Introduzione
Sacchetto della tecnologia dei silos per immagazzinare i grani asciutti è diventato uno strumento importante per gli agricoltori in Argentina e altri paesi del mondo (Bartosik, Comunicazione personale) . Sacchetto di silos Con una maggiore capacità di stoccaggio ha dimensioni che raggiungono 100 metri di diametro di lunghezza e 4,3 m e hanno una capacità di 500 tonnellate di cereali, sebbene la capacità più comune sia di 200 tonnellate. Le silos della borsa sono relativamente impermeabili per acqua e hanno un alto livello di ossigeno idrossido (O2) e anidride carbonica (CO2). La respirazione dei componenti sfusi (cereali, insetti e funghi, tra gli altri) consuma l’O2 e genera CO225. Ciò crea condizioni sfavorevoli per la sopravvivenza di funghi e insetti, prevenendo perdite di qualità da grani36. Tuttavia, quando i cereali sono conservati con livelli di umidità sopra il consigliato come assicurazione (per mais, grano e soia: 14%; per girasole: 11%) (http://www.cosechaypostcosecha.org, consultato nell’aprile 2015 ), C’è un’alta probabilità che rigidi microrganismi aerobici, alcuni anaerobici facoltati come batteri e lieviti. Persino alcune specie fungine, come la fusarium oxysporum, sono in grado di cambiare il loro metabolismo e adattato alle condizioni di assenza di O242.
Numerose specie di fusarium, aspergillus e penicillium e altri generi colonizzano i grani nel campo e possono Continua il loro sviluppo in condizioni di conservazione. Poiché alcuni di loro hanno il potenziale per produrre micotossine, oltre a alterare le proprietà fisiche dei cereali, questi agenti possono causare svantaggi alla salute umana e animale. Le manifestazioni della tossicità negli animali sono diverse come le specie dei funghi che producono questi metaboliti, aspetto che ha causato una preoccupazione globale per la sicurezza alimentare e alimentare. Il consumo ripetuto di basse dosi di aflatossine, prodotto da Aspergillus flavus, ha un effetto mutagenico e cancerogeni negli animali, oltre a essere letale ad alte dosi. Fumonisins, prodotti da specie di fusarium, sono stati relativi ad alcune malattie specifiche, come leucoencefaloma equino e sindrome dell’edema polmonare in Porcinos7. Mentre è noto che le specie di Aspergillus e Penicillium presentano una maggiore competitività durante lo stoccaggio di cereali asciutti rispetto alle specie di fusarium22,33, la specie di questo genere può crescere durante lo stoccaggio quando i grani sono bagnati.
Il deterioramento prodotto da funghi in grani immagazzini dipende da una serie di fattori, che possono essere classificati come tipo extrinson, intrinseco e tecnologico. I fattori estrinsei sono associati a condizioni ambientali, come temperatura, umidità relativa e tensione di O2 e CO2. I fattori intrinseci sono legati alla composizione chimica e alle proprietà fisiche dei cereali, mentre i tipi tecnologici comprendono la posizione dei cereali nei diversi settori delle strutture che li contengono, in questo caso particolare, con riferimento al sacchetto di silos. Questi fattori condividerebbero la crescita dei funghi, la potenziale produzione di micotossine e la qualità finale del grano immagazzinato. Per questo motivo, è compresa la rilevanza di rilevare la presenza di popolazioni fungine, oltre a conoscere la sua distribuzione e dimensioni e fattori ambientali che condiziona il suo sviluppo sui cereali immagazzinati all’interno delle borse.
Le informazioni compilate può essere utilizzato per progettare strategie e applicare le pratiche correttive durante la coltivazione o la conservazione ed evitare le perdite di qualità del grano, principalmente dalla produzione di micotossine.
L’obiettivo di questo studio è stato caratterizzato popolazioni fungine, in particolare mycotossigene, che colonizzano Grani di mais memorizzati in sacchetto di silos con umidities maggiori di quelli raccomandati e valutano anche fattori estrinsi e intrinseci e tecnologici che potrebbero influenzare tali popolazioni.
Materiali e sacchetto di métosi
I campioni di mais sono stati ottenuti da 5 sacchetti di silos situati nel Sud-est della Provincia di Buenos Aires, Argentina (37 ° 45 ° 45 ° 18 ‘o; 130m sul livello del mare). Il sacchetto di silos (polietilene di 250 μm di spessore) era lungo 60 metri, 2,5 m di diametro, 1,7 m alti e una capacità di stoccaggio di 180 tonnellate di grani ciascuno. Il contenuto di umidità dei grani registrati per ciascuno dei 5 sacchi di silos durante il raccolto era superiore al 14,5%.I silos della borsa identificati come 1, 2, 3, 4 e 5 hanno presentato valori di umidità del 16,8%, 16,9%, 15,7%, 15,4 e 17,4%, rispettivamente. La preparazione del silos Bolsa si è tenuta a luglio (Silos Bolsa 1 e 2) e agosto (Silos Bolsa 3, 4 e 5) del 2010, e questi sono stati estratti nel dicembre 2010 (Silos Bolsa 1 e 2) e gennaio 2011 (Silos Borsa 3, 4 e 5). In totale, sono stati analizzati 270 campioni di fagioli di mais, estratti da 3 strati del profilo verticale del silos della borsa. Lo strato superiore comprendeva una profondità da 0 a 0,2 m, lo strato medio da 0,2 a 0,6 m e lo strato inferiore da 0,6 a 1,8 m. Inoltre, dal punto di chiusura delle borse, sono state stabilite diverse aree per l’estrazione dei campioni, situati in 6 settori equidistanti lungo il silos bolsa: a 10m (zona 1), i 20m (zona 2), 30 m (zona 3 ), 40m (zona 4), 50m (zona 5) e 60 m (zona 6). I campioni sono stati raccolti con un’insalata di grani lunghi da 1,8m, in 3 tempi di stoccaggio: alla chiusura del sacchetto di silos (tempo 1), dopo 90 giorni (tempo 2) e prima dell’apertura del sacchetto del silos o della fine del periodo (tempo 3). In ogni strato e zona, sono stati raccolti 3 campioni di circa 1,5 kg per formare un campione composto da 4,5 a 5 kg. I cereali raccolti sono stati posizionati su sacchetti di carta e conservati a 4 ° C fino a quando la loro analisi.
Analisi fisiche e chimiche
all’interno del sacchetto di silos è stato registrato la temperatura del profilo di massa nel 3 volte del campionamento. Per questo, è stato utilizzato un tubo di temperatura portatile dotato di sensori a 3 punti, che è stato inserito nel centro di ogni sacchetto silo a 30m dalla chiusura di ciascuno (tra zone 3 e 4). La posizione di ciascun sensore ha coinciso con i 3 strati del profilo verticale della borsa.
La concentrazione di O2 e CO2 dell’atmosfera interna delle borse è stata determinata nei tre tempi di stoccaggio e per le 6 zone , anche se è stato considerato solo lo strato medio del profilo verticale, perché i gas si diffondono verticalmente. Per questa misura un misuratore di gase portatile (punto di controllo, PBI, Dan Sensor, Danimarca) è stato utilizzato.
Il contenuto di umidità dei grani è stato misurato con un misuratore di umidità (Dickey-John, GAC 2100, USA) . Il pH dei cereali in soluzione acquosa è stato anche registrato in un rapporto di 2: 1 (20 ml di acqua distillata: 10 g di grani del terreno), con l’uso di un peachmetro digitale e portatile (modello di Oakton PH11, N ° Series 203852, Singapore ).
quantificazione, isolamento e identificazione del microotita
il conteggio dei funghi filamenti e il lievito è stato eseguito dalla tecnica delle diluizioni decimali in tubo e semina (in duplicato) nelle piastre di piatti di Petri con il lievito Agar Agar cloramfenicol glucosio (YGCA , Merck®, USA UU) 29 Per fare questo, e da ogni campione, le sospensioni sono state realizzate con 10 g di cereali in 90 ml di soluzione diluente (0,1%) di Casein Pepton (Britannia®, Argentina). Le piastre sono state incubate a 25 ° C (nell’oscurità) per 7 giorni e il numero totale di colonie che formano unità (UFC / G) sono state determinate, nonché di ogni genere o specie identificate. I valori UFC / G sono stati trasformati per LOG10 UFC / G per eseguire analisi statistiche.
Per ottenere gli isolati per l’identificazione, ogni colonia con caratteristiche morfologiche diverse è stata coltivata di nuovo nelle targhe di Petri con YGCA durante 7 giorni a 25 ° C e nell’oscurità. I ceppi puri sono stati conservati ad una temperatura di -20 ° C in glicerolo ad alta purezza (Biopack®, Argentina) ad una concentrazione al 35% V / V in acqua.
L’isolamento delle specie di penicillium, Aspergillus, Eurotium , Eupenicillium, wallemia, clasporium, epiccocum, acremonium e lieviti sono stati identificati con tasti tassonomici29. Gli isolati delle specie di fusarium sono stati identificati da tasti specifici15,26.38,41. Per la denominazione della specie, l’ultimo aggiornamento della nomenclatura del codice internazionale della nomenclatura (ICN) 20.30 e il fungorum indice sono stati consultati (http://www.speciesfungorum.org, consultato nell’aprile 2015).
Le identificazioni delle specie di fusarium e una specie di Aspergillus sono state confermate dall’analisi filogenetica del fattore di allungamento della trascrizione 1 ALPHA (TEF1) con i primer EF-728M / EF239, con la metodologia proposta da Chaverri e Samuels8. Le reazioni di sequenziamento sono state condotte su un terminatore BIGDYETM V 3.1 (applicato Biosystems, USA) Attrezzature, basato sul metodo del Sanger e sulle sborrate con l’analizzatore genetico 3130xL in Sigysa (Argentina). Un allineamento con Clusalw è stato eseguito in Mega 4.1 delle sequenze ottenute insieme alle sequenze di riferimento salvate nella Genbank.Le analisi del parsimony sono state eseguite in Nona con l’uso dell’ambiente wincluded con ricerca euristica con 10000 ripetizioni e strategia di ricerca TBR, e il supporto dei rami è stato calcolato sulla base di un bootstrap di 1000 repliche. Per queste analisi, le sequenze di specie ravvicinate sono state aggiunte come gruppo di controllo esterno.
Determinazione delle micotossine
composta da chicchi di 5 kg sono stati formati da ciascuno strato, comprese le 6 zone di ciascuna delle 5 sacchetti di silos, e loro Sono stati deferiti alla Fondazione della ricerca scientifica Teresa Benedetto di La Cruz, Luján (Provincia di Buenos Aires), dove sono stati valutati. La presenza di aflatossine è stata studiata (Afla: B1, B2, G1, G2), Zearalenone (Zea) e DeoxinivaleNol (Don), secondo il Romer No. My8402S, versione 94,237 e Fumonisins (FB1, FB2, FB3) è stato studiato Con il protocollo AOAC, il metodo ufficiale 995.152. Per quanto riguarda le quantifiche di cui sopra, è stata utilizzata la cromatografia liquida ad alta risoluzione (HPLC). Il sistema HPLC utilizzato è stato dalla serie Agilent 1100 (Germania), che includeva un degatatore G1322A, un campionatore automatico G1322A, un rilevatore di fluorescenza G1313A, un rilevatore di fluorescenza G1321A, una pompa QUATTERNARIA G1311A e un regolatore di temperatura G1316A.
Analisi statistica
Perché Le osservazioni fatte all’interno dello stesso sacchetto silo non potevano essere assunte come statisticamente indipendenti, l’uso di modelli lineari misti che ci hanno permesso di studiare gli effetti dei fattori di interesse e allo stesso tempo il modello della possibile struttura di correlazione tra le osservazioni. I modelli lineari misti sono stati regolati per determinare l’effetto fisso dello strato, l’area della nave, il tempo di conservazione e le sue interazioni sul pH, l’umidità dei cereali, il numero totale di funghi e il lievito UFC e Il numero totale di Fusarium SPP UFC. E da A. Flavus. Questi modelli hanno anche incorporato gli effetti casuali della borsa, dello strato, della zona e del tempo, per incorporare una correlazione positiva tra osservazioni effettuate nello stesso livello di uno qualsiasi di questi fattori. D’altra parte, i modelli adeguati per analizzare le concentrazioni di O2 e CO2 non consideravano l’effetto fisso dello strato, e per la temperatura non consideravano l’effetto fisso dell’area della borsa. È stata utilizzata la funzione LME del pacchetto “NLME” del linguaggio R34. Quando è stato rilevato l’effetto significativo dei fattori (P
0.05), sono stati eseguiti simultanei più confronti delle misurazioni stimate dal modello, utilizzando la funzione “GLHT” del pacchetto “MUSCUP” R19. Questa funzione utilizza la distribuzione del giunto T di tutte le differenze di mezzi stimate per essere confrontate, senza correggere il livello di significato da parte dei confronti multipli, in modo simile a un significativo test di differenza minimo. Analisi fisica e chimica
Al momento dei grani in confezione , il contenuto di umidità media considerando 5 sacchi di silos era 16,4 ± 0,7%, mentre alla fine del periodo analizzato i valori aumentati in modo significativo (P = 0,005) a 16,7 ± 1, dell’11% nello strato superiore. La temperatura dei grani è stata aumentata da 8,6 ° C all’inizio dello stoccaggio a 22,8 ° C a 5 mesi di spazio di archiviazione. A quel tempo, la temperatura era significativamente diversa nei 3 strati analizzati: questo era più alto nello strato superiore rispetto allo strato medio (P = 0,029) e inferiore (P
0,001). Le concentrazioni di O2 e CO2 durante la conservazione possono essere osservate nella tabella 1. All’inizio dello stoccaggio, i livelli di O2 variavano tra il 19.20 e il 19,66% e i livelli di CO2 compresi tra 0,76 e l’1,30%. Dopo il tempo passa, i livelli di O2 sono stati progressivamente ridotti, mentre la CO2 è aumentata. Un effetto di interazione significativo è stato rilevato tra l’area del silo della borsa e il tempo di archiviazione per il livello di O2 (P = 0,0054) e CO2 (P = 0,0226). La concentrazione di CO2 è stata aumentata verso il terzo campionamento ed era significativamente diverso (P = 0,0091) tra le zone. La concentrazione O2 è diminuita significativamente verso la fine del periodo analizzato e sono state rilevate anche concentrazioni significativamente diverse (p = 0,0003) tra le zone del silos della borsa. Il pH dei cereni variava in modo significativo tra gli strati (P0,001) e i tempi (P = 0,0036): la più alta acidità è stata registrata nello strato superiore e verso la fine del periodo di stoccaggio (tabella 2).
Evoluzione delle concentrazioni di CO2 e O2 nell’atmosfera dei grani di mais memorizzati in sacchetto di silos
I valori corrispondono ai mezzi ± dalla borsa 5 silos. Diverse lettere minuscole all’interno della stessa colonna indicano differenze significative (P0.05) tra le diverse aree valutate. Le diverse lettere maiuscole all’interno della stessa riga indicano differenze significative (p0.05) tra i diversi tempi.
Evoluzione del pH dei grani di mais memorizzati in sacchetto di silos
| TIME | è | EM | EI | Medio |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 6, 12 ± 0,1 | 6,14 ± 0,0 | 6.16 ± 0,1 | 6,14 ± 0,1 a |
| 2 | 6.13 ± 0.1 | 6.15 ± 0,1 | 6, 17 ± 0,2 | 6,15 ± 0,1 A |
| 3 | 5.88 ± 0.0 | 5.90 ± 0.0 | 5.93 ± 0.1 | 5.90 ± 0,1 B |
| media | 6.04 ± 0,1 c | 6,06 ± 0,1 B | 6.09 ± 0.1 A | – |
I valori corrispondono alle calze ± dalla borsa da 5 silos.
Tempo 1: chiusura del sacchetto di silos; Tempo 2: 90 giorni di stoccaggio; Tempo 3: cinque mesi di stoccaggio.
Lettere diverse indicano differenze significative (P0.05) tra strati o tempi.
è: Stratismo superiore; Em: medio strato; Ei: strato inferiore.
composizione del microotita
Il numero TOTAL LOG10 UFC / G All’inizio dello stoccaggio era 4,11 ± 0,5 e prima che l’apertura delle borse fosse 4,42 ± 1,0) (Tabella 3). Sebbene non siano state registrate differenze significative nei conteggi totali tra i tempi (P > 0,05) e le zone del sacchetto di silos (P > 0,05), è stato determinato un effetto significativo dello strato (P = 0,0314), in cui lo strato superiore ha registrato un numero maggiore di UFC / G rispetto allo strato inferiore.
Evolución del recuento totale de la micobiota en granos di maíz almacenados en silos bolsa
| Recuento totale (log10UFC / g) | ||||
|---|---|---|---|---|
| Tiempo | ES | EM | EI | media |
| 1
4.21 ± 0.3 |
4.07 ± 0.6 | 4.11 ± 0,5 a | ||
| 4.28 ± 0,7 | 4.05 ± 0.8 | |||
| 3 | 4.64 ± 1.0 | 4.46 ± 1.0 | 4.15 ± 0.9 | 4.42 ± 1,0 a |
| media | 4,36 ± 0,7 a
4.26 ± 0,7 a 0.8 ± 4.09 b – |
|||
Genere | Numero di especies |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| T1 | T2 | T3b | ||
| Penicillium spp. Collegamento
51.40 7 10 11 |
||||
| Aspergillus spp. Fr.:Fr. | 5.71 | 2 | 0 | 0 |
| Fusarium spp. Collegamento
11.40 4 4 4 |
||||
| Eupenicillium spp. A. Ludw. | 2.85 | 1 | 0
1 |
|
| Cladosporium sp. Collegamento | 2.85 | 1 | 0 | 0 |
| Epicocum sp. Collegamento | 2.85 | 0
1 |
0 | |
| Wallemia sp. (Fr.) Arx | 2.85 | 0
1 |
0 | |
| 5.71 | 0
1 2 |
|||
| Moniliella sp. Stolk & Dakin | 2.85 | 0 | 0
1 |
|
| Acremonium spp.Link | 2,85 | 1 | 1 | 1 |
| iphopichia spp. (Biidin et al.) ARX & | 2,85 | 1 | 1 | 1 |
| candida spp. Berkhout | 2,85 | 0 | 1 | 1 |
| debaryomyces spp. Loder & KREGER EX KREGER | 2,85 | 0 | 1 | 1 |
proporzione di specie di ogni genere rispetto al numero totale di specie identificate.
Le specie di fusarium sono state isolate all’82,3% dei campioni totali analizzati durante i 5 mesi di spazio di archiviazione. Sulla base delle caratteristiche macroscopiche delle colonie e del microscopico delle strutture riproduttive e dello studio filogenetico con il pennarello TEF1, sono state identificate le seguenti specie fusarium: Verticilli fusarium (Sacc.) Nirenberg, Fusarium proliferatum (Matsushima) Nirenberg, sottocluomini fusarium (Wollenw e Reinking) Nelson, Toussoun e Marasas e F. Oxysporum Schlecht. Emendo Snyd. e Hans.
Per quanto riguarda Aspergillus spp., dalla caratterizzazione morfologica degli isolati e dello studio delle sequenze STI identificati 2 specie nel primo tempo di archiviazione, in tutte le sacchetti di silos. Tali specie appartenevano al sottogender circumdata, sezione Flavi, A. Link di flavus e la sezione Nigri, Aspergillus Niger Tiegh.
La presenza di Eurotium spp. È stato osservato nel secondo e nel terzo campionamento del 10% e il 37,8% dei campioni, rispettivamente. Le specie predominanti erano Eurotium Amstelodami L. Margine.
Per quanto riguarda il lievito, il 27,8% dei campioni di mais raccolti all’inizio dello storage ha mostrato la contaminazione con questo gruppo microbico, mentre alla fine del periodo erano isolati 58% di loro. I conteggi medi erano 3,3 ± 0,70 Log10 UFC / G e 4.62 (± 0,74) Log10 UFC / G all’inizio e alla fine dello stoccaggio, rispettivamente. La specie dominante era l’iphopichia Burtonii (Bidin et al.) ARX & Van der Walt, isolato il 91,9% dei campioni di cereali. Le specie rimanenti sono state classificate come appartenenti al genere Candida.
specie fungali con potenziale capacità di produrre mycotossine
f. Verticillilioides, F. Proliferatum, A. Flavus, P. Citrinum, P. Verrucosum ed E. Amstelodami furono isolate specie di campioni di grano di tutte le sacchetti di silos. La frequenza di isolamento e conteggi delle specie di fusarium è stata ridotta alla fine del periodo analizzato e Aspergillus non è stato trovato in quel momento. A. Flavus era isolato sull’11,44% dei campioni del tempo 1, con un conteggio di 2,73 ± 0,71 Log10 UFC / G. La percentuale di campioni contaminati con specie fusarium è stato ridotto a 5 mesi a un valore del 54,4%, nonostante il fatto che i conteggi non hanno presentato variazioni significative (p = 0,0552) tra il primo (2,83 ± 0, 92 Log10 UFC / G) e il terzo tempo di campionamento (3,18 ± 0,77 Log10 UFC / G). Al contrario, la specie di penicillium ed eurotio ha aumentato la frequenza di isolamento e abbondanza verso la fine dello stoccaggio. P. Citrinum era isolato al 3,30% di campioni di grano del secondo tempo e con un conteggio di 3,53 ± 0,60 log10 UFC / G, mentre P. Verrucosum era isolato dai campioni di grano raccolti nel secondo (0,55% dei campioni e dei conteggi di 2,3 ± 0.00 Log10 UFC / G) e nella terza volta di stoccaggio (3,88% dei campioni e conteggi di 2,98 ± 1,00 Log10 UFC / G) Il conteggio delle popolazioni SPP di Eurotium. È aumentato tra il secondo e il terzo tempo di archiviazione, ed è stato 2,08 ± 0,49 e 2,57 ± 0,49 Log10 UFC / G, rispettivamente.
Mycotossine
I campioni totali analizzati la contaminazione presentata con i fumonisini, mentre il 40% ha rivelato la presenza di Aflatossine. FB1 Fumonisins sono stati rilevati nel 100% dei campioni, FB2 Fumonisins al 86% e FB3 Fumonisins al 53%. D’altra parte, il 18,4% dei campioni ha presentato solo fb1; 18,4%, FB1 + FB2 e 47,3%, fb1 + fb2 + fb3 (tabella 5).
Concentración di fumonisinas (mg / kg) it granos di maíz almacenados en los cinco silos bolsa era così 90 Dias
| Fumonisinas | Valor Minimo | Valor Máximo | media | Mediana |
|---|---|---|---|---|
| 0.120 | 5,707 | 1.708 | 0,479 | |
| FB1 | 0.116 | 4.166 | 1.190 | 0.299 |
| FB2 | 0.067 | 1.217 | 0.446 | 0.196 |
| FB3 | 0.049 | 0,317 | 0.176 | 0,171 |
Cuando las analizaron è AF latoxinas Solo è Detecto la presencia en B1 di AFLA concentraciones Mínimas di 0,0003mg / kg di 0,0008mg Maximas y / kg.
Los Valores de micotoxinas determinados Al final del Almacenamiento o registraron incrementos riguardo de los niveles detectados in modo che 90 Dias (Cardoso, Comunicación personale). Las micotoxinas ZEA y entrare o detectadas fueron por las Técnicas empleadas.
Discusión
La temperatura, la actividad Agua (aw) y la Humedad de los GRANOS per factores condicionantes de la Colonizzazione fúngica y de la PRODUCCIÓN di micotoxinas Durante EL almacenamiento de los granos23. Tale embargo, hasta el Sonido o è realizaron estudios sobre la composición di gas de la atmósfera intergranaria y de la acidez de los granos, factores que podrían Contribuir a explicar el comportamiento de las poblaciones fúngicas en Sistemas de almacenamiento como los silos bolsa.
El Incremento de la Humedad Registrado hacia el final del almacenamiento en el estrato Superior de los silos Bolsa estudiados podría ser explicado por la Existencia di ESTRATIFICACION de la Humedad de los granos ubicados en Áreas de contacto con la cubierta plástica, causado posiblemente por ciclos repetidos di ADSORCION condensación di Agua y, como consecuencia de la variación diaria de la temperatura ambiente. Casini et al.5 comunicaron ESTRATIFICACION di Humedad en la capa superficiale granos di girasole almacenados PLÁSTICAS en Bolsas y con la la relacionaron disminución de la temperatura Nocturna, que Una provocó condensación de la superficie de los granos y de la Cubierta plástica.
Los cambios en la composición di O2 y di CO2 durante el período de la actividad almacenamiento reflejaron metabólica en el interior de los silos bolsa. Así que es la de los granos respiración y de la microbiota asociada redujo el nivel di O2 è Incremento el nivel di CO2, generando Una atmósfera anaerobiosi. Estos resultados con los riportati coinciden en Italia para el almacenamiento di granos di maíz di Trigo y en bolsa18 silos. Por otro lado, en la zona 1 (Cierre de la Bolsa) de los 5 silos bolsa al finale del almacenamiento è determinó la Mayor Concentración di O2, lo que podría indicar un Cierre inadecuado di aquellas; en consecuencia, è favorecería la PRODUCCIÓN di microambientes para el desarrollo de la micobiota aeróbica. Riguardo del pH de los Granos, è determinó su disminución en los granos ubicados en el estrato Superior hacia el tercer almacenamiento del Tiempo. Este resultado podría ser explicado a partir del registro de un Sindaco Numero di UFC / g totales en los granos dispuestos en dicho estrato, ocasionado por la actividad Sindaco metabólica. El comportamiento di variabile Esta en condiciones de almacenamiento hermético o estudiado fue hasta el Sonido. Por ello, el Monitoreo de la acidez de los granos Durante el almacenamiento Puede Contribuir a comprender y explicar la Dinamica de las Poblaciones fúngicas, y en Particular la de las micotoxigénicas Asociadas un ellos.
El recuento totale de la micobiota colonizó que los GRANOS di maíz o presento Variaciones attraverso del Tiempo, coincidiendo informado con lo por otros en investigadores Argentina28. Estos resultados determinados podrían estar por el Incremento de la Concentración di CO2 acidez y la de los Granos, y por la reducción del nivel di O2, que la actividad afectaron metabólica. Por el contrario, en Italia los reportes indicaron Una reducción en el recuento di hongos TOTALES Durante el almacenamiento di maíz en silos bolsa18.
Otro aspecto relevante d’Este estudio determinó que los recuentos fúngicos totales fueron afectados por el estrato (ubicazione de los granos en el perfil del silos verticali Bolsa): è encontraron los mayores valores en el estrato Superior y los menores en el inferiore.Questa scoperta differenziale nel conteggio della popolazione influenzata dalla posizione dei grani non è mai stata segnalata; Ciò potrebbe essere dovuto ai 3 fattori estrinsei spiegati sopra: a) l’aumento della temperatura nello strato superiore della borsa, in risposta a variazioni giornaliere della temperatura ambiente; b) l’esistenza della variazione di umidità nei cereali individuali situati nello strato superiore della borsa, causato da variazioni diurne e notturne di temperatura, che provoca la condensa sulla superficie dei grani, e c) l’influenza di un maggiore scambio di gas Tra l’ambiente e l’interno della borsa sui grani situati nella parte superiore Stratum35. Nello strato inferiore, sono stati generati anche i micromcoli dove la temperatura e l’umidità più bassa e il più basso scambio gassoso influenzano negativamente il metabolismo respiratorio, che potrebbero aver influito sulla sopravvivenza di diverse specie fungine, incluso mycotoxgenic.
per quanto riguarda la composizione di Popolazioni fungine, è stato osservato che la presenza di diverse specie è stata influenzata da condizioni ambientali dinamiche che dominavano l’interno della nave. All’inizio dello stoccaggio, le specie di fusarium e aspergillus erano isolate insieme ad altre specie associate a cereali. Tuttavia, la generazione di un ambiente anaerobico e l’aumento della temperatura e dell’acidità dei cereali come tempo di conservazione avanzato un micobiota dominato da specie di penicillium, eurotio e lievito. L’aumento del numero di campioni positivi con Eurotio verso la fine dello stoccaggio potrebbe essere dovuto al fatto che questo genere è tollerante allo stress, le sue spore germogliano a una temperatura ottimale vicina a 30 ° C ed è in grado di adattarsi di più a acido PH16. Allo stesso modo, la frequenza di isolamento e il fianco conta sono aumentati verso la fine del periodo considerato. Mentre questi risultati non coincidono con quelli riportati da altri ricercatori in condizioni simili28, l’aumento potrebbe essere spiegato dal dominio di un’atmosfera anaerobica.
La frequenza di isolamento delle specie potenzialmente produttrici (A. Flavus e Fumonisins (F. Verticillilioides e F. proliferatum) è stato ridotto verso la fine dello stoccaggio. Alcuni ricercatori hanno riferito che le specie Aspergillus sarebbero adattate meglio alla crescita dei substrati con alcalina PH43, quindi la riduzione del pH dei cereali potrebbe aver influito sulla sopravvivenza di tali specie. D’altra parte, si potrebbe dedurre che, sebbene A. flavus sia considerato una specie favorita dalle condizioni di stoccaggio4, probabilmente avrebbe inconvenienti ad adattarsi alle condizioni ambientali di deposito in sacchetto di silos, con importanti restrizioni sulla concentrazione di O2 e l’aumento del acidità. L’identificazione di A. Flavus in mais in diverse condizioni di stoccaggio ha coinciso con gli informati da altri ricercatori in diverse regioni agroecologiche dell’Argentina10,17,32.
La frequenza di isolamento SPP Fusarium. Era ridotto verso la fine dello stoccaggio; Tuttavia, il suo conteggio della popolazione non ha registrato variazioni. Questi risultati sono d’accordo con quelli riportati da altri ricercatori in Argentina6,14 e in altri paesi13,31.
A differenza di quanto è accaduto con il conteggio totale delle popolazioni fungine, che è stata colpita dallo strato granaio, nessun effetto della posizione dei grani è stato rilevato nella borsa sul conte della fusarium specie. Per la prima volta viene comunicata che la posizione dei cereali all’interno del sacchetto silo non abbia influenzato il conteggio della popolazione; Forse ciò è dovuto al fatto che la specie di questo genere è associata al substrato di mais e sono meno influenzate dalle condizioni ambientali all’interno del silo Bolsa21,33.
La capacità delle specie di fusarium e di un. Flavus Per produrre fumonisine e aflatossine nel mais è stato dimostrato in diverse indagini effettuate nel nostro paese3. Tuttavia, in Argentina c’è solo una legislazione per le aflatossine totali e questo specifica i limiti massimi per le arachidi, il mais e i loro derivati, e per l’aflatossina M1 in fluido e latte in polvere (http://www.anmat.gov.ar/alimentos/codigoa, consultato in Aprile 2015). Per i restanti micotossine, l’Argentina ritiene che i limiti di tolleranza indicati dalla legislazione in vigore nella Comunità europea nella Comunità europea.
Totale livelli di fumonisina superati i valori massimi consentiti di 4 mg / kg11 in 3 dei campioni analizzati, corrispondenti 3 allo stesso sacchetto di silo (sacchetto di silo 3).I cereali di questo sacchetto silo erano crollati nel mese di agosto, in modo che le alte concentrazioni determinate possano essere spiegate da una maggiore permanenza di cereali nel raccolto, dove le specie di fusarium hanno maggiori vantaggi adattivi per colonizzare i grani e produrre mycotossin9. Questo aspetto è rilevante, poiché si potrebbe dedurre che un ritardo nella raccolta provocherebbe un accumulo di fumonisini nei cereali nel campo. Quei ricercatori che hanno analizzato Total Fumonisins in mais in diverse aree di produzione dei livelli determinati Argentina provenienti da 2.525 mg / kg a 11,528 mg / kg14 e da 0,01 mg / kg a 31,108 mg / kg28, dati che manifestano una variabilità contrassegnata.
Per quanto riguarda le aflatossine, i livelli registrati erano inferiori ai limiti stabiliti nel nostro paese per i grani di mais (0,020 mg / kg), che potrebbero essere correlati al minor adattamento di A. Flavus alle condizioni Descrizioni ambientali per l’area di studio . Questa specie è comunemente isolata nel mais coltivata nelle regioni centrali e del nord dell’Argentina, dove è favorito da temperature superiori a 30 ° C24.
tra le micotossine prodotte da Penicillium spp. Ocratossina A (OTA), pattulina e citrinina27 si distinguono. In questo studio, P. Citrinum e P. Verrucosum, potenziali produttori di citrinini e OTA, rispettivamente, erano isolati con bassa frequenza. Forse, la composizione gasa dell’atmosfera e l’aumento dell’acidità non ha favorito il loro sviluppo.
Con riferimento all’aumento di E. AmStelodami, attualmente non sono noti rapporti di produzione OTA per questa specie in mais immagazzinato in sacchetto di silos. Tuttavia, è stato riferito che questa specie ha prodotto OTA in cereali di cereali in stoccaggio1, quindi ci sarebbero stati gli studi necessari sulla produzione OTA da Eurotium spp. Nei grani di mais immagazzinati in sacchetto di silos da quando questo micotossina, così come quelli già menzionati, rappresenta un potenziale rischio per la salute umana e animale.
Mentre la conservazione dei cereali in sacchetto di silos costituisce un sistema semplice e con a Basso costo degli investimenti per preservare i grani, è necessario monitorare lo stato dei cereali prima di essere imballati e periodicamente in stoccaggio, al fine di rilevare con precisione il loro possibile deterioramento dovuto allo sviluppo di funghi. I dati sulla dinamica delle popolazioni micotossigeno e dei fattori che condiziona la loro apparizione e proliferazione forniti da questo studio potrebbero contribuire alla progettazione di strategie volte ad evitare l’alterazione della qualità dei cereali durante la conservazione. Si potrebbe essere correlata all’uso di diverse miscele di gas (con elevato contenuto di CO2), considerando la bassa caratteristica di permeabilità di plastica della nave. In questo modo, sarebbe un’alternativa valida per ridurre le perdite di qualità dei grani destinati al consumo umano e animale causato dalla produzione di metaboliti tossici, quando quelli conservati per periodi superiori a 5 mesi.
per quanto riguarda il Legislazione che stabilisce i limiti di tolleranza per diverse micotossine nelle materie prime e al cibo elaborato, sarebbe rilevante stabilire i valori massimi di tolleranza per i fumonisini, poiché la sua presenza è stata rilevata in un’alta percentuale di campioni di mais analizzati negli ultimi anni in Argentina, una situazione che potrebbe essere un problema per il marketing e l’industrializzazione dei cereali, sia per il consumo umano o animale.
Responsabilità etica Protezione di persone e animali
Gli autori dichiarano che per questa ricerca non è stato effettuato esperimenti nell’uomo o animali.
Riservatezza dei dati
Gli autori Dichiarano che in questo articolo non appaiono dati dei pazienti.
diritto alla privacy e al consenso informato
Gli autori dichiarano che i dati dei pazienti non appaiono in questo articolo.
Finanziamento
Il presente lavoro è stato finanziato Dalla National University of Mar del Plata (progetto AGR375 / 12) e il National Institute of Agricultural Technology (Progetto AEAI 274,420, Agroindustry Strategic Area), ed è stato presentato da Claudia C. Castellari come requisito parziale per ottenere il grado accademico del medico In scienze agricole presso l’Università Nazionale di Mar del Plata, Argentina.
Conflitto di interessi
Gli autori dichiarano di non avere conflitto di interessi.