Introdución
Silos Technology Bag Para almacenar grans secos converteuse nunha ferramenta importante para os agricultores en Arxentina e outros países do mundo (Bartosik, comunicación persoal) .. A bolsa de silos con maior capacidade de almacenamento ten dimensións que alcanzan 100m de lonxitude e 4.3 m de diámetro e teñen unha capacidade de 500 toneladas de grans, aínda que a capacidade máis común é de 200 toneladas. Os silos da bolsa son relativamente impermeables para a auga e teñen un alto nivel de hidróxido de osíxeno (O2) e dióxido de carbono (CO2). A respiración dos compoñentes a granel (grans, insectos e fungos, entre outros) consome o O2 e xera CO225. Isto crea condicións desfavorables para a supervivencia de fungos e insectos, evitando as perdas de calidade dos grans36. Non obstante, cando os grans están almacenados con niveis de humidade por riba do seguro como seguro (para millo, trigo e soia: 14%; para o xirasol: 11%) (http://www.cosechaypostcosecha.org, consultado en abril de 2015 ), hai unha alta probabilidade de que os microorganismos aeróbicos estritos, algúns anaerobios facultativos como bacterias e levadura. Incluso algunhas especies fúngicas, como o Fusarium Oxysporum, son capaces de cambiar o seu metabolismo e adaptarse ás condicións de ausencia do242.
Numerosas especies de fusario, aspergillus e penicilio e outros xéneros colonizan grans no campo e poden Continúe o seu desenvolvemento baixo condicións de almacenamento. Xa que algúns deles teñen o potencial de producir micotoxinas, ademais de alterar as propiedades físicas dos grans, estes axentes poden causar inconvenientes para a saúde humana e animal. As manifestacións de toxicidade nos animais son tan diversas como as especies de cogumelos que producen estes metabolitos, aspecto que causou unha preocupación global sobre a seguridade alimentaria e alimentaria. O consumo repetido de baixas doses de aflatoxinas, producido por Flavos Aspergillus, ten un efecto mutagénico e carcinógeno en animais, ademais de ser letal en doses altas. As fumonisinas, producidas por especies de fusarium, foron relacionadas con algunhas enfermidades específicas, como o leucoencefaloma equino e a síndrome de edema pulmonar en Porcinos7. Aínda que se sabe que as especies de Aspergillus e Penicillium presentan maior competitividade durante o almacenamento de grans secos con respecto á especie de fusarium22,33, a especie deste xénero pode crecer durante o almacenamento cando os grans están mollados.
O deterioro producido por fungos en grans almacenados depende dunha serie de factores, que poden clasificarse como Tipo de extrínseca, intrínseca e tecnolóxica. Os factores extrínsecos están asociados a condicións ambientais, como a temperatura, a humidade relativa ea tensión de O2 e CO2. Os factores intrínsecos están relacionados coa composición química e as propiedades físicas dos grans, mentres que os tipos tecnolóxicos inclúen a localización dos grans nos diferentes sectores das estruturas que conteñen, neste caso en particular, con referencia á bolsa de silos. Estes factores condicionarían o crecemento de fungos, a potencial produción de micotoxinas e a calidade final do gran almacenado. Por este motivo, enténdese a relevancia de detectar a presenza de poboacións fúngicas, así como coñecer a súa distribución e tamaño e factores ambientais que condicionan o seu desenvolvemento nos grans almacenados dentro das maletas.
a información compilada pode usarse para deseñar estratexias e aplicar prácticas correctivas durante o cultivo ou o almacenamento e evitar as perdas de calidade dos grans, principalmente pola produción de micotoxinas.
O obxectivo deste estudo caracterizouse a poboacións fúngicas, especialmente micotoxigénicas, que colonizan Os grans de millo almacenados en saco de silos con humidades maiores que as recomendadas e tamén avalían factores extrínsecos, intrínsecos e tecnolóxicos que poderían influír nestas poboacións.
Materiais e bolsa de métosis
As mostras de millo foron obtidas a partir de 5 saco de silos situado no Sueste da provincia de Bos Aires, Arxentina (37 ° 45 ‘S, 58 ° 18’ O; 130 metros sobre o nivel do mar). A bolsa de silos (polietileno de 250μm de espesor) tiña 60m de lonxitude, de 2,5 m de diámetro, 1.7m de alta e unha capacidade de almacenamento de 180 toneladas de grans cada unha. O contido de humidade dos grans rexistrados para cada un dos 5 saco silos durante a colleita era superior ao 14,5%.Os silos da bolsa identificados como 1, 2, 3, 4 e 5 valores de humidade presentados do 16,8%, o 16,9%, o 15,7%, o 15,4 e un 17,4%, respectivamente. A preparación dos Silos de Bolsa realizouse en xullo (Silos Bolsa 1 e 2) e agosto (Silos Bolsa 3, 4 e 5) de 2010, e estes foron extraídos en decembro de 2010 (Silos Bolsa 1 e 2) e xaneiro de 2011 (Silos Bolsa 3, 4 e 5). En total, analizáronse 270 mostras de beans de millo, extraídos de 3 estratos do perfil vertical do saco silos. O estrato superior abrangue unha profundidade de 0 a 0,2 m, o estrato medio de 0,2 a 0,6 m eo estrato inferior de 0,6 a 1,8 m. Ademais, desde o punto de clausura das bolsas, establecéronse diferentes áreas para a extracción das mostras, situadas en 6 sectores equidistantes ao longo do Silos Bolsa: ás 10m (zona 1), a 20m (zona 2), 30m (zona 3) ), 40m (zona 4), 50m (zona 5) e 60m (zona 6). As mostras foron recollidas cunha ensalada de grans de 1,8 m de lonxitude, en 3 tempos de almacenamento: ao peche da bolsa de silos (tempo 1), despois de 90 días (tempo 2) e antes da apertura do saco de silos ou do final do período (TIME 3). En cada estrato e zona, 3 mostras de aproximadamente 1,5 kg foron recollidas para formar unha mostra composta de 4,5 a 5 kg. Os grans recollidos foron colocados en bolsas de papel e almacenadas a 4 ° C ata a súa análise.
As análises físicas e químicas
Dentro do saco Silos rexistráronse a temperatura do perfil a granel no 3 veces de mostraxe. Para iso, utilizouse un tubo de temperatura portátil equipado con sensores de 3 puntos, que foi inserido no centro de cada saco de silo a 30 m do peche de cada un (entre as zonas 3 e 4). A localización de cada sensor coincidiu cos 3 estratos do perfil vertical da bolsa.
A concentración de O2 e CO2 da atmosfera interior das bolsas determinouse nos tres tempos de almacenamento e para as 6 zonas , aínda que só se considerou o estrato medio do perfil vertical, porque os gases difunden verticalmente. Para esta medida utilizouse un contador de gase portátil (punto de verificación, PBI, sensor Dan, Dinamarca).
O contido de humidade dos grans foi medido cun metro de humidade (Dickey-John, GAC 2100, EE. UU.) .. O pH dos grans de solución acuosa tamén foi gravado nunha proporción de 2: 1 (20 ml de auga destilada: 10 g de grans de terra), co uso dun peachímetro de peachímetro dixital e portátil (Oakton Model PH11, N ° 203852, Singapur ).
Cuantificación, illamento e identificación de Micobiota
O contador de fungos filamentosos e levadura foi realizado pola técnica de dilucións decimais en tubo e sementeira (en duplicado) en placas de prato Petri con léveda abstracta Agar Chloramphenicol Glucose (YGCA , MERCK®, USA UU) 29 Para iso, e de cada mostra, as suspensións foron feitas con 10 g de grans en 90ml de solución diluente (0,1%) de Casein Pepon (Britania®, Arxentina). As placas foron incubadas a 25 ° C (en escuridade) durante 7 días e determináronse o número total de unidades formadoras de colonias (UFC / G), así como de cada xénero ou especies identificadas. Os valores UFC / G foron transformados para log10 UFC / G para realizar análises estatísticas.
Para obter os illados de identificación, cada colonia con diferentes características morfolóxicas foi cultivada de novo en Pallos Petro Plaques con YGCA durante 7 días a 25 ° C e na escuridade. Conserváronse as cepas puras a unha temperatura de -20 ° C en glicerol de alta pureza (BIOPACK®, Arxentina) a unha concentración en 35% V / V en auga.
O illamento das especies do penicillio, Aspergillus, Eurotium , Eupenicillium, Wallemia, Clasporium, Epiccocum, Acremonium e Lixes foron identificados con teclas taxonómicas29. Os illados das especies de fusarium foron identificadas a partir de teclas específicas15,26,38,41. Para a denominación da especie, a última actualización da nomenclatura do Código Internacional de Nomenclatura (ICN) 20.30 eo índice Fungorum foi consultado (http://www.speciesfungorum.org, consultado en abril de 2015).
As identificacións das especies de fusarium e unha especie de Aspergillus foron confirmadas por análise filoxenética do factor de transcrición do Alpha (TEF1) cos cebadores EF-728M / EF239, coa metodoloxía proposta por Chaverri e Samuels8. As reaccións de secuenciación realizáronse nun equipo de Bigdyetm Terminator V 3.1 (Aplicado Biosystems, EUA), baseado no método Sanger e cumshots co analizador xenético 3130xl en Sigysa (Arxentina). Un aliñamento con Clustalw realizouse en Mega 4.1 das secuencias obtidas xunto con secuencias de referencia gardadas no Genbank.As análises de parsiminias foron realizadas en Nona co uso do ambiente wincluded con busca heurística con 10000 repeticións e estratexia de busca de TBR e calculáronse os soportes de ramas sobre a base dun bootstrap de 1000 réplicas. Para estas análises, agregáronse secuencias de especies estreitas como un grupo de control externo.
A determinación das micotoxinas
composta por grans de 5 kg estaban formados por cada estratum, incluíndo as 6 zonas de cada un dos 5 saco de silos e eles Referíronse á fundación da investigación científica Teresa Benedicto da Cruz, Luján (provincia de Bos Aires), onde foron avaliados. A presenza de aflatoxinas foi investigada (AFLA: B1, B2, G1, G2), ZEARALENONE (ZEA) e DEOXINIVIVIVIVIENOL (DON), segundo o Romer No. MY8402S, a versión 94,237 e as fumonisins (FB1, FB2, FB3) foron investigadas Co protocolo AOAC, o método oficial 995.152. Para as mencionadas cuantificacións, utilizouse a cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). O sistema HPLC usado foi da serie Agilent 1100 (Alemaña), que incluía un G1322A Degasser, unha mostra automática G1313A, un detector de fluorescencia G1321A, unha bomba cuaternaria G1311A e un controlador de temperatura G1316A.
Análise estatística
Porque Non se puideron asumir as observacións feitas dentro da mesma bolsa de silo como estadísticamente independente, o uso de modelos lineares mixtos que nos permitiron estudar os efectos dos factores de interese e ao mesmo tempo a posibilidade de que a posible estrutura de correlación entre as observacións. Os modelos lineares mixtos foron axustados para determinar o efecto fixo do estrato, a área do buque, o tempo de almacenamento e as súas interaccións sobre o pH, a humidade dos grans, o número total de fungos e levadura UFC e O número total de Fusarium spp UFC. E de A. Flavus. Estes modelos tamén incorporaron os efectos aleatorios da bolsa, o estrato, a zona e o tempo, para incorporar unha correlación positiva entre as observacións feitas no mesmo nivel de calquera destes factores. Doutra banda, os modelos axustados para analizar as concentracións de O2 e CO2 non consideraron o efecto fixo do estrato e, pola temperatura que non consideraban o efecto fixo da área da bolsa. A función LME do paquete “NLME” da lingua R34 foi usada. Cando se detectaron o efecto significativo dos factores (P
0.05), realizáronse múltiples comparacións múltiples das medidas estimadas polo modelo, utilizando a función “GLH” do paquete R19 “Multocup”. Esta función usa a distribución conxunta T de todas as diferenzas de medio estimado que se compara, sen corrixir o nivel de importancia polas múltiples comparacións, de forma similar a unha proba de diferenza mínima significativa. Análise física e química
No momento dos grans de ensacación , o contido medio de humidade tendo en conta que 5 saco de silos foi de 16,4 ± 0,7%, mentres que ao final do período analizado os valores aumentaron significativamente (p = 0,005) a 16.7 ± 1, 11% no Superior Stratum. A temperatura dos grans foi aumentada de 8,6 ° C ao comezo do almacenamento a 22,8 ° C a 5 meses de almacenamento. Nese momento, a temperatura foi significativamente diferente nos 3 estratos analizados: isto era maior no estrato superior con respecto ao estrato medio (p = 0,029) e inferior (P
0,001). As concentracións de O2 e CO2 durante o almacenamento pódense observar na táboa 1. Ao comezo do almacenamento, os niveis de O2 varían entre 19,20 e 19,66% e os niveis de CO2 entre 0,76 eo 1,30%. Despois de pasar o tempo, os niveis de O2 foron reducidos progresivamente, mentres que CO2 aumentou. Un efecto de interacción significativo foi detectado entre a área do saco Silo eo tempo de almacenamento para o nivel de O2 (P = 0.0054) e CO2 (P = 0.0226). A concentración de CO2 aumentou cara á terceira mostraxe e foi significativamente diferente (p = 0,0091) entre as zonas. A concentración O2 diminuíu significativamente cara ao final do período analizado e tamén se detectaron concentracións significativamente diferentes (p = 0,0003) entre as zonas do saco silos. O pH dos grans variado significativamente entre os estratos (p0.001) e os tempos (p = 0.0036): a máis alta acidez foi gravada no estrato superior e cara ao final do período de almacenamento (Táboa 2).
Evolución das concentracións de CO2 e O2 na atmosfera de grans de millo almacenados en saco de silos
| zonasa | concentración de CO2 (% ) | concentración de O2 (%) | ||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Time 2 | Time 3 | 1 | Time 2 | TIME 3 | ||||||||
| 1 | 0,78 ± 0,5 ab | 9,50 ± 5.1 aa | 12,57 ± 4.4 ba | 19,58 ± 0,7 a a | 10,54 ± 5.1 ab | 7,80 ± 4.1 ab | ||||||
| 2 | 1.30 ± 1.2 ab | 11,24 ± 4.4 AA | 14.68 ± 4.3 b a | 19.20 ± 0.9 A a | 7.70 ± 5.4 a b | |||||||
| 3 | 0,90 ± 0,5 ab | 10,80 ± 4.0 AA | 14.44 ± 6,5 BA | 19, 30 ± 0.8 AA | 7,38 ± 4,6 AB | 6,68 ± 4.3 ab | 0,84 ± 0.5 AB | 12,06 ± 33 AA | 17,72 ± 4,7 AB a | 19.40 ± 0,4 a a a | 6,62 ± 5,3 a b | 3,12 ± 1.5 a b |
| 5 | 0.76 ± 0.2 a C | 12.34 ± 4.1 AB | 19,00 ± 4, 5 ab a | 19,46 ± 0,4 aa | 6,16 ± 5.1 ab | 2.86 ± 2.3 ab b | ||||||
| 6 | 0.81 ± 0.5 AC | 12, 12 ± 5.5 AB | 21,44 ± 3,9 AA | 19,66 ± 0,6 AA | 7,50 ± 5,7 AB | 1,14 ± 0,4 BC | ||||||
Os valores corresponden aos medios ± da bolsa de 5 silos. Diferentes letras minúsculas dentro da mesma columna indican diferenzas significativas (P0.05) entre as diferentes áreas avaliadas. Diferentes letras maiúsculas dentro da mesma fila indican diferenzas significativas (P0.05) entre os diferentes momentos.
Evolución do pH de grans de millo almacenado en Silos Bag
| hora | é | em | ei | Medio |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 6, 12 ± 0,1 | 6,14 ± 0.0 | 6,16 ± 0.1 | 6,14 ± 0,1 a |
| 2 | 6.13 ± 0.1 | 6.15 ± 0.1 | 6, 17 ± 0.2 | 6,15 ± 0.1 a |
| 3 | 5.88 ± 0.0 | 5.90 ± 0.0 | 5.93 ± 0.1 | 5,90 ± 0,1 b |
| Media | 6.04 ± 0,1 c | 6,06 ± 0,1 b | 6.09 ± 0.1 a | – |
| reconto total (log10UFC / g) | ||||
|---|---|---|---|---|
| Tiempo | ES | en | EI | multimedia |
| 1
4,21 ± 0,3 |
4,07 ± 0,6 | 4,11 ± 0,5 a | ||
| 4,28 ± 0,7 | 4,05 ± 0,8 | |||
| 3 | 4,64 ± 1,0 | 4,46 ± 1,0 | 4,15 ± 0,9 | 4,42 ± 1,0 a |
| Multimedia | 4,36 ± 0,7 a
4,26 ± 0,7 a 0,8 ± 4,09 b – |
|||
Género | número de especies |
|
|||
|---|---|---|---|---|
| T1 | 2 dormitorios | T3b | ||
| Penicillium spp. Facer a conexión
51.40 7 10 11 |
||||
| Aspergillus spp. Fr.:Fr. | 5,71 | 2 | 0 | 0 |
| Fusarium spp. Facer a conexión
11.40 4 4 4 |
||||
| Eupenicillium spp. A. Ludw. | 2,85 | 1 | 0
1 |
|
| Cladosporium sp. Facer a conexión | 2,85 | 1 | 0 | 0 |
| Epicocum sp. Facer a conexión | 2,85 | 0
1 |
0 | |
| Wallemia sp. (PE) Arx | 2,85 | 0
1 |
0 | |
| 5,71 | 0
1 2 |
|||
| Moniliella sp. Stolk & Dakin | 2,85 | 0 | 0
1 |
|
| Acremonium spp.LINK | 2,85 | 1 | 1 | 1 |
| Hyphopichia spp. (Biidin et al.) Arx & | 2,85 | 1 | 1 | 1 |
| Candida spp. Berkhout | 2,85 | 0 | 1 | 1 |
| Debaryomyces spp. Lodder & kreger ex kreger | 2,85 | 0 | 1 | 1 |
proporción de especies de cada xénero con respecto ao número total de especies identificadas.
As especies de fusarium foron illadas no 82,3% das mostras totais analizadas durante os 5 meses de almacenamento. Sobre a base das características macroscópicas das colonias e microscópicas das estruturas reprodutivas e do estudo filoxenético co marcador TEF1, identificáronse as seguintes especies de fusarium: Fusarium verticillioides (SACC) Nirenberg, Fusarium proliferatum (Matsushima) Nirenberg, Fusarium Subglutinans (Wollenw) e reinking) Nelson, Toussoun e Marasas e F. Oxysporum Schlecht. Emendous. Snyd. e Hans.
En canto a Aspergillus spp., a partir da caracterización morfolóxica dos illados e estudo das secuencias de STI identificaron 2 especies no primeiro tempo de almacenamento, en toda a bolsa de silos. Dita especies pertencían ao subxante circumdati, sección Flavi, A. Flavus Link ea sección de Nigri, Aspergillus Níxer Tiegh.
A presenza de Eurotium spp. Foi observado no segundo e na terceira mostraxe do 10% e do 37,8% das mostras, respectivamente. A especie predominante foi Eurotium Amstelodami L. Margin.
Respecto á léveda, o 27,8% das mostras de millo recollidas ao comezo do almacenamento mostrou contaminación con este grupo microbiano, mentres que ao final do período que estaban illados 58% deles. Os condes medios foron de 3,3 ± 0,70 Log10 UFC / G e 4.62 (± 0,74) Log10 UFC / G ao comezo e ao final do almacenamento, respectivamente. A especie dominante era hiphopichia burtonii (bidin et al.) Arx & van der walt, illado o 91,9% das mostras de grans. As especies restantes clasificáronse como pertencentes ao xénero Candida.
Especies fungicas con capacidade potencial para producir micotoxinas
f. Verticillioides, F. proliferatum, A. Flavus, P. Citrinum, P. Verrucosum e E. Amstelodami foron illadas especies de mostras de grans de toda a bolsa de silos. A frecuencia de illamento e condes das especies de fusarium reduciuse ao final do período analizado e non se atopou a Aspergillus nese momento. A. Flavus estaba illado o 11,44% das mostras de tempo 1, cun reconto de 2.73 ± 0,71 Log10 UFC / g. A porcentaxe de mostras contaminadas con especies de fusario reduciuse a 5 meses a un valor do 54,4%, a pesar de que os contas non presentaron variacións significativas (P = 0.0552) entre o primeiro (2.83 ± 0, 92 Log10 UFC / G) eo terceiro tempo de mostraxe (3.18 ± 0,77 Log10 UFC / G). En contraste, a especie de penicilio e eurotio aumentou a súa frecuencia de illamento e abundancia cara ao final do almacenamento. P. Citrinum estaba illado ao 3,30% de mostras de grans do segundo semestre e cun reconto de 3,53 ± 0,60 Log10 UFC / G, mentres que P. verrucosum estaba illado das mostras de grans recollidas no segundo (0,55% das mostras e conta de 2,3) ± 0,00 Log10 UFC / G) E na terceira vez de almacenamento (3,88% das mostras e conta de 2,98 ± 1.00 Log10 UFC / G) O conde das poboacións SPP Eurotium. Aumentou entre o segundo e terceiro tempo de almacenamento, e foi de 2.08 ± 0,49 e 2,57 ± 0,49 Log10 UFC / G, respectivamente.
Micotoxinas
As mostras totais analizadas presentadas contaminación con fumonisins, mentres que o 40% revelou a presenza de Aflatoxinas. FB1 fumonisins foron detectados no 100% das mostras, fumonisinas FB2 a 86% e fumonisinas FB3 no 53%. Doutra banda, o 18,4% das mostras presentáronse só FB1; 18,4%, fb1 + fb2, e 47,3%, fb1 + fb2 + fb3 (táboa 5).
CONCENTRACION de fumonisinas (mg / kg) En Granos de maíz almacenados nos Cinco silos bolsa foi entón 90 Días
| fumonisinas | Valor Mínimo | máximo | multimedia | Mediana |
|---|---|---|---|---|
| 0,120 | 5.707 | 1.708 | 0,479 | |
| FB1 | 0,116 | 4.166 | 1.190 | 0,299 |
| FB2 | 0,067 | 1.217 | 0,446 | 0,196 |
| FB3 | 0,049 | 0,317 | 0,176 | 0,171 |
Cuando las analizaron é af latoxinas de chan é DETECTO la presencia en B1 de AFLA concentraciones mínimas de 0,0003mg / kg 0,0008mg de máximas y / kg.
Os valores de micotoxinas determinados al finais do almacenamiento ou registraron incrementos respecto de los niveles detectados de modo que o 90 Días (Cardoso, Comunicación persoal). Las micotoxinas ZEA y Intro ou detectadas Fueron POR empleadas las Técnicas.
Discusión
A temperatura, la actividad auga (aw) y la Humedad de los Granos para Factores condicionantes de la Colonización fúngica y de la producción de micotoxinas Durante El almacenamiento de los granos23. Isto embargo, hasta el Sonido ou é realizaron estudos sobre la composición de gases de la atmosfera intergranaria y de la acidez de los granos, Factores That podrían Contribuír explicar El Comportamiento de las poblaciones fúngicas en Sistemas de almacenamiento Como los silos bolsa.
O incremento da Humedad Rexistrado hacia el último del almacenamiento en el estrato Superior de los silos bolsa estudiados podria ser explicado por la existencia de ESTRATIFICACION de la Humedad de los granos ubicados en Áreas de contacto con la cubierta de plástico, causado posiblemente por ciclos repetidos de adsorción condensación de Agua y, Como consecuencia da variación diaria de la temperatura ambiente. Casini et al.5 comunicaron ESTRATIFICACION de Humedad en la capa superficial de grans de girasol almacenados plásticas en bolsas y con la la relacionaron disminución de la temperatura nocturna, que una provoco condensación de la superficie de los granos y de la cubierta de plástico.
Os cambios en la composición de O2 y de CO2 Durante El Período de la actividad almacenamiento reflejaron metabólica en el interior de los silos bolsa. Así que es la de los granos respiracion y de la microbiota asociada redujo El nivel de O2 e incremento El nivel de CO2, Generando una atmosfera anaeróbia. Estos Resultados con eles reportados coinciden en Italia para El almacenamiento de grans de trigo de maíz y En bolsa18 silos. Por otro lado, en la zona 1 (cierre da Bolsa) de los 5 silos bolsa final de Al del almacenamiento é determino la Mayor concentración de O2, lo que podría Indicar un cierre inadecuado de aquellas; En consecuencia, é favorecería la producción de microambientes para el desarrollo de la micobiota aeróbic. Respecto del pH los granos, é determino su disminución nos granos ubicados en el estrato superior hacia el Tercer almacenamiento del Tiempo. Este resultado Podría ser explicado desde del rexistro de un Mayor número de UFC / g totales nos granos dispuestos En dicho estrato, ocasionado por la actividad Mayor metabólica. El Comportamiento de variable esta en Condicións de almacenamiento hermético ou estudiado fue hasta el Sonido. Por ello, el monitoreo de la acidez de los granos Durante El almacenamiento puede Contribuír comprender y explicar la dinámica de las poblaciones fúngicas, y en especial la de las micotoxigénicas Asociadas a ellos.
O reconto totais da micobiota colonizó That los Granos de maíz ou presento Variaciones a través del Tiempo, coincidiendo Informado con lo por otros en Investigadores Argentina28. Estos Resultados determinados podrían estar por el incremento de la concentración de CO2 acidez y la de los granos, y por la reducción del nivel de O2, que la actividad afectaron metabólica. Por El contrarío, en Italia los informes indicaron una reducción en el reconto de hongos TOTALES Durante El almacenamiento de maíz en silos bolsa18.
Otro aspecto relevante deste estudio determino That los recuentos fúngicos totales Fueron afectados por el estrato (posición de los granos en el perfil del silos verticais bolsa): é encontraron los Mayores Valores en el estrato superior y los Menores en el inferior.Este descubrimento diferencial no reconto de poboación influenciado pola ubicación dos grans nunca foi informar; Isto podería ser debido aos 3 factores extrínsecos explicados anteriormente: a) O aumento da temperatura na capa superior da bolsa, en resposta ás variacións diarias de temperatura ambiente; b) A existencia de variación de humidade nos grans individuais situados no estrato superior da bolsa, causada por variacións diurnas e nocturnas de temperatura, o que causa a condensación na superficie dos grans e c) a influencia dun maior intercambio de gases Entre o medio ambiente eo interior da bolsa sobre os grans situados no Stratum35 superior. No estrato inferior, tamén se xeraron microemblies onde a temperatura e a humidade máis baixa eo intercambio gaseoso máis baixo influíron negativamente o metabolismo respiratorio, o que pode afectar a supervivencia de diferentes especies de fungos, incluíndo a mycotoxgenic.
sobre a composición de Poboacións fúngicas, observouse que a presenza de diferentes especies foi influenciada por condicións ambientais dinámicas que dominaban o interior do buque. No inicio do almacenamento, as especies de fusario e aspergillus foron illadas xunto con outras especies asociadas a grans. Non obstante, a xeración dun ambiente anaeróbico eo aumento da temperatura e acidez dos grans como tempo de almacenamento avanzaron unha miceobiota dominada por especies de penicil, eurotio e fermento. O aumento do número de mostras positivas con Eurotio cara ao final do almacenamento podería deberse ao feito de que este xénero é tolerante ao estrés, as súas esporas xerminan a unha temperatura óptima a 30 ° C e é capaz de adaptarse máis á ácida PH16. Do mesmo xeito, a frecuencia do illamento e da léveda aumentan aumentando cara ao final do período considerado. Aínda que estes resultados non coincidiron cos informados por outros investigadores en condicións similares28, o aumento podería ser explicado polo dominio dunha atmosfera anaeróbica.
A frecuencia de illamento das especies potencialmente productoras (A. Flavus e fumonisins (F. Verticillioides e F. proliferatum) reduciuse cara ao final do almacenamento. Algúns investigadores informaron que as especies de Aspergillus estarían mellor adaptadas ao crecemento dos substratos con PH43 alcalino, polo que a redución de pH de grans podería afectar a supervivencia destas especies. Por outra banda, púidose deducir que, aínda que A. Flavus considérase unha especie favorecida por condicións de almacenamento4, probablemente tería inconveniente para adaptarse ás condicións ambientais de almacenamento no saco de silos, con importantes restricións á concentración e aumento do O2 Acidez. A identificación de A. Flavus no millo en diferentes condicións de almacenamento coincidiu co Informado por outros investigadores en diferentes rexións agroecolóxicas de Arxentina10,17,32.
A frecuencia de illamento do FUSARIUM SPP. Reduciuse cara ao final do almacenamento; Con todo, a súa conta de poboación non rexistrou variacións. Estes resultados coinciden cos informados por outros investigadores en Arxentina6,14 e outros países13,31.
A diferenza do que pasou co reconto total de poboacións fúngicas, que foi afectado polo estrato do granero, sen efecto da posición Dos grans detectáronse na bolsa sobre o conde das especies de fusarium. Por primeira vez comunícase que a posición dos grans dentro da bolsa de silo non afectou o conde da poboación; Posiblemente isto débese ao feito de que as especies deste xénero están asociadas ao substrato de millo e están menos influenciados polas condicións ambientais dentro do silo de Bolsa21,33.
A capacidade das especies de fusarium e a. Flavus Para producir fumonisinas e aflatoxinas no millo foi demostrado en diferentes investigacións realizadas no noso país33. Non obstante, en Arxentina só hai lexislación para aflatoxinas totais e isto especifica os límites máximos para o cacahuete, o millo e os seus derivados e para a aflatoxina m1 en leite de fluído e en po (DIV id = “0582a0af04”> , consultado Abril de 2015). Para as micotoxinas restantes, a Arxentina considera que os límites de tolerancia indicados pola lexislación vixente na comunidade europea12.
Os niveis total de fumonisin superaron os valores máximos permitidos de 4mg / kg11 en 3 das mostras analizadas, correspondentes 3 á mesma bolsa de silo (silo saco 3).Os grans desta bolsa de silo foron Pampers no mes de agosto, de xeito que as altas concentracións determinadas poderían ser explicadas por unha maior permanencia de grans na colleita, onde as especies de fusarium teñen maiores vantaxes adaptativas para colonizar grans e producir a mycotoxin9. Este aspecto é relevante, xa que se podería inferir que un atraso na colleita faría unha acumulación de fumonisinas nos grans no campo. Os investigadores que analizaron fumonisinas totais no millo en diferentes áreas de produción de arxentina determinados niveis que eran de 2.525 mg / kg a 11.528mg / kg14 e de 0,01mg / kg a 31,108 mg / kg28, datos que manifestan unha variabilidade marcada.
Respecto ás aflatoxinas, os niveis rexistrados foron máis baixos que os límites establecidos no noso país para grans de millo (0,020mg / kg), que podería estar relacionado coa menor adaptación de A. Flavus ás condicións descricións ambientais para a área de estudo .. Esta especie é comúnmente illada no maíz cultivada nas rexións centrais e do norte de Arxentina, onde se favorece por temperaturas superiores a 30 ° C24.
entre as micotoxinas producidas por Penicillium spp. Ocratoxin a (OTA), patulina e citrinine27 destacan. Neste estudo, P. Citrinum e P. verrucosum, potenciais productores de citrinina e OTA, respectivamente, foron illados con baixa frecuencia. Posiblemente, a composición de gase da atmosfera eo aumento da acidez non favoreceu o seu desenvolvemento.
Con referencia ao aumento de E. Amstelodami, actualmente non hai informes de produción de OTA sen esta especie en maíz almacenado en saco de silos. Non obstante, informouse que esta especie produciu OTA en grans de cereais en Storage1, polo que habería estudos necesarios sobre a produción de OTA de Eurotium spp. Nos grans de millo almacenados na bolsa de silos desde esta micotoxina, así como os xa mencionados, representa un risco potencial para a saúde humana e animal.
Mentres o almacenamento de grans en Silos Bag constitúe un sistema de almacenamento sinxelo e cun O baixo custo do investimento para preservar os grans, é necesario controlar o estado dos grans antes de que estean embalados e periódicamente en almacenamento, a fin de detectar precisamente o seu posible deterioro debido ao desenvolvemento de fungos. Os datos sobre a dinámica das poboacións micotoxigenas e os factores que condicionan a súa aparencia e proliferación proporcionados por este estudo poderían contribuír ao deseño de estratexias destinadas a evitar a alteración da calidade dos grans durante o almacenamento. Pódese relacionar co uso de diferentes mesturas de gas (con alto contido de CO2), considerando a característica de permeabilidade plástica baixa do buque. Deste xeito, sería unha alternativa válida para reducir as perdas de calidade dos grans destinados ao consumo humano e animal causado pola produción de metabolitos tóxicos, cando os almacenados por períodos superiores a 5 meses.
en relación ao Lexislación que establece límites de tolerancia para diferentes micotoxinas en materias primas e alimentos elaborados, sería relevante establecer valores de tolerancia máxima para fumonisins, xa que a súa presenza foi detectada nunha alta porcentaxe de mostras de millo analizadas nos últimos anos en Arxentina, Unha situación que podería ser un problema para a comercialización e industrialización de grans, xa sexa para o consumo humano ou animal.
Responsabilidades éticas Propósito de persoas e animais
Os autores declaran que para esta investigación non se realizou experimentos en humanos ou animais.
Confidencialidade dos datos
Os autores Declaran que neste artigo non aparecen datos de pacientes.
Dereito á privacidade e ao consentimento informado
Os autores declaran que os datos do paciente non aparecen neste artigo.
Financiamento
O traballo actual foi financiado pola Universidade Nacional de Mar del Plata (Proxecto AGR375 / 12) e do Instituto Nacional de Tecnoloxía Agrícola (Proxecto AEII 274.420, área estratéxica agroindustrial), e foi presentada por Claudia C. Castellari como requisito parcial para obter o grao académico de doutor En ciencias agrícolas da Universidade Nacional de Mar do Prata, Arxentina.
Conflito de interese
Os autores declaran non ter conflito de intereses.