sistema inmunitario en peixes
Sistema inmune de peixe
Susana E. Olabuenaga *
* Membro da carreira do investigador de Conicet. Cátedra de Ictiopatoloxía, Bariloche Centro Rexional da Universidade, Universidade Nacional de Comehue, Quintral 1250, Unidade Postal Univiversidade Nacional de Comahue, 8400 Bariloche, Rio Negro. Correo electrónico: [email protected]
a función esencial do O sistema inmune en todos os vertebrados é a defensa contra as infeccións. Os peixes presentan unha resposta inmune ben desenvolvida e integrada e, no caso das telEOSTS, con algunhas similitudes con respecto aos vertebrados superiores. Pódese dividir en dous tipos: innata ou non específica e adquirida ou específica, ambos compostos por unha parte humoral e celular. A súa importancia pode variar coa idade do peixe e está influenciada por diferentes factores. Os seus compoñentes máis relevantes son mencionados aquí. No peixe hai dous factores que inflúen notoriamente a resposta inmune ea produción de anticorpos, que son cambios e temperatura estacionais. Os principais órganos linfóeses, o timo, o riñón e o bazo, así como o proceso ongénico linfocítico. Mentres se realizou o progreso nos últimos anos, aínda son necesarios estudos de inmunoloxía básica en diferentes especies que axudan a caracterizar as poboacións efectoras e os seus mecanismos de acción.
Palabras clave: antíxeno, anticorpo, leucocitos, fagocitose, linfochines, inflamación, inmunostimulantes.
abstracto
A defensa contra as infeccións é a función esencial do sistema inmunitario de todos os vertebrados. Os peixes presentan unha resposta inmunolóxica eficiente e desenvolvida e no caso das telEOSTS, con certa similitud cos vertebrados máis altos. Pódese dividir en dous tipos: innata ou non específica e adquirida ou específica, ambos con comprimens humoral e celular. A súa relativa importancia pode cambiar de acordo coa idade do peixe e está sempre baixo a influencia de diferentes factores. Os compoñentes máis relevantes son mencionados aquí. Existen dous factores en peixes que inflúen fortemente na resposta inmune e a produción de anticorpos, cambios estacionais e temperaturas. Os principais órganos linfoides descríbense aquí: o timo, o riñón eo bazo, así como o proceso ontogénico do linfocito. Algúns avances no coñecemento foron publicados durante os últimos anos, pero aínda é necesario desenvolver novos estudos en inmunoloxía básica en diferentes especies para caracterizar as poboacións celulares efectoras e as súas funcións.
Palabras clave: antíxeno, anticorpo, leucocitos, fagocitose, linfocinas, inflamación, inmunostimulantes.
Introdución
A función esencial do sistema inmunitario en todos os vertebrados é a defensa contra as infeccións, este sistema Permite a supervivencia do individuo e manter as súas funcións corporais nun medio que por natureza é hostil. Os peixes son un grupo moi divergente representado aproximadamente 20.000 especies que ocupan diferentes hábitats. Os estudos filoxenéticos indicaron unha diverxencia entre os protostoms (annelid, moluscos, artrópodos) e deuterostomes (echinoderms, tunicados, cordados) que tiveron lugar ao redor de 500 a 600 millóns de anos e é desde este último grupo que os peixes foron desenvolvidos en diferentes direccións (Jarvik 1980).
Dentro da liña de vertebrados son, primeiro, os elasmobranches (raias, tiburóns) que teñen inmunoglobulinas e moléculas do gran complexo de histocompatibilidad e seguen as teleosts que tamén presentan o suplemento do sistema e a proteína C reactiva (Marchalonis & Schluter 1994).
A resposta inmune dos peixes en xeral está ben desenvolvida e integrada, e en teleosts é onde se atopan moitas similitudes funcionais coa resposta observada en vertebrados máis altos; Xeralmente funciona de forma eficiente, aínda que como calquera outro sistema fisiolóxico, o sistema inmunitario dun individuo está afectado cando o estado de saúde é deficiente. En termos de poboación, cando as condicións ambientais son adversas, os riscos dun aumento de infección e a saúde do conxunto de especímenes están en perigo. Hai unha serie de factores que inflúen no desenvolvemento dunha boa resposta e ás veces deprimen significativamente.Estes clasifícanse en: factores intrínsecos ou aqueles inherentes ao peixe como a idade e o estado de saúde e os factores extrínsecos, como a temperatura, os cambios de tempada e os parámetros abióticos da auga. Dentro dos factores extrínsecos hai unha serie de estímulos que actúan negativamente nun sistema biolóxico e, a continuación, orixinan unha posterior reacción e que é coñecida como estrés, o peixe ten a capacidade de responder a ela e implica reaccións fisiolóxicas e de comportamento, que axuda a adaptarse a unha nova situación. Nalgúns casos, cando o estrés é prolongado ou se fai máis grave, pode superar a súa capacidade de axuste e producirse un colapso do sistema inmunitario e tamén doutros sistemas (Ellis 1981a). O efecto supresivo do estrés está mediado por hormonas, principalmente corticosteroides (Jeney et al., 1992). Cortisol é o glucocorticoide principal que se produce (na codia suprarrenal) nas células entrénicas dos propensos no peixe. A súa secreción aumenta a hormona adrenocorticotrófica (ACTH) que é á súa vez pola glándula pituitaria e está baixo un control positivo do factor de liberación corticotrofina (CRF) do hipotálamo. A inhibición do clásico sistema de comentarios sobre a secreción do CRF ocorre cando a concentración de cortisol no sangue aumenta. Cortisol é o máis común e bioloxicamente activo de corticosteroides en peixes.
Básicamente, a resposta inmune é unha cela e un mecanismo de defensa humoral inducido por un axente estranxeiro, que é o antíxeno (AG) e as células responsables do recoñecemento inicial dun vertebrado específico pertencen a liñas celulares E B. As células accesorias tamén son necesarias para o procesamento e presentación de antíxenos e mediadores fisiolóxicos chamados citoquinas para a proliferación, a interacción e a regulación.
O sistema de defensa de peixes, como en vértebres superiores, pode dividirse en dous tipos de mecanismos: sistema de defensa innata, natural ou non específico e sistema inmune adquirido ou específico. O primeiro é o que posúe todos os seres vivos do nacemento, formados por compoñentes celulares e humorales, eo segundo implica a produción de anticorpos a través dun recoñecemento específico do antíxeno e tamén participan os elementos celulares. A importancia relativa de ambos pode variar coa idade do peixe e están influenciados por diferentes factores. No caso das telEOSTS, o sistema defensivo está composto por subpopulacións de leucocitos, incluíndo linfocitos B e T, granulocitos, trombocitos, macrófagos e células citotóxicas non específicas. Comprender as reaccións de defensa inmune desenvolvidas polos peixes contra diferentes patóxenos, é necesario un amplo coñecemento da bioloxía dos linfocitos.
1. Sistema de defensa nonpecífica
1a. Factores humorales solubles
O epitelio intacto ea súa secreción, o moco, forman a barreira de defensa primaria entre os peixes eo seu contorno. O moco contén proteínas e carbohidratos e ten unha función protectora que impide a colonización da súa superficie, parasitos, bacterias e fungos, a través dunha perda e substitución continua (OUGTH, 1980). O moco, ademais da mucina, contén outros compoñentes secretores, está composto por precipitinas non específicas, aglutininas, proteína C-reactiva (CRP) e Lysozyme, que constitúen unha barreira de defensa química primaria (Fletcher 1981). Ademais, internamente, o moco existe as paredes do tracto de alimentos, que xunto con enzimas de pH e proteolíticos extremos, serven de defensa contra potenciais patóxenos (Stoskopf 1993). Moitas destas funcións de recoñecemento e regulación forman parte da resposta na fase aguda dunha infección e quizais sexa a forma máis antiga de recoñecemento do non auto e que se preservou na liña evolutiva. No peixe poden representar un sistema de recoñecemento primitivo, en vez de unha acción efectuada na destrución do patóxeno.
A continuación, son os compoñentes do soro. As proteínas de fase aguda son moléculas que aparecen por un breve período durante os picos febriles ou simplemente aumentan a súa concentración durante este período en mamíferos. Entre os máis importantes son a proteína C-reactiva (CRP) e a transferrina.
O CRP representa un grupo de moléculas de recoñecemento moi primitivo e están implicados nos mecanismos de defensa. En peixes, a súa concentración tende a ser uniforme e constante ao longo da vida. Mostrouse a aglutinar certas bacterias e tamén presenta a especificidade por pequenas moléculas orgánicas como a fosforilicina (Volanakis et al., 1990).A súa interacción demostrouse cunha serie de moléculas de sistema inmune, como o complemento e os receptores FC dos linfocitos. Ten un peso molecular de 118.000 e unha mobilidade electroforética beta. Foi detectado en citometría de fluxo de peixe na superficie do 25% dos linfocitos sanguíneos periféricos e do 4% dos linfocitos prontópodos (Evagawa et al., 1993). Diferentes estudos suxiren que aquí, en contraste co que acontece en mamíferos, estas proteínas son constituíntes normais no soro ea súa concentración pode ser aumentado tras unha infección bacteriana. Ocorren en resposta ao estrés, manipulación, exposición antigénica, etc. Algúns concluíron que podería servir como indicador dun estrés ou enfermidades únicas que se producen durante as primeiras etapas do ciclo de vida dos peixes (Fletcher et al., 1977).
A transferrina é unha glicoproteína globular, tipo B1 que falta o grupo hemo, pero que se pode unir a ferro, atopouse no soro da maioría dos vertebrados. Cando non está totalmente saturado, presenta propiedades antimicrobianas e, polo tanto, desempeña un papel importante na patoloxía de moitas infeccións bacterianas, limitando a cantidade de ferro endóxeno dispoñible para invadir patóxenos e, polo tanto, a súa capacidade reprodutiva (Buller et al., 1978). No peixe e tamén noutras especies descubriuse que ten un alto grao de polimorfismo xenético. Do mesmo xeito que nas casas, hai diferentes xenotipos, 5 foron atopados no Salmón Coho (Oncorhynchus Kisutch) e 3 na trucha (O. Mykiss) (Suzumoto et al., 1977, Winter et al., 1980). Van Muiswinkel et al. 1985 mostrou que o tipo de transferrina é herdado. Os diferentes fenotipos parecen ter un papel importante no desenvolvemento da resistencia a certas enfermidades e demostrouse que determinados grupos mostran maior predisposición a unha determinada enfermidade. A explicación sería que algúns xenotipos teñan maior afinidade por ferro que outros.
tamén se atopa como proteína de fase aguda A-antiprotease que é un análogo da macroglobulina A2 de mamíferos, que neutraliza a actividade proteolítica dunha exotoxina do avión salmónico no soro normal da troita do arco da vella e pode estabilizar os lisosomas de macrófagos (Ellis 1981b).
Lysozyme é unha enzima mucolítica con propiedades antimicrobianas e foi detectada en soro, moco e outros tecidos ricos en leucocitos, como ril, bazo e intestino, tanto en peixes de auga de mar como auga doce ( Grinde et al., 1988, Lie et al., 1989). Ten a capacidade de degradar mucopolisacáridos da parede celular das bacterias, particularmente Gram positivo, causando Lysis (Ellis 1990). Tamén se atopa en neutrófilos, monocitos e en menos cantidade en macrófagos. O pH óptimo pode variar entre as diferentes especies en resposta ás condicións ambientais (Ellis 1990, Murray & Fletcher 1976). Nalgunhas especies, as variacións no nivel de lisozima foron reportadas de acordo con cambios estacionais ou sexuais nas diferentes especies.
Outras substancias que poden participar neste sistema de defensa non específico son mencionadas a continuación segundo Ingram (1980).
A chitinasa é unha enzima que se desenvolve a n-acetil-d-glucosamina ou a chitina por hidrólise dos vínculos de 1.4 glucosaminas e ten un peso molecular de aproximadamente 30000. A súa actividade foi detectada no bazo, plasma Os tecidos linfáticos e linfoides, poden ter unha función protectora que actúa contra a chitina presente en fungos e parasitos invertebrados.
As citocinas son polipéptidos ou glicoproteínas que actúan como moduladores do sistema inmunitario e en moitas especies de peixes como nos vertebrados superiores, informouse a existencia de moitos deles como Interleouquins 1 e 2 (IL) -1, IL-2), o interferón (IFN), o factor de activación dos macrófagos (MAF) (Verlurg-Van-Kemmenade et al., 1985, Secombas et al., 1996), IL-3, IL-6 , o factor de necrose do tumor alfa (TNF a) eo receptor soluble para IL-2 no soro de animais infectados con virus ou parasitos (AHNE 1994).
O IFNS constitúen unha serie de moléculas importantes como axentes antivirales (Dorson et al., 1975, Graham & Secomes 1990A), son glicoproteínas producidas por macrófagos, linfocitos , Fibroblastos e células asasinas naturais (NK) en resposta a unha infección viral, unha estimulación inmune ou unha variedade de estimulantes químicos. Identificáronse en moitas especies de peixes. A súa produción, como en mamíferos, foi demostrada por estimulación tanto en Vivo como en VIVO con virus (de Serra et al., 1975, Dorson et al., 1992, Rogel-Gaillard et al., 1993) ou con activadores sintéticos ( Eaton et al., 1990; Tangelsen et al.1991) ou con mitogenses (Graham et al., 1990b). A maioría dos estudos suxiren que IFN é especie específica, pero non un virus específico (Gordon et al., 1981, Johnson et al., 1994). Se se atopou que se asemella a tipo I de vertebrados superiores ou beta e beta e tamén tipo II ou Gamma (secomes 1991); Nos últimos anos, os xenes doutros citoquinas de peixes foron secuenciados, incluíndo o factor de crecemento beta (TGF b), IL-1 B, o factor de factor de fibroblastos (FGF) e algunhas quimoquinas e por estudos de hibridación dos xenes de citocina como IFN e Erythropoietin (secombes et al., 1999) Atopáronse.
Estes estudos representan un avance importante, confirman os datos biolóxicos que se atopan inicialmente e permitiranos expandir as investigacións realizadas ata agora, a existencia destas citocinas indicaría unha orixe moi cedo na evolución e que tamén este O sistema de comunicación intercelular foi preservado durante millóns de anos.
As aglutininas están presentes no soro e actúan contra unha variedade de microorganismos e glóbulos heterólogos vermellos. Como moitos tipos de microorganismos comparten especificidades serolóxicas con globulos de vertebrados vermellos, poden ser “protectores”, aglutinantes ou virus e promover a súa fagocitosis (Roberson 1990).
O sistema de complemento (c) desempeña un papel importante na inmunidade humoral e tamén no teléfono móbil contra diferentes patóxenos e no proceso inflamatorio (Ingram 1990, Yano 1992). Está constituída por polo menos vinte proteínas de plasma que se sintetizan principalmente como precursores inactivos (pro-enzimas) que funcionan como enzimas ou como proteínas que se unen ao activar a introdución e / ou a presenza de certas sustancias no plasma sanguíneo normal. Moitas destas proteínas son sintetizadas no fígado e no epitelio intestinal, mentres que outros se orixinan en macrófagos (Tyzard 1992). A estimulación do sistema de complemento provoca reaccións bioquímicas, que están acompañadas pola xeración de numerosos mediadores bioloxicamente activos en inflamación. Actúan secuencialmente na lisis dunha célula branca, participando na morte e eliminación de antíxenos celulares, xeralmente bacterias e tamén na activación de moitas respostas de defensa non específica asociadas á inflamación. Pódese activar a través de dous xeitos, o anticorpo clásico ou dependente ea alternativa ou o anticorpo apropiado ou independente. A presenza do sistema de complemento no moco da pel foi descrita, actuando como a primeira barreira de defensa, activando unha das dúas formas (Lambris 1993, Sakai 1992a). O sistema C no sistema de mamíferos consta de aproximadamente 12 compoñentes, denominados a partir de factores C1 a C9 e B, D e Properdine e outros factores que regulan a súa actividade. A activación da vía clásica é iniciada pola interacción entre o compoñente C1 eo complexo antíxeno-anticorpos e o da vía alterna a través do compoñente C3 activado por diferentes sustancias como lipopoliizaridas, zymosan e outros. Este sistema existe en peixes teleosteus, dun xeito comparable que existe en mamíferos. Ata a data, a presenza de ambas estradas foi demostrada en diferentes especies, como a trucha do arco da vella (O. Mykiss), a tenda (Cyprinus Carpio), a Tilapia (Nilotica Tilapia) eo Catfish (Iltalurus Punctatus) (Nonaka et al Al 1981, Matsuyama et al., 1988a, b; lobb & Hayman 1989).
1b. Mediado por células
En canto á parte celular non específica, as células NK ou as células citotóxicas non específicas son atopadas e as células fagocíticas.
As células NK desempeñan un papel similar ao dos vertebrados superiores ou exerce unha citotoxicidade non específica de diferentes células brancas sen un recoñecemento previo. Postulouse que estas células poden ser os progenitores na liña evolutiva do NK de mamíferos (Evans et al., 1984). Os peixes teleosteas atoparon células NK no riñón cefalico ou no sangue, no sangue periférico e ao timo, e realizan humanos, rato e estas mesmas lisas de peixe; A súa presenza foi descrita en diferentes especies (Greenlee et al., 1991, Graves et al., 1985), Cytolysis require contacto celular celular, son células non-adherentes e resistentes á irradiación. Representan menos do 1% dos leucocitos de sangue periféricos. En Elasmobrands a célula efector sería un monocito / macrófago e en peixes óseos, células linfoides agrícolas (Moody et al., 1985).
En canto ás células fagocíticas, primeiro pode dicirse que a fagocitosis é un mecanismo celular de inxestión e dixestión de material estraño de partículas e é probablemente a reacción de defensa máis distribuída en vertebrados e invertebrados e un segundo Que en telEOSTS foron descritos diferentes células con capacidade fagocítica (Mac Arthur & Fletcher 1985, Finn 1970). O máis común no peixe que en mamíferos son granulocitos e fagocitos mononucleares ou agranulocitos, dos que estes son os máis importantes. Dentro destes dous grupos están á súa vez diferentes categorías: a) granulocitos, inclúen neutrófilos, eosinófilos e basófilos e b) monocitos-macrófagos (Ellis 1977, Rowley et al., 1988). a) granulocitos: a maioría destes son móbiles e fagocíticamente activos, o seu citoplasma contén gránulos lisosomales, vacúolos, mitocondrias e outros organelos. Están en proporcións diferentes no sangue, dependendo da especie, pero os máis comúns son neutrófilos e eosinófilos, mentres que os basófilos non están presentes na maioría das especies. Os neutrófilos constitúen un 4,5 a 18% dos leucocitos de sangue, cunha ampla gama entre diferentes especies. Tamén son chamados leucocitos polimorfonucleares ou específicos. O citoplasma contén numerosos gránulos, son mal plagocíticos, no sentido de que inxeriron poucos materiais estraños, pero teñen a maioría das enzimas presentes en mamíferos e, polo tanto, o seu papel primordial sería a lisis extracelular por secreción destas enzimas e outras sustancias antimicrobianas. Poden producir graves danos nos tecidos por liberación dos radicais libres de osíxeno (Tyzard 1992). Os eosinófilos conteñen gránulos citoplasmáticos que están manchados de colorantes ácidos. Na maioría dos peixes de telesetas son escasos ou ausentes en circulación. Algúns están presentes no peritoneo e os tecidos. Nas elassbranches hai diferentes graos de eosinofilia con diferenzas de tamaño e estrutura. Nalgunhas especies son abundantes no intestino, o que indicaría algunha función en inmunidade contra as bacterias. Os basófilos conteñen gránulos no citoplasma que se manchan de colorantes básicos ea súa presenza son escasos e raros no sangue periférico da maioría das especies estudadas.
b) monocitos-macrófagos: os monocitos son móbiles, fagocíticos e normalmente maiores que outros leucocitos. Teñen un citoplasma vacío e basófilo. Atopáronse en sangue e renal e a súa presenza só se demostrou nalgunhas especies. Os macrófagos son células fagocíticamente activas derivadas de monocitos que están en tecidos e cavidades peritoneal e pericárdicas, máis grandes que o anterior, e por este motivo poden facer phagocitar partículas maiores. Nas teleostadas os macrófagos son especialmente abundantes no bazo e no tecido linfomiloide renal e poden ter noutros tecidos, por exemplo a mucosa olfativa.
Neste proceso de inxestión, o antíxeno é inicialmente capturado polos macrófagos presentes nas branquias e os tecidos conxuntivos da pel e do intestino, no individuo adulto, os principais sitios fagocíticos son os órganos linfoides, o ril , o bazo eo epicardio; No riñón o material é inicialmente flagado polo cadro de células reticuloendotelial dentro do parénquima hemopético, mentres que no bazo, o antíxeno é extracelularmente atrapado nas fibras reticulares da parede elipsoide (Fergusson 1989). Os macrófagos que conteñen material de fagocito engádense en áreas linfoides moitas veces en presenza de melanomacrofagos, que son células fagocíticas que transformaron o material fagocked en melanina.
Os fagocitos están afectados por transmisores nerviosos adrenérgicos e colinérxicos, que aumentan a súa capacidade de producir as especies reactivas de osíxeno, que participan no proceso fagocítico (Lambris 1993), producindo un aumento no anión superóxido, o peróxido de hidróxeno e Radicales hidroxilo (Graves et al., 1985).
2. Sistema inmune específico
2A. A inmunidade humoral
está representada polos anticorpos (AC) ou inmunoglobulinas (IGS) que son glicoproteínas, en soro 40-50% da proteína total corresponde ao IGS. Nos ciclonstoms, os anticorpos que se atopan son macroglobulinas de 23.8s e en Lampreas, atopamos 3 tipos de anticorpos, de 14 anos, 9s e 7s (Tizard 1992), esta última molécula con cadeas lixeiras e pesadas, pero sen pontes intercambiables de disulfuro ..
O único IG presente no peixe óseo e cartilaginoso é da clase “IGM como”, en teleostos preséntase en forma de tetrámero con dúas lixeiras e dúas cadeas pesadas cun peso molecular de aproximadamente 700 e un coeficiente de sedimentación de 17 s, tamén hai formas monoméricas en soro (Castillo et al., 1993, Killie et al., 1991, Koumans-van Diepen et al., 1994, Miller et al., 1985). Os péptidos homólogos foron descritos á cadea J de peixes (Tyzard 1992), nos Elasbranches preséntase en forma Pentamérica (19s) e aproximadamente 900 KDa e tamén monógóricos (7s) e aproximadamente 160 KDA (Fange 1992).
Os xenes dos IGS están organizados esencialmente do mesmo xeito que nos vertebrados (Marchalonis 1989). As paredes dos vasos sanguíneos son permeables aos IGS do soro e, polo tanto, atópanse na maioría dos fluídos tecidos, no plasma, a linfa eo mucos epitelial (Stoskopf 1993). No peixe óseo atópase a dimeric Igm no moco e suponse que debe ser sinterizado localmente.
As células que producen anticorpos derivan dos linfocitos B, que por interacción co antíxeno transfórmanse en células plasmáticas. No proceso de presentación antigénica, colaboran macrófagos. As células plasmáticas detectáronse en diferentes grupos de peixes, incluídos os ciclastoms, aínda que nestes considéranse propiedades intermedias entre IGS de vertebrados e as lectinas invertebradas (Fange 1992). Teñen un citoplasma basófilo, normalmente non granular e atopalos no tecido conxuntivo, bazo, ril e raramente no sangue. Orixenanse a partir de células B activadas pola AG e son consideradas como os principais produtores de IGS (Fange 1992).
A natureza da AG influenciou a resposta da ACS e é de importancia fundamental na investigación inmunolóxica e tamén na produción de vacinas. É esencial que a molécula sexa recoñecida como estraña estimular o sistema inmunitario e, ademais de ser procesado hai restricións físicas e químicas. Os antíxenos máis efectivos son aqueles de alto peso molecular, con estabilidade estrutural e que son moléculas químicamente complexas e non inertes. En xeral, os complexos virales e bacterianos e os antíxenos de eritrocito parecen ser inmungens efectivos na maioría das especies de teleteost, mentres que as proteínas solubles son pouco inmunogénicas (Tizard 1992).
Nas diferentes especies de Powork hai dous factores que inflúen notoriamente a produción de anticorpos e a resposta inmune, son cambios e temperatura estacionais. No peixe, tanto a resposta humoral como a celular dependen destes factores.
En canto a temperatura, Ellis (1988A) define que o rango ideal para o seu desenvolvemento está relacionado coas condicións do medio natural para as diferentes especies. En xeral, canto maior sexa a temperatura dentro do rango fisiolóxico normal, o máis curto é a fase de inducción e canto maior sexa a magnitude da resposta inmune; A baixas temperaturas, a fase de indución é prolongada cunha redución do título de anticorpos ou fallando que hai unha ausencia completa da resposta.
avalion (1981) indicou que, sempre que a temperatura de inmunización eo posterior período permaneza por riba do nivel crítico, a produción de anticorpos durante a resposta primaria e secundaria será absolutamente normal, constante e independente do medio ambiente Temperatura. Doutra banda, a temperatura afecta o crecemento da reprodución e as baixas temperaturas prolongará o período requirido polo peixe para acadar o estado de desenvolvemento crítico no que se fai inmunológicamente competente. Respecto aos cambios estacionais, foi mostrado en Rainbow Trout (O. Mykiss), que a produción de anticorpos, así como a súa estabilidade contra os cambios na temperatura, a mobilidade electroforética e os coeficientes de sedimentación dependían das estacións, algúns autores informaron diso Na powork hai unha resposta pobre durante o período de inverno en comparación co verán, aínda que a temperatura permaneza constante (Ellis 1981a).
A idade na que se produce unha montaxe adecuada e madura da resposta humoral varía segundo as diferentes especies e tamén depende das condicións ambientais. En xeral, ocorre unha resposta completa entre 2 e 10 meses, despois da incubación. Atopáronse anticorpos circulantes en peixes de 15-21 días e 0,15-0,3 g de peso, pero este non é o máis xeral, na práctica que ocorre recentemente en especímenes de maior peso e tamaño (Ellis 1988b).
Mostrouse, como se describe para mamíferos, a resposta clásica de produción de anticorpos primarios e secundarios.A fase de inducción adoita ser máis longa e con títulos que aumentan dun xeito máis lento (Ellis 1989). Os neurotransmisores poden influír significativamente na indución in vitro das células secretoras de anticorpos nas culturas de leucocitos no bazo de trucha. Os agonistas adrenérgicos B suprimen a resposta dos anticorpos independentes de antíxenos independentes mentres que o aumento adrenérxico e colinérgico A-2 (Flory 1990).
Como en mamíferos, a tolerancia ocorre en peixes e isto pode ocorrer antes de que se volvan inmunológicamente competentes. Os estudos en O. Mykiss e C. Carpio realizados por Ellis (1988b) demostraron que as células citotóxicas e a produción de anticorpos contra antíxenos independentes independentes desenvólvense 4 semanas post-eclosión. A capacidade de establecer unha memoria inmunolóxica e producir anticorpos contra os antíxenos de T-dependentes, desenvólvese 8 semanas post-eclosion (Tatner 1986). Se inxectado cun AG dependente antes deste tempo, prodúcese a tolerancia inmunolóxica.
Os AC monoclonales permitiron definir a heteroxeneidade molecular das cadeas pesadas e lixeiras dos IGS en moitas especies como unha tenda, bagre, trucha de arcoiris (Rhombout et al., 1993, Ainsworth et al., 1990; Sánchez & Domínguez 1991) e moitos outros, e axudaron a comprender a cinética da resposta primaria e secundaria ao desafío antigénico.
2b. Inmunidade medida por células
En peixes cartilaginosos e óseos atopamos dentro do grupo de glóbulos brancos, células non granulocitas implicadas en mecanismos de inmunidade celular. Neste grupo, inclúense linfocitos, células inmunocompetentes que constitúen a base das reaccións inmunitarias. Os linfocitos do sentido morfolóxico son células relativamente pequenas cun núcleo redondo para oval, o seu tamaño varía de 4,5 a 8 μm, son células non fagocíticas e constitúen o 50-80% dos leucocitos totais. A maioría dos linfocitos prodúcense en propensos e no timo. Como mencionado anteriormente, hai dous tipos, linfocitos B e T. A poboación de linfocitos T e os seus diferentes clones son responsables da inmunidade mediada por células. Este aspecto da resposta inmune ten unha gran variedade e á súa vez recluta outros tipos de células como macrófagos, permitindo unha montaxe eficiente da resposta. Na estimulación antigénica primaria, estes clons diferéncianse en diferentes tipos de células con funcións específicas. Estes inclúen células citotóxicas ou “asasino”, capaces de mentir células estrañas por contacto físico directo entre a célula T e a célula branca; As células supresores que regulan a produción de anticorpos e linfocinas que proporcionan un peche ao proceso e as células colaboradoras ou “axudante”, que axudan ás células que producen anticorpos e tamén liberan libremente factores solubles ou linfocinos que aumentan a capacidade de defender.
Na actualidade, está dispoñible unha batería de anticorpos monoclonales que permitiu demostrar que estes dous tipos de células de linfocitos (células B e células T) están en varias especies de peixes (de Luca et al. 1983) .. Non obstante, a maioría destes anticorpos están dirixidos contra inmunoglobulinas e células B (transportistas de IGS na súa superficie) e só algúns recoñecen células T periféricas (Scapigliati et al., 1999). O desenvolvemento destes e os novos AC permitirá unha mellor caracterización fenotípica dos linfocitos e as súas distintas subpoblacións celulares, pero hai poucos datos sobre a orixe ontogénica ea diferenciación das células lymides (Castillo et al., 1993). Debido á falta de anticorpos monoclonales anti-t específicos, as respostas foron controladas indirectamente e só se presume a súa participación, por exemplo, na proliferación inducida por mitogenses como Phytohemaglutinin A (PHA), Concanvalin A (CONA) e Lipopolisacárido ( LPS) (Sizemore et al., 1984), a resposta en reaccións culturais mixtas (Miller et al., 1985), a función como células colaboradoras na produción de ACS contra a AGS dependente de células T (Miller et al., 1987, Clem Et al., 1985), o rexeitamento de tumores e allografts (Manning 1994) ea secreción de Linfooquines (secombes et al., 1996). A preparación destes ACS definiu a distribución no corpo destas células ea súa heteroxeneidade e investigación aumentou na área de inmunoloxía e patoloxía inmunolóxica.
Nos ciclonstoms teñen só dúas poboacións de leucocitos no seu sangue, un único tipo e outro linfocito, o 70% destes teñen IGS na súa superficie, orixínase no riñón anterior e non posúen células plasmáticas.
3.Os órganos linfoides
Os principais órganos linfoides en peixes teleosteus son o timo, o riñón eo bazo (Ellis 1988a, Fergusson 1989).
O timo é un par, órgano bilateral, situado debaixo do epitelio faríngo, lateral e aloxado na parte superior interna das cámaras branquiales. O principal compoñente celular é o timocito ou os linfocitos en maduración. Do mesmo xeito que noutros vertebrados, considérase un corpo linfoide primario onde se produce o grupo de linfocitos virxes que migran para unirse a linfocitos periféricos en circulación e outros órganos linfoides. Non participa na produción de anticorpos ou na captura de antíxenos. Tamén poden estar presentes células epitelioides ou macrófagos ou células de macrófagos adecuadamente e eosinófilas de células granulares (Fergusson 1989). Como en mamíferos, obsérvase a involución deste órgano en especímenes máis antigos. En salmonuros novos, o timo está totalmente diferenciado e separado do medio externo por unha capa de células epiteliales simples e, por exemplo, na trucha do arco da vella (O. Mykiss) posúen poros de 20 μm de diámetro, nos especímenes máis antigos próximos e contaron o epitelio. A súa situación superficial suxire unha certa vulnerabilidade a infeccións micóticas e bacterianas graves.
O riñón cefálico ou o principal é o principal órgano hematopoiético do peixe e do sitio de diferenciación principal de eritrocitos, granulocitos, linfocitos e monocitos. É o principal órgano productor de anticorpos (Ellis 1989). É un órgano de filtración que contén macrófagos que fagocyt os distintos antíxenos, contén compoñentes de linfomiloide, renal e endocrino complementado polo sangue das arterias e a vea caudal. Serve como un análogo da medula ósea, dos ganglios linfáticos e en parte da glándula adrenal dos vertebrados superiores (Fange 1992). O Mesonefros ou o renal cumpren correctamente as funcións do equilibrio de hidrosale.
O bazo contén menor número de células hemopónicas e linfoide en comparación co ril e está composto principalmente por sangue aloxado en cavidades. Consiste en elipsoides, paredes capilares compostas por unha raster de fibras e macrófagos reticulares. As fibras especializadas en atrapar complexos inmunes e antíxenos de partículas (Vallejo et al., 1992), mentres que os macrófagos son altamente fagocíticos (Ellis 1980). Unha característica particular do bazo de telEOSTS é a presenza de macrófagos que conteñen pigmentos de cor escura, principalmente melanina e que se chaman melanoma-cryopophops. Estes están agrupados e forman agregados chamados centros melanomacrofos (CMM). O seu número e tamaño aumenta en peixes crónicos enfermos, cando o catabolismo foi excesivo (Fergusson 1989). Serven como depósito dos produtos de metabolismo final (por exemplo, fosfolípidos) e tamén de antíxenos e material de partículas (Herraez et al., 1986), a súa función exacta é descoñecida, senón ademais do mencionado, sábese que a melanina ten A capacidade de atrapar a oxidación gratuíta dos radicais e que protexen os tecidos contra estes produtos liberados por células fagocíticas como neutrófilos. Tamén se atopan no riñón e no fígado e ocasionalmente nas gónadas e á tireóide (Fergusson 1989).
En canto á ontoxeneria do sistema inmunitario, realizáronse numerosos estudos para definilo e con base nisto, pódense deducir as seguintes consideracións. Unha descrición completa histolóxica do desenvolvemento onsogénico dos órganos linfóeses en peixes informou que en varias especies a primeira aparición de linfocitos ocorrería no timo (graza & Manning 1980; BODYAM & Manning 1981; doggett & Harris 1987), aínda que con todo, outros autores atoparon unha detección anterior no riñón (Grace et al., 1981, Ellis 1977; O’Neill 1989). De todos os xeitos, aínda que as células precursoras apareceron no riñão antes da diferenciación do linfocito no timo, os linfocitos maduros están presentes no timo e logo aparecen secuencialmente no riñón e no bazo (Zapata et al., 1990), polo que se considera que a O timo é o primeiro corpo linfoid onde se desenvolven os linfocitos.
O tempo do inicio dos linfocitos en circulación sanguínea e os órganos linfoousos foron comparados en diferentes especies (Ellis 1988A). Despois da diferenciación dun gran número de células no timo, os linfocitos aparecen no sangue e nos riles ao mesmo tempo, o riñón é entón rico en células linfoides. O tempo de diferenciación dos linfocitos varía coa especie e probablemente está relacionado coa taxa de crecemento e desenvolvemento xeral (Ellis 1988A). Está claro que os pequenos linfocitos maduros aparecen pouco antes ou despois da eclosión.Durante as primeiras semanas despois da ocorrencia, a taxa de crecemento dos órganos linfólicos é maior que a do resto do corpo, pero máis tarde comeza a diminuír coa idade. Moitos timocitos migran aos corpos periféricos durante os primeiros 2-3 meses deste período e observáronse signos de involución ao redor de 9 meses (Ellis 1988A). O desenvolvemento dos órganos linfoides correlaciona mellor co peso dos peixes que coa idade e, polo tanto, parece ser unha función da taxa de crecemento.
Como se mencionou anteriormente, en especímenes adultos, os linfocitos periféricos transportan a súa superficie determinadas AGS relacionadas coa función celular ea súa presenza pode usarse como marcador para diferenciar as células inmaduras de maduro. Co uso de anticorpos monoclonales, a aparición destes marcadores podería ser estudada nas células linfoides (1983 secomes), determinouse que, aínda que os linfocitos aparecen no inicio do desenvolvemento, a súa maduración funcional leva un longo período de tempo antes de que sexa capaz de facelo Montar unha resposta inmune (Ellis 1988A).
4. A resposta inflamatoria
A resposta inflamatoria é a característica de protección do tecido en resposta a un determinado dano e é común a todos os vertebrados, incluído o peixe (FINN & Nielsen 1971 ). A inflamación é non específica e pode ser iniciada por diferentes factores, incluíndo parasitos, bacterias ou virus e outros axentes como a radiación e as toxinas químicas. Os eventos que caracterizan a resposta inflamatoria son: 1) Vasodilatación cun aumento no fluxo sanguíneo e á permeabilidade vascular, 2) exudación plasmática e 3) migración de leucocitos aos tecidos (Ellis 1989).
Os neutrófilos son as primeiras células que migran aos tecidos e pódense ver con frecuencia nas lesións inflamatorias (Wolke 1975, Tyzard 1992). O seu papel nestas lesións non é moi relevante, pero exercer unha actividade extracelular liberando encimas e radicais libres que causan graves danos nos tecidos.
Os macrófagos mononucleares teñen un papel fagocítico importante, inxerindo material inerte e antigénico. Os linfocitos están menos asociados con lesións inflamatorias, agás que unha resposta inmune mediada por células está involucrada. Se o proceso inflamatorio non é efectivo en neutralizar a causa do dano ou se continúa os danos do tecido, pode ocorrer unha encapsulación ou explotación na zona, que está acompañada de depósitos de fibra de coláxeno, calcio e pigmentación (Fergusson 1989).
5. Os inmunostimulantes
Os inmunostimulantes son unha serie de axentes naturais e artificiais que se usan para controlar as enfermidades dos peixes e son mencionados aquí xa que actúan directamente sobre as células do sistema inmunitario que estimulan a súa acción efectorada. Inclúen axentes químicos sintéticos como o Levamisole (Kajita et al., 1990, Siwiki et al., 1990); Sustancias biolóxicas como derivados bacterianos, como o LPS (Mac Arthur et al., 1985, Neumann et al., 1995), Beta Glucan (Jorgessen et al., 1993, Thompson et al., 1995), etc., ou polisacáridos , como Chitin (Sakai et al., 1992) e oligosacáridos (Yoshida et al., 1993); Extractos de animais ou plantas (Davis & Hayasaka 1984; Jang et al., 1995); Factores nutricionais, como as vitaminas C e E (Thompson et al., 1993, Wise et al., 1993); Hormonas, como a prolactina ea hormona de crecemento (Sakai et al., 1996, Kajita et al., 1992) e citoquinas como IFN e IL-2 (Tamai et al., 1993, Tamai et al., 1992). Estes son só algúns exemplos representativos da lista dispoñibles actualmente. Actuando fundamentalmente facilitando a función das células fagocíticas, aumentando a súa actividade bactericida, estimulando a actividade das células naturais asasinas, o sistema de complemento, a lissozima ea resposta de anticorpos. A activación destas funcións inmunolóxicas está asociada a un aumento de protección contra enfermidades infecciosas. Estes axentes só son efectivos nalgunhas enfermidades e tamén a súa acción varía con períodos de tempo, dose, métodos de administración e a condición fisiolóxica do peixe (Sakai 1999).
Conclusións
En termos xerais descríbese que o peixe desenvolve unha boa resposta inmunolóxica, aínda que como Xa mencionamos, está baixo a influencia de diferentes factores, especialmente os do medio ambiente, que modifican fortemente o seu desenvolvemento. O sistema responde e controla os axentes infecciosos que fan contacto co hóspede e é por iso que o coñecemento diso é básico para o desenvolvemento de programas de control de enfermidades.Foi progresado moito nos últimos anos, aínda que aínda é necesario realizar estudos de inmunoloxía básica en diferentes especies. Por este motivo, é importante ser moi cauteloso ao comparar as observacións feitas nalgunhas especies de peixes cos que se realizan en mamíferos, e do mesmo xeito dentro dunha especie a outro peixe. Con excepción dos peixes de telesetas, a información que se atopa nos diferentes grupos aínda é escasa e, polo tanto, é insuficiente no momento da emisión de conclusións.
O estudo das enfermidades dos peixes aumentou significativamente nos últimos 40 anos, obtendo máis e máis atención, e iso foi principalmente debido ao gran desenvolvemento da acuicultura. O cultivo de peixes é unha gran industria, sendo moi variada a especie cultivada e a produción en todo o mundo aumenta cada ano. Este aumento afecta negativamente a saúde dos peixes, aumentando a susceptibilidade a diferentes infeccións. A información actualizada e os métodos rápidos e sensibles de diagnóstico son necesarios para detectar de forma eficaz as diferentes condicións. Neste sentido, os diagnósticos baseados en reaccións inmunolóxicas teñen a peculiaridade de detectar casos subclínicos nas poboacións de peixes aparentemente saudables, permitindo así a prevención da transmisión e difusión das enfermidades. Tamén a obtención de vacinas durante a última década baseouse principalmente no progreso da área de inmunoloxía, e foron efectivos ao controlar algunhas enfermidades. Finalmente, os inmunostimulantes aumentan a resistencia ás enfermidades infecciosas, activando mecanismos de defensa.
Para todos os expostos, é evidente que, a pesar dos grandes avances realizados nos últimos anos, é necesario continuar con estudos morfolóxicos e fisiolóxicos combinados das poboacións efectoras, que permiten algunhas preguntas sobre mecanismos funcionais. básico E iso axudará a entender por que se establecen os diferentes axentes infecciosos e como inducen a patoxénese.
Recoñecementos
Este traballo de revisión realizouse con fondos subvencionados B037 Pola Universidade Nacional de Comahue. Agradezo aos meus colegas no Laboratorio de Ictiopatoloxía do Centro Universitario Rexional de Bariloche polo seu apoio e por ter provisto por parte de parte do material bibliográfico que se usa aquí. Aprecio moi especialmente sobre Lic. Oscar Serra pola súa axuda na preparación deste traballo e ao seu apoio permanente e ao Dr. María Marta de E. de Bracco por animarme a escribir esta revisión.
Data de recepción: 23.02.2000
Data de aceptación: 30.04.2000
Bibliografía
AHNE, W. 1994. Evidencia para a aparición temprana de interleucinas e factor de necrose tumoral na filogénese dos vertebrados. Immunol. Hoxe 15 (3): 137.
Ainsworth, A.J., C. Dexiang & T. Greenway. 1990. Caracterización de anticorpos monoclonales para canles bagre, icalurus punctatus, leucocitos.vet. Immunol. Immunopathol. 26: 81-92.
Avtalion, R.R. 1981. Control ambiental da resposta inmune en peixes. Revisións críticas no control enviratorio. 11: 163-188.
bode, j.w. & m.j. Manning. 1981. A histógénese dos órganos linfóeses da carpa Cyprinus Carpio L. eo desenvolvemento ontrogeico da reactividade alínea J. Peixe Biol. 19, 403-14.
BULLER, J.J., J.H. Rogers & E. Griffths. 1978. Papel de ferro en infeccións bacterianas. Curr. Arriba. Microbiol. Immunol. 80: 1-35.
Castillo, A., C. Sánchez, J. DOMÍNGUEZ, S.L. Kaatari & a.j. Villena. 1993. Ontoxenia de IGM e células de rolamento de IgM en trucha arcoiris. Dev. Comp. Immunol. 17: 419-424.
Clem, l.w., R.C. Sizemore, C.F. Ellsaesser & n.w. Miller. 1985. Os monocitos como células accesorias en peixes repactan inmunes. Dev. Comp. Immunol. 9: 803-809.
DAVIS, J.F. & S.S. Hayasaka. 1984. A mellora da resistencia da anguía estadounidense, Anguila Rostrata Le Suur, a unha bacteria patóxena Aeromonas Hydrophila, por un extracto da tunica de Turbinata de ecteinascidia. J. FISH DIS. 7: 311-316.
de Luca, D., M. Wilson & g.w. Warr. 1983. A heteroxeneidade do linfocito na trucha, Gairdnerii Salm, definida con anticorpos monoclonales a IgM. EUR. J. Immunol. 13: 546-551.
de Serra, J. & g.j. Río. 1975. Purificación e caracterización da célula de peixe RTG-2 Interferon. Infect. IMM. 11: 815-822.
DOGGETT, T.A. & j.e. Harris. 1987. O ontogey do tecido linfoide asociado a Gut en Oreochromis Mossambicus. J. FISH BIOL. 31: 23-27.
Dorson, M., A. Barde & P. de Kinkelin. 1975. EGTVED Virus inducido por arcoiris SERUM INTERFERON: Algunhas propiedades fisioquímicas. Ann. Microbiol. Inst. Pasteur. 126: 485-489.
Dorson, M., P. de Kinkelin & C. Torchy. 1992. Síntese de Interferon na trucha do arco da vella Fry seguinte á infección con virus de necrose pancreal infecciosa. Molusco de peixes inmunol. 2: 311-313.
Eaton, W.D. 1990. Actividade antiviral en catro especies de salmónidos despois da exposición ao poliinosínico: ácido citidilico. Dis. Aquat. Org. 9: 193-198.
Evagawa, T., M. Murata, M. Hattori, M. Onuma & H. Kodama. 1993. Superficie celular proteína C-reactiva dos linfocitos da trucha do arco da vella. Dev. Comp. Immunol. 17: 119-127.
Ellis, A.E. 1977. Os leucocitos dos peixes: unha revisión. J. Peixe. BIOL. 11: 435-491.
Ellis, A.E. 1980. O antíxeno atrapado no bazo e renal do plexo, pleuronectes platassa. J. FISH DIS. 3: 413-26.
Ellis, A.E. 1981a. Estrés ea modulación de mecanismos de defensa en peixes. En: Pickering, A.D. (ed.). Estrés & Fish, Acad Press, Londres. 147-169.
Ellis, A.E. 1981b. Mecanismos de defensa non específicos en peixes e o seu papel nos procesos de enfermidade. Dev. BIOL. Stand. 49: 337-352.
Ellis, A.E. 1988A. Ontoxenia do sistema inmunitario en peixes teleost. En: Ellis, A.e. (Ed.). Vacinación de peixes, Acad. Prema Londres. 20-31.
Ellis, A.E. 1988b. Optimizar factores para a vacinación contra o peixe. En: Ellis, A.e. (Ed.). Vacinación de peixes, Acad. Prema Londres. 32-46.
Ellis, A.E. 1989. A inmunoloxía das teleósteas. En: Roberts, R.J. (Ed.). Patoloxía de peixes. 135-152.
Ellis, A.E. 1990. Ensaios de lisozima. En: Hurtado, J.S., T.C. Fletcher, D.P. Anderson, B.S. Roberson & w.b. Van Muiswinkel (EDS). Técnicas en peixes inmunol. SOS PUBLIC N. J. EUA. 101-103.
Evans, D.E., S.S. Graves, D. COBB & D.L. Dawe. 1984. Células citotóxicas non específicas en peixes (ictalurus punctatus) II. Parámetros de lise e especificidade de células obxecto de aprendizaxe. Dev. Comp. Immunol. 8: 303-312.
Fange, R. 1992. Células sanguíneas de peixe. En: Hoar, W.S., D.J. Randall & a.p. Farrell (EDS.). Fisioloxía de peixes Acad. PRENSA, INC EUA. XII PARTE B: 1-50.
Fergusson, H.W. 1989. Patoloxía sistémica de peixes. Un texto e atlas de respostas de tecidos comparativos en enfermidades de teleosts. Iowa State Univ Press / Ames. 64-103.
FINN, J.P. 1970. Os mecanismos de protección en enfermidades de peixe. Veterinario. Bull. Weybridge. 40: 873-886.
finn, j.p. & n.o. Nielsen. 1971. Resposta inflamatoria na trucha do arco da vella. J. Peixe Biol. 3: 463-478.
Fletcher, T.C., A. White & b.a. Baldo. 1977. Precipitina e lisozima de proteína C-reactivo no Lumpsucker Cyclopterus Lumpuys L durante a época de reprodución. Comp. Biochem. Physiol. 57: 353-357.
Fletcher, T.C. 1981. Moléculas non anticorpos e mecanismos de defensa de peixes. En: Pickering, A.D. (ed.). Estrés e peixe, Prensa Acad. 171-183.
Flory, C.M. 1990. Filoxenia da neuroimmunoregulación: efectos dos axentes adrenérxicos e colinérxicos na resposta de anticorpos in vitro da trucha do arco da vella, oncorhynchus mykiss. Dev. Comp. Immunol. 14: 283-294.
Gordon, J. & M.A. MINks. 1981. O Interferon Renaissance: Aspectos moleculares de inducción e acción. Microbiol. Rev. 45: 244-51.
Graham, S. & c.j. secombas. 1990a. ¿Os linfocitos dos peixes segregan a gamma? J. Peixe Biol. 36: 563-573.
Graham, S. & c.j. secombas. 1990b. Requisitos celulares para a secreción de limphokine por trucha arco da vella, Salmo Gairdnerii, leucocitos. Dev. Comp. Immunol. 5: 75-83.
Grace, M.F. & M.J. Manning. 1980. Histoxénese dos órganos linfoides en Rainbow Trout Salmo Gairdnerii Rich 1836. Dev. Comp. Immunol. 4: 255-264.
Grace, M.F., J.W. BODO & M.J. Manning. 1981. A ontoxenia da función de órgano linfoide en peixes. En: Solomon, J.b. (ed.). Aspectos da inmunoloxía do desenvolvemento e comparativa, Pergamon, Oxford, 1: 467-68.
Graves, S.S., D. evans & D.L. Dawe. 1985. Actividade antiprotozoína de células citotóxicas non específicas da canle bagre. J. Immunol. 13: 478-85.
Greenlee, A.r., R.A. Marrón & S.S. Ristow. 1991. As células citotóxicas non específicas da troita do arco da vella (oncorhynchus mykiss) matan os obxectivos de YAC-1 por mecanismos necróticos e apoptóticos. Dev. Comp. Immunol. 15: 153-164.
Grinde, B., O. Lie, T. POPPE & R. salte. 1988. Especies e variación individual Inn Lysozyme Actividade en peixes de interese na acuicultura. Acuicultura. 18: 299-304.
HERRAEZ, M.P. & a.g. zapata. 1986. Estrutura e función dos centros de melanomacrórafos do Goldfish Carassius Auratus.Veterinario. Immunol. Immunopathol. 12: 117-26.
Ingram, G.A. 1980. Substancias implicadas na resistencia natural do peixe á infección. J. Peixe. BIOL. 16: 23-60.
Ingram, G.A. 1990. Proba de fixación de complemento. En: Hurtado, J.S., T.C. Fletcher, D.P. Anderson, B.S. Roberson & w.b. Van Muiswinkel (EDS). Técnicas en peixes inmunol. Publicacións SOS N.J. EUA. 1: 25-44.
JANG, S.I., M.J. Marsden, Y.G. Kim, M.S. Choi & c.j. secombes. 1995. O efecto de Glycyrrhizin en Rainbow Trout, Oncorhynchus Mykiss (Walbaum), respostas de leucocitos. J. FISH DIS. 18: 307-315.
Jarvik, E. 1980. Estrutura básica e evolución dos vertebrados. Acad Press, Londres.
JENEY, Z., G. JENEY & a.g. maule. 1992. Medidas de cortisol en peixes. En: Hurtado, J.S., T.C. Fletcher, D.P. Anderson, S.L. Kaatari & a.f. rowley (EDS.). Técnicas de peixe Immunol, SOS PUBLICATIONS, N.J. EUA. 2: 157-166.
Johnson, A.M., F.W. Bayer, B.E. Szentle & M.A. JARPE. 1994. Como interferen a enfermidade de loita?. SCI. Am. 270: 68-75.
jorgesen, j.b., H. lunde & B. Robertsen. 1993. Resposta de células renales peritoneal e de cabeza a glucano de lévedos inxectados intraperitoneamente no salmón atlántico, Salmo Salar. L. J. FISH DIS. 16: 313-325.
KAJITA, Y., M. Sakai, S. ATSUTA & M. Kobayashi. 1990. Os efectos inmunomoduladores de Levamisole no arco da vella O. Mykiss. Pathol de peixe. 25: 93-98.
Kajita, Y., M. Sakai, M. Kobayashi & H. Kawauchi. 1992. A mellora da actividade citotóxica non específica dos leucocitos na trucha de arco da vella oncorhynchus mykiss inxectada con hormona de crecemento. Molusco de peixes inmunol. 2: 155-157.
killie, j.e., spelid & T. jorgessen. 1991. A resposta humoral no Salmón Atlántico (Salmo Salar L.) contra o portador de Hapten Nip-Klh; O efecto da densidade determinante (NIP) eo perfil de isotipo dos anticorpos anti-nip. Molusco de peixes inmunol. 1: 33-46.
Koumans-van Diepen, J.C.E., M.H.M. Van de Lisdonk, A.J.L. Taverne-Thiele, B.M. Verburgo-van kemenade & j.h.w.m. Rombout. 1994. Caracterización dos leucocitos de unión inmunoglobulina en carpa (Cyprinus carpio L.) dev. Comp. Immunol. 18: 45-56.
Lambris, J.D. 1993. A química, a bioloxía ea filoxenia do complemento C3 hoxe. Perfís de complemento. Karger Basel. I: 16-45.
Lie, O., O. Evensen, A. Sorensen & E. FrogSadal. 1989. Estudo sobre a actividade de lisozima nalgunhas especies de peixes. Enfermidades de organismos acuáticos. 6: 1-5.
lobb, c.j. & j.r. Hayman. 1989. Activación do complemento por diferentes isotipos de cadea pesada de inmunoglobulinas do bagre de canle (ictalurus punctatus). MOL. Immunol. 26: 457-465.
Mac Arthur, j.i. & T.C. Fletcher. 1985. Phagocitose en peixes en: Manning, M.J. (Ed.). Inmunoloxía de peixe. Acad Press NY / Londres. 29-46.
Mac Arthur, J.I., A.W. Thompson & T.C. Fletcher. 1985. Aspectos da migración de leucocitos no Pleuronecta Pleuronectes Platessa L. J. Peixe Biol. 27: 667-676.
Manning, M.J. 1994. Peixes en: Turner, R.J. (Ed.). Inmunoloxía: un enfoque comparativo. Wiley, Chichester, 69-100.
Marchalonis, j.j. & S.F. Schluter. 1989. Evolución de dominios variables e constantes e uníndose segmentos de reorganizar inmunoglobulinas. FASEB J. 3: 2469-2472.
Marchalonis, j.j. & S.F. Schluter. 1994. Desenvolvemento dun sistema inmunitario. En: Beck, G., G.S. Habicht, E.L. Cooper & j.j. Marchalonis (EDS). Anales da Nova York de Acad. de Sci. 712: 1-12.
Matsuyama, H., K. Tanaka, M. nakao & T. yano. 1988a. Caracterización da vía alternativa de complemento da carpa. Dev. Comp. Immunol. 12: 403-408.
Matsuyama, H., M. Nakao & T. yano. 1988b. Compatibilidades de anticorpo e complemento entre diferentes especies de peixes. Nippon Suisan Gakkaishi 54: 1993-1996.
Miller, N.w., R.C. Sizemore & l.w.clem. 1985. Filoxenia da heteroxeneidade do linfocito: os requisitos celulares para as respostas de anticorpos in vitro de leucocitos de canle de canle. J. Immunol. 134: 2884-2888.
Miller, N.w., j.e. van ginkel, F. ellsaesser & l.w. Clem. 1987. Filoxenia da heteroxeneidade do linfocito: identificación e separación de subpopulacións funcionalmente distintas de linfocitos de canles de canles con anticorpos monoclonales. Dev. Comp. Immunol. 11: 739-748.
Moody, C.E., D.V. Serreze & p.w. Reno. 1985. Actividade citotóxica non específica dos leucocitos teleost. Dev. Comp. Immunol. 9: 51-64.
Murray, C.K. & T.C. Fletcher. 1976.A localización inmunohemical da lisozima en pleuronecta (pleuronectes platassa L.) tecidos. J. Fish Biology 9: 329-334.
Neumann, N.F., M. FAGAN & M. Belosevic. 1995. Factores de activación de macrófagos secretados polo mitogen estimulado Synergies renales de ouro con lipopolisacárido bacteriano para inducir a produción de óxido nítrico en macrófagos teleost. Dev. Comp. Immunol. 19: 475-482.
Nonaka, M., N. Yamaguchi, S. natsuume-sakai & M. Takahashi. 1981. O sistema de complemento da trucha do arco da vella (Salmo Gairdneri) .I. Identificación do Sister Sistema Lítico Homólogo ao complemento de mamíferos. J. Immunol. 126: 1489-1494.
O’Neill, j.g. 1989. Ontoxenia dos órganos linfoides nunha teleost Antártida, Harpagifer Antártida (nothenioidei: Perciformes). Dev. Comp. Immunol. 13: 25-33.
Ourth, D.D. 1980. IGM secretora, lisozima e linfocitos no moco da pel do bagre de canle, icalurus punctatus. Dev. Comp. Immunol. 4: 65-74.
Roberson, B. aglutinación bacteriana. En: Técnicas de peixe inmunol. 1990. HOTOLEN, J.S., T.C. Fletcher, D.P. Anderson, B.S. Roberson & w.b. Van Muiswinkel (EDS). Publicacións SOS, N. Y., Estados Unidos. 81-86.
Rogel-Gaillard, C., S. ChilmonCzyk & P. de Kinkelin. 1993. Inducción in vitro da actividade interferón a partir de leucocitos de trucha de arco da vella estimulada por virus EGTV. Molusco de peixes inmunol. 3: 383-394.
rombout, j.h.w.m., N. Taverne, M. van-de-kamp & a.j. Taverne-Thiele.1993. Diferenzas en moco e inmunoglobulina sérica da carpa (Cyprinus Carpio L.). Dev. Comp. Immunol. 17: 309-317.
Rowley, A.F., T.C. Hunt, M. PAGE & G. Mainwaring. 1988. Peixe. En: glóbulos de vertebrados. Rowley, a.f. & N.A. Ratcliffe (EDS.). Cambridge Univ Press, Cambridge. 19-127.
Sakai, D.K. 1992a. Repertorio de complemento no mecanismo de defensa inmunolóxica dos peixes. Annu. Rev. Peixe. Dis. 223-247.
Sakai, M., H. Kamiya, S. Ishii, S. ATSuta & M. Kobayashi. 1992b. Os efectos inmunostimulantes da chitina en trucha arcoiris, oncorhynchus mykiss. En: Shariff, M., R.P. SUBASIGHE & J.R. Arthur (EDS.). Enfermidades na acuicultura asiática. Sección de Saúde de Peixes, Sociedade de Pesca Asiáticas, Manila, Filipinas, 1: 413-417.
Sakai, M., M. kobayashi & H. kawauchi. 1996. Activación in vitro de células fagocíticas de peixes por gh, prolactina e somatolactina. J. Endocrinol. 151: 113-118.
Sakai, M. 1999. Estado de investigación actual dos inmunostimulantes de peixes. Acuicultura 172: 63-92.
Sánchez, C. & J. DOMÍEGUEZ. 1991. As poboacións de inmunoglobulina de truchas que difiren en cadeas de luz reveladas por anticorpos monoclonales. MOL. Immunol. 28, 1271-1277.
Scapigliati, G., N. ROMANO & L. ABELLI. 1999. Antibodías monoclonales en inmunoloxía de peixe: identificación, ontoxenia e actividade de linfocitos T- e B. Aquacultura 172: 3-28.
secombes, c.j., j.j.m. Van Groningen, W.b. Van Muiswinkel & E. egberts. 1983. Ontoxenia do sistema inmunitario en Carp (Cyprinus Carpio L.). A aparición de determinantes antigénicos sobre as células linfoides detectadas por anticorpos monoclonales anti-carpa do rato. Dev. Comp. Immunol. 7: 455-464.
secombas, C.J. 1991. A filoxenia das citoquinas. En: O manual de citocina. Acad Press, Londres. Ch. 19: 387-411.
secombas, C.J. 1993. O efecto do estrés sobre as respostas inmunes do salmón atlántico (Salmo salar L.) FISIOL FISIOL. Biochem. 12: 513-520.
secombes, c.j., l.j. hardie & G. daniels. 1996. Citocinas en peixes: unha data actual. Molusco de peixes inmunol. 6: 291-304.
secombes, c.j., J. Zou, K. Laing, g.d. daniels & C. Cunningham. 1999. Xenes de citocina en peixes. Acuicultura 172: 93-102.
Siwiki, A.K., D.P. Anderson & O.w. Dixon. 1990. Inmoptimulación in vitro da troita do arco da vella (oncorhynchus mykiss) células de bazo con levamisole. Dev. Comp. Immunol. 14: 231-237.
Sizemore, R.G., N.W. Miller, M.A. Cuchens, C.J. Lobb & l.w. Clem. 1984. Filoxenia da heteroxeneidade do linfocito: os requisitos celulares para as respostas mitogénicas in vitro da canle Gandfish Leukocytes J. Immunol. 133: 2920-2924.
Stoskopf, M.K. 1993. Inmunoloxía. En: W.b. Empresa Saunders (ed.). Medicina de peixe. Harcourt Brace Jovanovich Inc., Filadelfia, Estados Unidos.153.
suzumoto, b.k., c.b. schreck & D. McIntyre. 1977. Resistencia relativa de tres xenotipos de transferencia de Coho Salmon (O. Kisutch) e as súas respostas hematolóxicas á enfermidade renal bacteriana. J. Peixe Res. Canadá pode. 34: 1-8.
Tamai, T., N. Sato, S. Kimura, S. shirata & H. Murakami. 1992.Clonación e expresión de Fisfish Interleukin 2 Gene. En: Murakami, H. et al. (EDS.). Tecnoloxía celular animal: aspectos básicos e aplicados, Kluwer, Holanda, 509-514.
Tamai, T., S. Shirata, T. Noguchi, N. Sato, S. Kimura & H. Murakami. 1993. Clonación e expresión de peixe plano (paralichthys olivaceus) Interferon CDNA. Biochem. Biophys. Acto. 1174: 182-186.
Tangelsen, L.A., g.D. TROBRIDGE & j.c. leong. 1991. Caracterización dunha actividade antiviral interferón inducible en salmónidos. En: Procedementos do Segundo Simposio Internacional sobre virus de vertebrados máis baixos. Oregon State Univ. 219-226.
Tatner, M.F. 1986. A ontoxenia da inmunidade humoral na trucha do arco da vella, Salmo Gairdnerii. Veterinario. Immunol. Immunopathol.12: 93-105.
Thompson, I., A. White, T.C. Fletcher, D.F. Houlihan & c.j. secombes. 1993. O efecto do estrés sobre as respostas inmunitarias do salmón atlántico (Salmo Salar L.) Fed Dietas que conteñen diferentes cantidades de vitamina C. Aquacultura 114: 1-18.
Thompson, K.D., A. Cachos & V. Inglis. 1995. Efectos inmunomoduladores dos glucanos e da oxiTetracycline en Rainbow Trout, Oncorhynchus Mykiss, en Soro Lisozyme e Protección. En: Shariff, M., R.P. SUBASIGHE & J.R. Arthur (EDS.). Enfermidades en Aquacultura a medida. Sección de Saúde de Peixes, Sociedade de Pesca Asiáticas, Manila, Filipinas, 11: 433-439.
Tizard, I. 1992. A filoxenia do sistema inmunitario. En: Inmunoloxía veterinaria unha introdución. W.b. Empresa Saunders (ed.). Harcourt Brace Jovanovich, Inc. USA. 457-469.
Vallejo, A.n., N.W. Miller & l.w. CEM. 1992. Procesamento e presentación de antíxenos nas respostas inmunes de Teleost. Ann. Rev. Peixe. Dis. 2: 73-89.
Van Muiswinkel, W.b., D.P. Anderson, C.h.j. Lamers, E. Egberts, J.J.A. Van Lonn & j.p. ijssel. 1985. Inmunoloxía de peixe e saúde dos peixes. Inmunoloxía de peixe. Acad Press London.
verburgo-van-kemenade, b.m.l., f.a.a.weyts, R. Datas & G. flik. 1995. Macrófagos de carpas e granulocitos neutrofílicos secretan un factor de 1 de interleucina. Dev. Com. Immunol. 19: 59-70.
Volanakis, E., X. Yuanyuan & k.j. Macon. 1990. En: moléculas de defensa. Marchalonis, J.J. & C.L. Reinisch (Eds.). Wiley-Liss. Nova York. 161-175.
inverno, g.w., c.b. cshreck & j.d. McIntyre. 1980. Resistencia de diferentes stocks e transferrina xenotipos de Coho Salmon, Oncorhynchus Kisutch e Steelhead Trout, Salmo Gairdnerii, a Enfermidade Renal Bacteriana e Vibriósis Peskery Bull. 77: 795-802.
Wise, D.J., J.R. Tomasso, T.E. Schwedler, V.S. Blazer & D.M. Gatlin III. 1993. Efecto da vitamina E sobre as respostas inmunes do canle de canle a Edwardsiella ICTALURI. J. Aquat. Anim. Saúde 5: 183-188.
wolke, r.e. 1975. Patoloxía das enfermidades bacterianas e fúngicas que afectan o peixe. En: Patoloxía dos peixes. Ribelin, w.e. & G. Migaki (EDS). A Universidade de Wisconsin Press. 33-37.
yano, T. 1992. Ensaios de actividade de complemento hemolítico. En: Técnicas de peixe inmunol. HOTOLEN, J.S., T.C. Fletcher, D.P. Anderson, S.L. Kaatari & a.f. rowley (EDS.). SOS Publicacións EUA. 2: 131-141.
Yoshida, T., M. Sakai, T. Kitao, S.M. Khlil, S. Araki, R. Saitoh, T. ineno & V. Inglis. 1993. Efectos inmunomoduladores dos produtos fermentados de ovo de polo, EF203, en trucha arcoiris, oncorhynchus mykiss. Aquacultura 109: 207-214.
Zapata, A., A. Chiba & A. varas. 1990. Células e tecidos do sistema inmunitario de peixes. En: Iwama, Q. & T. nakanishiet (EDS). O sistema inmune de peixe: organismo, patóxeno e medio ambiente. Acad Press, San Diego. 1-62.