Rilevamento del virus del papilloma umano ad alto rischio da parte di Hybrid Capture II® Secondo i risultati citologici nelle donne trattate da lesioni cervicali intraepiteliali, periodo 2006/2010

Introduzione

Cancro cervicale è il terzo tumore più frequente nelle donne al mondo, con 529.828 nuovi casi e 275.128 morti, di cui 31.712 erano in America Latina e Caraibi. L’85% dei nuovi casi si verifica nei paesi in via di sviluppo. L’età standard di incidenza standardizzata in Sud America è 24,1 x 100.000 donne. A Paraguay, il tasso di incidenza e mortalità è di 35,0 e 16,6 x 100.000 donne rispettivamente. Questo tasso è molto più alto di quelli registrati in altri paesi limitrofi come Argentina, Brasile, Uruguay e Cile1.

Il papillomavirus umano (HPV) è un fattore necessario per lo sviluppo del cancro cervicale, ci sono più di 100 tipi di HPV, di loro circa 40 infetti la mucosa animentale, questi sono classificati in base al loro potenziale oncogenico in virus ad alto rischio (HPV) e a basso rischio (LR-HPV), con HR-HPV (16, 18, 31 , 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 55, 51, 52, 56, 58, 59, e 66) rilevato in oltre il 95% dei casi di cancro cervicale2-5.

Citologia è un semplice e basso- Metodo di costo utilizzato per rilevare l’effetto citopatico prodotto dal virus, ma non determina il tipo virale. Poiché HPV non cresce nelle colture cellulari convenzionali, negli ultimi anni sono stati utilizzati metodi molecolari in grado di rilevare il genotipo virale come cattura ibrida II (R) (CH II (R)), che rileva 13 tipi di HR-HPV e fornisce una stima Valore del carico Virral 6.7.

Non c’è ancora alcun trattamento per eliminare l’infezione correlata all’HPV, ma se per lesioni prodotte dal virus. Le metodologie utilizzate per il trattamento sono: il processo elettrosurgico elettro-elettrochirurgico, la crioterapia e il conizzazione elettrosurgica (ciclo elettrosurgico. Nonostante la possibilità di trattare lesioni intraepiteliali prodotte da HPV c’è probabilità di recidiva o sviluppo del cancro cervicale. Se la lesione si estende al margine endocervicale, il rischio di guasto del trattamento è maggiore, comprese le donne che hanno margini privi di lesioni hanno il rischio di guasto del trattamento del 2-6%, indipendentemente dal trattamento utilizzato. La ragione accumulata dell’invasione in 8 anni dopo il trattamento è di 5,8 per 1000 donne, che a sua volta è 5 volte maggiore che nella popolazione generale8-14.

Oltre a considerare i margini chirurgici commessi come fattore di ricorrenza, Ci sono altri cofattori che favoriscono la persistenza o la recidiva delle lesioni squamose intraepiteliali dopo il trattamento come l’età, la parità, la diagnosi citologica e il grado di lesione prima del trattamento15.

per quanto sopra è importante un continuo e meticoloso follow-up dopo il trattamento. Studi recenti suggeriscono che l’uso combinato di citologia insieme a CHI II (R), aumentare l’efficacia per selezionare le donne trattate a rischio di sviluppare lesioni residue o ricorrenti intraepiteliali (SIL), a sei mesi di trattamento16-19.

In Paraguay, gli studi precedenti hanno osservato un’elevata frequenza di HR-HPV nelle donne con l’assenza di lesioni cervicali, nonché i fattori di rischio (alto numero di coppie sessuali, multiprity, tra gli altri) associate allo sviluppo del cancro cervicale, comparabili o maggiori di quelli rilevati in altri paesi in via di sviluppo, che potrebbero parzialmente spiegare l’alta incidenza di questo cancro nel nostro Country20-23.

Nel paese non ci sono lavori sulla frequenza di HR-HPV nelle donne Trattato da SIL, quindi, considerando il comportamento sessuale delle donne paraguaiane che potevano favorire l’acquisizione di infezione virale post-trattamento e aumentare il rischio di recidiva, L’obiettivo del presente studio preliminare è stato quello di determinare la frequenza di HR-HPV da CH II (R) secondo i risultati citologici nelle donne trattate da SIL di Cervix, periodo 2006-2010.

Materiali e metodi

Studio descrittivo del taglio trasversale di una serie di casi, effettuata con 122 donne trattate infortuni cervicali trattati che sono venuti consecutivamente al Dipartimento di Sanità pubblica ed Epidemiologia dell’Istituto di ricerca nelle scienze sanitarie (IOC) della National University di Asunción (uno) nel periodo 2006/2010 con un’indicazione medica per il rilevamento di HR-HPV da CH II (R).

Il Trattato Le donne derivano da Iics, una, da diversi centri sanitari pubblici e privati dal dipartimento centrale di Paraguay. In questo studio, le donne che avevano una diagnosi citologica della ferita prima del trattamento sono state incluse, che sono state trattate con un’antensione di almeno 6 mesi e che dopo il trattamento avesse una diagnosi citologica aggiornata al momento del rilevamento di HR-HPV di CH II (r). Coloro che sono andati in Iics, uno, con più di 2 anni di trattamento sono stati esclusi. Il trattamento applicato dipendeva dai criteri medici e si basava sul manuale nazionale degli standard e delle procedure per la prevenzione e il controllo del cancro cervicale del ministero della sanità pubblica e del benessere sociale del Paraguay24.

Prima del trattamento, Delle 122 donne, 79 presentato la diagnosi istologica confermata di SIL di SIL di basso grado (LSIL) e 43 elevati eletti (HSIL). Delle donne totali, 97 sono state trattate con leep e 25 con conizzazione.

Tutto compreso le donne sono state condotte un questionario che consisteva in dati demografici, da dati socioeconomici, gyneco-ostetrici e comportamenti sessuali. Tutte le informazioni sono state elaborate nel rispetto della riservatezza dei pazienti. Il lavoro è stato approvato dal Comitato Etico IICS della National University di Asunción, No M07 / 10

La dimensione minima del campione di 144 donne trattate è stata calcolata utilizzando la tabella Appendice 13e per uno studio descrittivo con variabile dicotomica , considerando il 30% della frequenza prevista di HR-HPV dopo il trattamento, con un’ampiezza (?) di 0,15 e un’intervallo di confidenza del 95%.

Rilevamento di lesioni al collo uterino nelle donne trattate dalla citologia

Lo studio citologico è stato effettuato nei centri sanitari partecipanti. L’assunzione del campione consisteva in una spazzolatura cervicale che è stata collocata in un foglio glassato identificato correttamente. In breve, i fogli sono stati immersi per 15 minuti in un contenitore a bocca larga con alcol rettificato (96%) sufficiente per coprire l’intera superficie di esso. Quindi, la lama del contenitore è stata rimossa lasciandola asciutta per 10 minuti e è stato posizionato lo spray fisso. I risultati citologici sono stati classificati secondo il sistema Bethesda 200126.

Rilevamento HR-HPV nelle donne trattate da CH II

Il campione è stato raccolto nell’iics, uno, utilizzando un pennello endocervicale (Cytobrush), che è stato introdotto in un tubo da collezione, fornito dal produttore, Qiagen (Germania).

I campioni sono stati elaborati dal metodo CHI II Rilevando 13 tipi di HR-HPV: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 55, 51, 52, 56, 58, 59 e 68. Seguendo il protocollo del produttore, i campioni cervicali sono stati trattati con idrossido di sodio per denaturalizzare il DNA. Il semplice DNA del filo era ibridato in soluzione con un cockey dell’RNA dei 13 tipi di HR-HPV. Ogni miscela di reazione contenente alcuni ibridi RNA-DNA, è stata trasferita a una micropiana ben sensibilizzata ben sensibilizzata, consentendo la sua immobilizzazione. Il RNA ibrido-DNA collegato all’anticorpo è stato contattato con un secondo anticorpo coniugato a una fosfatasi alcalina. Il materiale non adulato è stato rimosso da successivi lavati, quindi è stato aggiunto un reagente chemiluminescente (LUMI-PHS 530), come substrato per la fosfatasi alcalina. La luminescenza prodotta dalla reazione è stata misurata da un luminamometro. L’unità di misura della luce è stata espressa come unità relative di luce (RUS). I controlli positivi e negativi forniti da Qiagen sono stati utilizzati da Triplicati.

Il relativo valore di carico virale è stato ottenuto confrontando gli URL del campione con quelli del controllo positivo (URL / CP). Il campione con valori URL / CP è stato considerato positivo positivo? 1.0 pg / ml. Il relativo carico virale è stato diviso in quattro categorie in base ai suoi valori PG / ML; Da 1 a meno di 10 PG / ml (carico virale relativo basso), da 10 a meno di 100 (carico virale relativo intermedio), da 100 a meno di 1000 (alto carico virale relativo), uguale o superiore a 1000 (virale carico relativo molto alto) 27.

Va notato che i professionisti che hanno partecipato al trattamento dei campioni e del rapporto dei risultati del CH II (R) non conoscevano i risultati della citologia, quindi, C’era indipendenza nei risultati della lettura da entrambe le metodologie.

Analisi statistica

L’analisi dei dati è stata eseguita utilizzando le procedure di statistiche descrittive e il programma (CDC, ATLANTA) EpiInfo versione 3.2. Per identificare l’associazione tra il tipo di trattamento, il tempo trascorso dal trattamento e dalla frequenza di infezione da HPV, l’analisi chi-square è stata eseguita dal programma Epiinfo versione 3,2. Per tutte le analisi dei dati eseguite, i valori di P < 0,05 sono stati considerati statisticamente significativi.

Risultati

L’età media del 122 Le donne incluse nello studio sono state 34 ± 10 anni (IC95% 17-67). È stato possibile ottenere informazioni sulle caratteristiche socioeconomiche, la storia ostetrica e il comportamento sessuale dell’86% della popolazione in studio (105/122 donne) (tabella 1).

tabella 1
Caratteristiche socioeconomiche, sfondo ostetrico e comportamento sessuale delle donne trattate da lesioni cervicali intraepiteliali di cervice.

In totale, è stato osservato il 28% (34/122) delle donne Trattato da SIL Positivo per HR-HPV, rilevando l’infezione virale del 20% delle donne con assenza di SIL (NSIL) (22/108), 83% delle donne con LSIL (10/12) e il 100% delle donne con HSIL (2 / 2) (Tabella 2).

tabella 2
Risultato di HR-HPV da CH II (R) nelle donne trattate da lesioni scolastiche intraepiteliali in base alla diagnosi citologica.

Va notato che non sono state osservate differenze significative tra le frequenze HR-HPV in base al tipo di trattamento, presentando la presenza di infezione Le donne virali 27/97 (28%) sono trattate con leep e 7/25 (28%) donne trattate con conizzazione (p = 0,7).

rispetto al tempo trascorso dal trattamento, non significativa differenza tra Le frequenze HR-HPV sono state osservate nelle donne che hanno partecipato a rilevare l’infezione virale fino a 1 anno dopo il trattamento (32% di donne) e coloro che hanno partecipato dopo anno (20%, 9/45 donne), P = 0.1.

In relazione al relativo carico virale, delle donne positive totali per HR-HPV è stato del 29% (10/34) con valori elevati o più. Secondo la diagnosi citologica, hanno presentato i relativi valori di carico virale elevati o più il 28% delle donne con NSIL, il 30% con LSIL e il 50% con HSIL. Va notato che nelle donne con hsil non sono stati osservati valori di carico virali relativi bassi (Tabella 3).

Tabella 3
Frequenza delle donne trattate da Scalata intraepiteliale positiva Lesioni per HR -HPV da CH II (R) secondo i relativi valori di carico virale.

discussione

El Paraguay, è un paese con alta incidenza Di pre-infortuni -Neoplassics e cancro cervicale, considerando questo problema di salute pubblica. Lo studio ha effettuato presenta risultati preliminari del rilevamento HR-HPV da CH II (R) secondo la diagnosi citologica nelle donne trattate da SIL.

Nel presente lavoro, la frequenza delle donne trattate da SIL positive per HR – HPV (28%) è stato comparabile o maggiore di quelli rilevati in Brasile del 33% (22/67 donne) e del 22% (16/74 donne); Corea del 18% (44/243 donne) e Belgio del 29% (21/72 donne), che presentano in questi studi donne positive per HR-HPV un’alta frequenza dal 18 al 44% della ricorrenza di SIL16,28-30 . Il che suggerisce che eseguendo il rilevamento del post-trattamento HR-HPV, potrebbe essere uno strumento utile nel follow-up e nell’orientamento delle donne trattate.

In relazione alla citologia, il 20% delle donne con NSIL loro erano positivi per HR-HPV. Questa mancanza di accordo tra CH II (R) e citologia potrebbero essere dovute al fatto che la tecnica CHI II (R) consente di rilevare la presenza virale anche in assenza di infortuni 6.22. Gli studi precedenti suggeriscono che le donne con NSIL e HR-HPV positivo hanno un rischio più elevato di sviluppare lesioni cervicali, osservando Koutsky et al, il quale il 30% delle donne con diagnosi citologica normale e positiva per HR-HPV ha sviluppato lesioni intraepithel durante il corso, naturalmente 2 anni . Va notato che l’80% (86/122) delle donne con NSIL ha presentato risultati negativi per HR-HPV, che, considerando l’elevato valore predittivo negativo di CH II (R), presenta un rischio ridotto di sviluppare lesioni di alta qualità14, 16-18.31-35.

I risultati osservati nel presente lavoro suggeriscono che la frequenza di HR-HPV nelle donne trattata non varia in relazione al tipo di trattamento e il tempo trascorso per eseguire il trattamento post Controllo (fino a 2 anni), che potrebbe essere dovuto al fatto che ci sono altri fattori che potrebbero influenzare la persistenza dell’infezione da HR-HPV dopo il trattamento.Studi precedenti hanno osservato che le donne con HSIL infettate da HPV 16, 18, 33 e 45, oltre a tipi multipli di pre-leep o conizzazione HPV, hanno una frequenza significativamente più elevata di recidiva o recidive di infezione virale dopo il trattamento15,36, 37 .

Per quanto riguarda il relativo carico virale, il precedente lavoro suggerisce che i pazienti con un carico virale relativo elevato e persistente abbiano un rischio aumentato di sviluppare HSIL in un breve periodo di tempo anche in assenza di alterazioni citologiche rilevabili38, 39. In conformità con i risultati osservati in questo studio, in relazione alla diagnosi citologica, aumentando la gravità di SIL è stata osservata una frequenza maggiore delle donne con un carico virale alto o molto alto. Va notato, che nelle donne con HSIL non ha osservato bassi valori di carico virale relativi, che indica così come altri lavori che le donne positive per HPV con un basso carico virale relativo hanno una bassa probabilità di sviluppare lesioni HSIL. Pertanto, i risultati suggeriscono che i relativi valori di carico virale potrebbero contribuire a orientare il controllo post-trattamento delle donne, identificando le donne a rischio di ri-sviluppare l’infortunio al collo uterino38.39.

A sebbene il Lo studio del presente ha alcune limitazioni, perché non è stato possibile completare la dimensione del campione di 144 donne e non è stata conteggiata sui relativi dati di carico virale prima del trattamento, i risultati osservati suggeriscono che l’uso del CH II (R) per il rilevamento di HR-HPV e determinazione del relativo carico virale in modo complementare alla citologia potrebbe contribuire a identificare le donne trattate da lesioni pre-neoplastiche a rischio più elevato di sviluppare recidive. I dati ottenuti potrebbero contribuire a rafforzare il rafforzamento del programma nazionale per la prevenzione, il rilevamento e il trattamento del cancro cervicale, il ministero della sanità pubblica e del benessere sociale (MSP e BS), che mirano a migliorare il servizio nelle unità di cura della salute ( APS).

Lascia un commento

Il tuo indirizzo email non sarà pubblicato. I campi obbligatori sono contrassegnati *