilizzare dipende principalmente dalla natura del campione e può essere ultravioletto, disposizione di diodo, fluorescenza o conduttività elettrica (Skoog e Haller, 2003).

Organizzazioni normative come USEPA, ASTM, AOAC e ISO hanno approvato metodi basati su HPLC per l’analisi dell’acqua (Dionex, 2003). I metodi 4110 A. di APHA-AWWA-WPCF e 300,0 dell’EPA propongono l’uso della cromatografia ionica come tecnica strumentale di misura sequenziale e rapida per la determinazione dei vari ioni presenti in acqua superficiale, industriale, bere e sotterranea (Apha- AWWA-WPCF, 1992).

Una delle grandi sfide affrontate dagli istituti di ricerca e dagli studi ambientali avanzati, è quello di ottenere i loro risultati in base all’analisi chimica con qualità e velocità, dal momento che coadyuvan nel reale e preciso Soluzione di problemi ambientali.

All’università autonoma dello stato del Messico, le facoltà di chimica e ingegneria hanno attrezzature HPLC. Alla Facoltà di Chimica, il team è utilizzato principalmente per la ricerca nella chimica organica, recentemente ha iniziato a sviluppare lavori ambientali. La facoltà di ingegneria, attraverso il centro di risorse idriche inter-americane ha utilizzato l’attrezzatura per la determinazione dei pesticidi, i composti organoclorini e gli idrocarburi aromatici in acqua superficiale con scarichi industriali trattati.

Il centro di risorse inter-americane del centro di risorse Offrire l’acqua post-gradura in scienze d’acqua a livello di master e dottorato; La linea di ricerca sulla qualità dell’acqua comprende progetti di ricerca di studenti e progetti studenteschi. Nonostante i vantaggi della tecnica in quanto tale, i professori-ricercatori e studenti non sono stati in grado di accedere perfettamente a tali benefici, come aspetti quali: a) bassa affidabilità della loro applicazione nella determinazione degli ioni nell’acqua applicando tecniche di analisi. Approvato convenzionale e Consigliato negli standard ufficiali, b) Ignoranza dei costi di analisi da parte dei ioni Chromatography vs. Tecniche convenzionali e c) la mancanza di risorse umane formate per l’operazione.

Molti studi che richiedono la determinazione di cazioni e anioni in acqua, possono essere sviluppati in modo facile, veloce, economico, con maggiore precisione E precisione e senza generare grandi volumi di rifiuti tossici, se le tecniche HPLC vengono utilizzate al posto dei convenzionali. In particolare, la ricerca di studenti laurea, ha spesso budget molto bassi, che li costringe a eseguire meno campionamenti e analisi, impedendo loro di sviluppare correttamente i loro progetti, una situazione che influisce sui risultati globali ottenuti, nella soluzione adeguata dei problemi e in il tuo caso, nella generazione limitata e nell’applicazione della conoscenza.

Pertanto, l’obiettivo di questo lavoro è quello di effettuare un confronto dell’applicazione delle tecniche convenzionali e dell’HPLC per la determinazione delle anioni e delle cazioni in acqua, valutare l’efficienza, la sensibilità, l’affidabilità, il tempo di analisi e i costi, a Fornire elementi che incoraggiano l’uso della cromatografia ionica, nella formazione di studenti laureati e ricerca nella scienza dell’acqua.

Materiali e metodi

Preparazione del campione

20 campioni Sono stati presi lungo un corso d’acqua superficiale alimentato da molle e pioggia, per la coltivazione della trota, nelle acque di questo tipo è importante rilevare ioni e tracce a basse concentrazioni. L’assunzione e la conservazione dei campioni per entrambe le tecniche sono stati eseguiti in base a ciò che è stabilito nello standard ufficiale messicano. Secondo il valore di DBO5 (< 2MG / L) e il tipo di acqua da studiare, non è stato necessario applicare i processi per eliminare la materia organica. I campioni per la cromatografia sono stati filtrati 3 volte con membrane milliproreò da 0,45 mm di dimensioni del poro, al fine di rimuovere le possibili particelle presenti, per le sue diluizioni di analisi sono state eseguite a seconda della relativa abbondanza dell’acqua più sotterranea (Chapman, 1992), i campioni diluiti erano i campioni diluiti posto in fiale, debitamente identificata.

Uno studente di ingegneria chimica è stato addestrato nella gestione del team HPLC per determinare quattordici ioni per cromatografia; Il 50% di loro è stato eletto casualmente, in modo che lo stesso studente sarebbe quantificato da tecniche convenzionali, per l’altro 50%, le percentuali di errore ottenute attraverso lettere di controllo rilasciate dal laboratorio di qualità dell’acqua del Centro Inter-Americano delle risorse idriche.

Tecniche analitiche convenzionali

Tecniche analitiche convenzionali di turbidimetria, volumetrica e spettrometria di assorbimento atomico (tabella 1) sono state utilizzate, per la determinazione di dodici parametri, in base agli standard ufficiali messicani.

Apparecchiature cromatografiche

Un dispositivo di marca HPLC THERMOFINNIGAN è stato utilizzato Spectrasstem del modello, che include i seguenti moduli: a) Sistema di serbatoio di fase mobile SCM 1000 con degasser; b) Sistema di pompaggio P2000; e c) Sistema di iniezione del campione AS1000. Tutti i moduli sono controllati da un sistema di comunicazione cromquest. È stato utilizzato un rivelatore di conducibilità, il modello Alltech 650. I test sono stati eseguiti in diversi flussi, a partire dal raccordo dal sistema Chromquest (1,0 ml / min), variando fino a quando la migliore definizione è stata ottenuta nel cromatogramma, che era da 0,8 ml / min e un tempo di stabilizzazione di 20 minuti, seguendo il metodo proposto da Dionex (2001, 2003).

La calibrazione è stata eseguita mediante uno standard esterno. La convalida dei metodi relativi ai limiti di rilevamento e quantificazione, precisione e precisione per ciascun metodo è stato effettuato in base a ciò che è stabilito nei metodi standard (APHA, AWWA-WPCF, 1992), nonché nella risposta della linea base. L’accuratezza del metodo è stata valutata in condizioni di ripetibilità e riproducibilità, mentre l’accuratezza del metodo è stata valutata in termini di recupero percentuale. La quantificazione è stata determinata dall’area sotto la curva di ciascun picco, che è direttamente proporzionale alla concentrazione di ciascun ione, secondo il software dell’apparecchiatura.

Tabella 1: tecniche analitiche convenzionali

Parametro	Tecnica / Mexican Standard	Principio
Alkalinità	Volumetric NMX-AA036-SCFT-2001	Determina l’alcalinità nell’acqua usando come soluzione di riciclaggio una soluzione acida di concentrazione nota.
cloruri	Volumetric NMX-AA-073-SCFI-2001	Attraverso la formazione di cloruro d’argento Utilizzo dell’indicatore dei ioni cromate.
durezza	volumetrico NMX-AA.072-SCFI-2001	ritiene La formazione di complessi EDTA con ioni Ca2 + e MG2 +.
N-ammoniaca (/ p>	volumetrico NMX-AA-26-2001	Il gruppo di ammonio è alcalino con idrossido di sodio, l’ammoniaca rilasciata, distillata e assorbita in una soluzione di acido borico, che viene successivamente intitolata.
n-nitriti	Colorimetrico APHA-AWWA-WPCF (1992)	si basa sulla riduzione del nitrato in nitrito In presenza di cadmio, il nitrito è determinato dalla diazonizzazione del sulfanylamide per formare un Azo.
n -nitrates	Colorimetrico NMX-AA-079-SCFI-2001	La nitriti è determinata dalla diaZotizzazione del sulfanilamide per formare un AZO.
P-fosfati	Colorimetrico NMX-AA-029-SCFI-2001	ritiene la reazione del fosforo con l’acido di fresatura per formare acido 12-moibdofosforico che è ridotto da cloruro di latta.
SOLFATE	Turbidimetrico NMX-AA-074-SCFI-2001	Gli ioni di solfato sono precipitati come un solfato di bario.
sodio, potassio, zinco, calcio, magnesio	Assorbimento atomico NMX-AA-051-SCFI-2001	contemplo la generazione di atomi nello stato basale e la misurazione della quantità di energia assorbita da loro.

Determinazione delle anioni

Il metodo Met-anion-1 è stato implementato per identificare le anive di carbonato (CO32-), cloruri (CL-), fosfati (PO43-), nitriti (NO2 -), nitrati (NO3-) e solfati (SO42-). Una colonna PXP-X100, 100 x 4,1 mm è stata utilizzata, con una fase mobile di acido P-Hydroxybenzoico 4.0mm, pH 8.9: metanolo (97,5: 2,5). Per impostare la curva di calibrazione, una soluzione standard di 50 mg / l è stata preparata per ciascuna anione (da uno standard 1000 mg / l) e successivamente le soluzioni standard da 0,001 a 15,0 mg / l.

Determinazione di Cationi

Il metodo Met-Catation-3 è stato implementato per identificare le cazioni di ammonio (NH4 +), calcio (CA2 +), Cobalt (CO2 +), Nichel (NI2 +), Magnesio (MG2 +) , Potassio (k +), sodio (na +) e zinco (zn2 +). Una colonna di cazione universale è stata utilizzata 100 x 4,6 mm. Sono state testate tre diverse fasi in movimento, acido metasulfonico da 3 mm, acido citrico da 5 mm e acido citrico da 2 mm / acido ossalico 1mm, selezionando infine quest’ultimo, perché è stata identificata una buona definizione e un numero maggiore di cationi. La calibrazione è stata effettuata preparando una soluzione a 50 mg / l per ogni catazione (da uno standard di 1000 mg / l) e dalle soluzioni standard da 0,001 a 15,0 mg / l.

Risultati e discussione

mediante cromatografia ionica, i ioni di maggioranza (calcio, potassio, magnesio, sodio, carbonati, cloruri e solfati), il secondario (ammonio, nitriti, sono stati identificati e quantificato. Nitrati e fosfati) e ioni di tracciamento (zinco e cobalto), le cui concentrazioni sono presentate nelle tabelle 2 e 3. Nelle figure 1 e 2, due dei cromatogrammi generati dall’attrezzatura sono mostrati, dove i picchi ioni sono stati apprezzati

Fig. 1: Anioni cromatogramma

Il tipo di acqua studiata è poca mineralizzata e con una significativa presenza di specie di azoto, quindi solo la polarità della fase mobile è stata considerata una delle condizioni per migliorare l’efficienza in La determinazione delle anioni, selezionando così la miscela di acido P-Hydroxybenzoic: il metanolo senza avere la necessità di utilizzare un tampone ELUENT, come raccomandato da Dionex (2003); Per le cazioni è adeguata una fase mobile con una miscela di acidi tartari e ossalici. Queste condizioni hanno consentito una buona sensibilità e selettività, oltre a maggiore precisione e precisione. La Tabella 2 può essere vista una maggiore sensibilità nella determinazione delle concentrazioni ottenute da HPLC che da tecniche convenzionali.

Fig.2 Cromatograma DE Caonas

Tabla 2: Concentraciones Obtenidas por Métodos Convencionales (c) y hplc (h), en mg / l,
(m *: número de muestra; ld: limita Mínimo de Detección del Amonio (10-4), Según Apha (1992))

M *

ión

NH4 +

CA2 +

CO32 –

CL –

MG2 +

NO3 –

NO2 –

H

C

H

c

h

c

h

C

H

C

H

c

h

c

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< ld

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< 1.0

< ld

< 1.0

< 1.0

< ld

< 1.0

< LD

< 1.0

< ld

< 1.0

< LD

< 1.0

< ld

< 1.0

< LD

< 1.0

< LD

< 1.0

< ld

< 1.0

Las Tablas 4 y 5 muestran los porcentajes de error promedio para las dos técnicas utilizadas. It La Tabla 5 SE Presentan Los Porcentajes de Error Derivados de Técnicas Convencionales ForteCidos Porb Laboratorio de Calidad del Agua, Según Sus EstánDares de Control. SE Puede Observar en la tabla 4 commeer errori obtenidos por el estudiantes en las técnicas conven tencionales iscilan entre 6.4 y 18.5%, mientras ques por cromatografía iónica varían de 0,002 A 5,9%.

en el caso de error de Los Parámetros Por Técnicas Convencionales, en General, Los Valores del Laboratorio (1,5-5,0%) Fueron Menores Que Los del estudiante, tal y como se esperaba; Confondo a La Cromatografía Iónica (0,08-4,8%) SE Osservationó Un Menor Promedio De Errore (Tabla 5). Los iones níquel y cobalto figlio elementos que secuentan a nivel traza en el agua, por lo que se requere se valutare ledande condiciones diferentès tanto de columna como de fase móvil (dionex, 2003).

tabla 3: Concentraciones Obtenidas por hplc, en mg / l

núm.de muestra	Ión
	PO43 –	ni2 +	k +	na +	SO42 –	ZN2 +	P> CO2 +
							< 0.001
		< 0.001					< 0.001
	< 0.001
		< 0.001
	< 0.001						< 0.001
	< 0.001
	< 0.001
	< 0.001
	< 0.001
	< 0.001
	< 0.001
	< 0.001

Tabla 4: Porcentajes de Error Registrados It Las Deterinaciones del Estudiante
(El Carbonato ES Calculado a partir de la alcalinidad)

parámetro	% de errore. Técnica Convencional	% de errore. Técnica HPLC
amonio
calcio
carbonato
cloruuro
magnesio
Nitratos
nitritos

tabla 5: Porcentajes de Error Registry Ados en Las Deterinaciones del Estradiante – Laboratorio
(El Cobalto y niquel no lo determinazione el laboratorio por técnicas conven tencionales)

parámetro	% de errore. Técnica Convencional	% de errore. Técnica HPLC
cobalto
fosfatos
níquel
POTASIO
sodio
Solfatos
CINC

en cuaroso a los aspectos técnicos, analítico y económicos de hplc con relazioni a los métodos convencionales, se identificaron las siguientes ventajas: a) el volumen de los residuos generados por hplc (330 ml) por muestra con tres ripetiones, fue menos de la mitad del volumen generado por los métodos convencionales ( 700 ml), éstos últimos Sin Ripetionions; B) Prestene Un Menor Límite de Detección Y non sindaco precisión; c) los residuos producidos por cromatografía iónica figlio de menor tossicidad y en concenceniones de mg / l, mientras que para los convencionales secremenda la toxicidad y concentración a mg / l; d) El Costo de Análisis Para Los Catorce Iones, Por HPLC ($ 41 USD) ES 4.5 Veces Minor Quen Métodos Convencionales ($ 187 USD); e) La Cromatografía Iónica Garanteza Riservados Con Carácter de Urgencia Para Los Iones Estudiados; El Tiempo Promedio Para Los Análisis Convencionals Es de aproximadamente 3 Días por Muestra, Mientals Quen Por HPLC El Tiempo Promedio ES de 4 Horas, con Tres Ripetiones di Muestra.

en cuanto a las desvajas osservadas secuentran: a) el costo inabile del equilibrio, b) el costo de contrado de mantenimio (si seto adquisire), c) el costo de los consumibles del equilibrio, d) El Tiempo Adicional Para La Costubización del equilibrio y la columna, yd) la necesidad de contar con personale capacitado.

A Través de la técnica de hplc se obtienen Risultatos simultáneos de identificación y cuanificación de cationes y aniones presentano en El Agua, Esto Se Logra Gracias Al Análisis Concurrente de Soluutos en Disolución Acuosa Utilizando Columnas de Alta Definizione, permeitiendo El Análisis Secuencial de cationes Mayoritararios (Sodio, potasio, calcio y magnesio) y algunos trazas, como en este casò, cinc y cobalto. Aunque La Columna Utilizada en Estest Estudio Permistió Determinar Cinc Y Cobalto, La Técnica Recomendada Es La Espectroscopía de Absorción Atómica. Confondo a Las Técnicas Convencionales, éstas Permeten Determinar de forma individuale La concentración de cada ión, lo è incremental el tiempo de trabajo con relazioni a las técnicas de cromatografía.

la técnica strumentale (HPLC) SE Caracteriza por Su simplicidad y tiempos cortos de análisis lo sta ayuda a obtener una rápida caracterización de iones inorgánicos presenta en el agua (Hatsis y lucy, 2003), contribuendo al estudio de la calidad de aguas naturali (Whelan et al., 2004; Noij y bobeldijk , 2003).

Conclusione

El análisis de los risultados, permesso stabilimento las siguientes conclusioni:

1. LA CROMATOGRAFÍA IÓNICA HA DEMOSTRADO SER UNA TÉCNICA ANALÍTICA DE SEPARACIÓN CULITATIVA Y CUANTITATIVA, RAPIDA, ECONÓMICA, SENSITIVA Y Comitabile, Para La Determinazione De Aniones, Siempo Una Técnica alternativa A La Espectroscopia de Absorción Atómica Para El Análisis de Caonis presenta engue natural.

2. El Sistema HPLC Básico, Las Colubando, Solventes y mantenimiento, figlio costososos parados con los equipos y materias utilizados en las técnicas convencionales para la determinazione de iones; Sin Embargo, Por Los Beneficiali Que Aporta La Cromatografía, Risulta Ser non inversoón Convende.

3. Los Desechos Generados por HPLC Son Menos Tóxyos y de Menor Volumen Que Los Producidos por Técnicas Convencionales, Lo Que Impacta en Minor Medida al Medio Ambiente.

4. DADO QUE Gran Parte del Proceso Está Automatizado, errori Los Derivados de la interventivión humana figlio mínimos cuando semplea cromatografa iónica, además, la técnica puede serredida por personale afín a la química analítica, peccato afectar significativamente la confiabilidad de los risultados. En estudios de posgrado, los estudiates puede realizar sus i propios análisis ante la falta de personal en los laboratorios.

5. HPLC Puede Depibuir a Las Investigaciones de Profesores Y Estudiantes de PosGrado, Relacionadas con la calidad del Agua, disordinata Tiempos y optimizando presupuestos, peccato Menoscabar La confiabilidad de los risultados.

6.I risultati trovati in questo studio e i vantaggi rilevati, suggeriscono la possibilità di incorporare queste tecniche negli standard ufficiali messicani.

Riconoscimenti

Riconoscimenti

Alla Segreteria di Ricerca e Studi avanzati dell’Università Stato autonomo del Messico per il supporto e il finanziamento a questo progetto.

Riferimenti

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