artigo Research
efecto da inoculação coas bacterias rizospheric e Trichoderma en trigo (Triticum aestivum L. )
Efecto da inoculación con bacterias rososféricas e trichoderma en trigo (Triticum Aestivum L.)
c. J. BÉCQUER1, G. LAZAROVITS2, Laura Nielsen2, Maribel Quintana1, Modupe Adesina2, Laura Quigley2, I. Lalin2 e C. Ibbotson2
1 estación experimental de Sancti Spíritus, Apdo. 2255, ZP 1, CP 62200 , Sancti Spíritus, Cuba. Correo electrónico: [email protected]
2 Centro de Investigación Southern Crop Crop e Food Research, Londres, Ontario, Canadá (Agricultura e Agri-Food Canada)
Resumo
realizouse un Experimenta en invernadoiro para avaliar en trigo o efecto da inoculación coas Rizobacterias Zeae e Azospirillum canadense, e co fungo de Trichoderma Harzianum. O deseño experimental foi completamente aleatorizado, con catro réplicas e cinco plantas por tratamento. Utilizouse un tratamento fertilizado con NH4NO3 (150 ppm / kg de solo), un control absoluto e 13 tratamentos inoculados. O peso seco aéreo foi avaliado, o peso seco radical, a lonxitude do tronco, a xerminación eo contido da clorofila foliar. A aplicación de Trichoderma tiña por separado un efecto positivo sobre a duración do tallo (5,58 cm); Pero a súa presenza directa nalgunhas combinacións con bacterias rosênicas non foi positiva ou mostrou resultados uniformes nas variables no momento da sementeira, ou despois del. Non obstante, o tratamento 5D de Trichodermo + NRG34-DS2 foi resaltado no peso seco radical (0,45 g / plantas) e no peso seco aéreo (0,58 g / planta); Así como o tratamento A2-N7, no contido de clorofila (40,35 espías / plantas) e a lonxitude do tallo (5,50 cm). Conclúese que a aplicación sinxela de Trichoderma non exerceu un efecto positivo sobre a maioría das variables ou tratamentos influenciados positivamente a xerminación. Recoméndase avaliar a Trichoderma + NRG34-DS2 5D e A2-N7 en experimentos de campo.
Palabras clave: Azospirillum, fungos, plantas, sinorízobio.
Resumo
Un xuízo foi borracho en invernadoiro para avaliar en trigo O efecto da inoculación coa rizobacteria Sinorhizobium Meliloti, Azosospirillum Zeae e Azospirillum Canadense, e co fungo Trichoderma Harzianum. O deseño experimental foi completamente aleatorizado, con catro repeticións e cinco plantas por tratamento. Un tratamento fertilizado con NH4NO3 (150 ppm / kg de solo), utilizáronse un control absoluto e 13 tratamentos inoculados. O peso seco aéreo, o peso seco da raíz, a lonxitude do tronco, a xerminación eo contido da folla de clorofila avaliaron. A aplicación separada de Trichoderma tivo un efecto positivo sobre a lonxitude do tronco (5,58 cm), pero a súa presenza nalgunhas combinacións con bacterias rosênicas non foi positiva e no momento do sol, ou despois non mostrou resultados uniformes nas variables. Non obstante, o tratamento Trichoderma + NRG34-DS2 5D destacouse no peso seco da raíz (0,58 g / plantas) eo peso seco aerial (0,58 g / planta); Así como o tratamento A2-N7, no contido de clorofila (40,35 espías / plantas) e lonxitude do tronco (5,50 cm). Conclúese que a simple aplicación de Trichoderma non exerceu un efecto positivo na maioría das variables, e ningún dos tratamentos influíu positivamente a xerminación. Recoméndase avaliar a Trichoderma + NRG34-DS2 5D e A2-N7 no experimento de campo.
PALABRAS CLAVE: Azospirillum, Fungi, Plantas, Sinorhizobium.
Introdución
A preocupación actual dos efectos colaterais dos agroquímicos motivou un interese crecente para coñecer máis sobre a cooperación entre as poboacións microbianas da rizosfera e da forma en que se puidesen aplicar Na agricultura (Barea et al., 2004).
Os rhizobios son xeralmente considerados como socios microbianas simbióticas de leguminosas, por medio da formación de nódulos de nitróxeno do axente de fixao (Antoun e Prevost, 2005). Non obstante, estas bacterias poden producir fitohormonas e solubilizar os fosfatos orgánicos e inorgánicos, que desempeñan un papel importante no crecemento das plantas (antount et al., 1998).
especies pertencentes ao xénero Azospirillum tamén son considerados promotores de crecemento das plantas (Zahir et al., 2004). Estas bacterias, ademais da súa actividade dinitrófica, teñen unha produción significativa de fitohormonas, que afectan a morfoloxía radical e, polo tanto, melloran os nutrientes do solo.
Así mesmo, o FILAMENTO FUNGUS FUNGUS TRICHODERMA SPP., que exerce un antagonismo efectivo con fitopatóxenos (Howell, 1998), induce mecanismos de defensa e estimula o crecemento das plantas (Harman et al., 2004).
Hai informes previos sobre os beneficios da plantación de plantas con bacterias rososféricas e trichoderma (Bécquer et al., 2004, Rudresh et al., 2005; coñece a et al., 2009; Shaban e el-Bramawy 2011). Non obstante, aínda hai moitas preguntas que hai que resolver, como, por exemplo, a forma en que se poden aplicar estas combinacións dependendo do tipo de plantas, solas e condicións ambientais e cales son as especies microbianas máis axeitadas en tales combinacións. Por este motivo, o obxectivo deste experimento era avaliar o efecto da inoculación combinada de Sinorhizobium, Azospirillum e Trichoderma en trigo, baixo condicións controladas e en diferentes momentos, para a súa futura aplicación na práctica agrícola.
Materiais e métodos
Procendancia das cepas de Azospirillum e Sinorhizobium. As cepas comerciais N7 e DS2, pertencentes a Azospirillum Zeae e Azospirillum canadense, respectivamente doado pola agricultura e agroalimentaria Canadá (Londres, Ontario, Canadá). Así como as cepas comerciais A2 e NRG34, pertencentes a Sinorhizobium Meliloti doada por Agricultura e Agri-Food Canada (Cross Research and Development Center, Québec, Canadá).
Principado da tensión de Trichoderma. A tensión comercial TH-382 (Trichoderma Harzianum) foi utilizada, doada por Agricultura e Agri-Food Canada (Southern Crop Protection e Food Research Center, Ontario, Canadá).
variedade de trigo utilizado e procedencia. A variedade de trigo foi avaliada (Triticum Aestivum L.) Pioneer 25R47, doada por un & Laboratorios de Canadá (Ontario, Canadá) e recomendado por esta institución para o tipo de solo que iso foi usado no experimento (Lazarovits, G., Com. Pers.).
Procedemento experimental
Crecemento e aplicación de cepas bacterianas. As cepas creceron en semente-manitol-Mannitol (Vincent, 1970) e resuspendida en Líquido-Mannitol, ata alcanzar un título de 107-108 UFC / ML. O inóculo bacteriano foi aplicado no momento da sementeira (1,0 ml / semente) ou posteriormente (1.0 ml / planta) a el, con dilución previa de 1:10 nunha solución salina estéril de 0,85% de NACL. A cinco días despois da sementeira, aplicouse unha segunda inoculación, coa mesma concentración celular (Lupwayi et al., 2004).
Crecemento e aplicación da tensión fúngica. O inóculo fúngico preparouse en forma de suspensión conxunta, mesturando unha cultura que tiña 10 días de PDA sementada (Agar Dextrose Pataca) con auga destilada e Tween-80 (0,01%), para a que a superficie do medio con A Agitador de vidro estéril. O título final da suspensión foi de 106-107 conidios / ml (Wolffhechell e Jensen, 1992). As suspensións conidiales foron inoculadas ás plantas segundo o tratamento utilizado, simplemente ou en combinación coas inoculacións bacterianas.
Sementeira e avaliación do experimento. Os potes de plástico que conteñen 0,90 kg de chan uninister, que foi recollido en áreas pertencentes á agricultura e agroalimentaria Canadá, estación experimental Delhi (Londres, Ontario, Canadá) (42 ° 52 N, 80 ° 32 ou). Este solo clasifícase como gris-Brunny Luisol (Brunisólico Luisol marrón gris, sistema canadense de clasificación do solo) segundo informou Chapman e Putman (1966) e caracterízase polo predominio da area (88%), coa seguinte composición química: N: 0,01%; MO: 1,0%; P2O5: 217 ppm; K2O: 101.0 PPM, NACL: 6.0 PPM, MG: 115,0 PPM; CA: 62,0 PPM; PH: 6.0. En cada pote, nove sementes foron sementadas, sen esterilizar. A avaliación realizouse a tres semanas de plantación, de acordo co recomendado por Somasegaran e Hoben (1994).
Deseño e tratamentos experimentais. Usouse un deseño completamente aleatorizado, con 15 tratamentos e catro réplicas:
- Control quimicamente fertilizado (NH 4NO3: 150 ppm n / kg de solo), de acordo coas recomendacións de fertilización de nitróxeno para este tipo de solo (Lazarovits, G., com. Pers).
- A2-N7 (aplicación no momento da sementeira).
- A2-DS2 (aplicación no momento da sementeira).
- Trichoderma (aplicación no momento da sementeira).
- A2-DS2-Trichoderma (aplicación das tres cepas bacterianas no momento da sementeira).
- A2-N7-Trichoderma (aplicación das tres cepas no momento da sementeira).
- nrg34-ds2-trichoderma (aplicación das tres cepas no momento da sementeira).
- Trichoderma (aplicación no momento da sementeira) + A2-DS2 5D. (Aplicación de ambas cepas bacterianas a cinco días despois da sementeira).
- Trichoderma (aplicación no momento da sementeira) + A2-N7 5D. (Aplicación de ambas cepas bacterianas a cinco días despois da sementeira).
- Trichoderma (aplicación no momento da sementeira) + NRG34-DS2 5D.(Aplicación de ambas cepas bacterianas a cinco días despois da sementeira).
- nrg34-DS2 (aplicación de ambas cepas bacterianas no momento da sementeira).
- A2-DS2 (aplicación de ambas cepas bacterianas no momento da sementeira) + Trichoderma 5D. (Solicitude de fungos en cinco días despois da sementeira).
- A2-N7 (aplicación de ambas cepas bacterianas no momento da sementeira) + Trichoderma 5D. (Solicitude de fungos en cinco días despois da sementeira).
- nrg34-DS2 (aplicación de ambas cepas bacterianas no momento da sementeira) + Trichoderma 5D. (Solicitude de fungos en cinco días despois da sementeira).
- control absoluto.
Se utilizáronse cinco plantas por resposta e variables: peso seco ao aire (G / planta); peso seco radical (g / chan); Lonxitude do tronco (cm / planta); Germinación (%) e contido de clorofila foliar, cun detector de clorofila Minolta-501 (Rodríguez-Mendoza et al., 1998).
Análise estatística. Aplicouse unha análise da varianza e as diferenzas entre as medias foron atopadas pola Doca de Comparación de Duncan (1955). Os datos porcentuais foi transformado por arcsen “X + 0,375 (Lerchas, 1976). Os StatGraphics programa estatístico Ademais 5.1 foi usado para Windows.
Resultados e discusión
O contido de clorofila
Respecto ao contido de clorofila (Táboa 1), o control fertilizado presentou o maior valor (43.68 SPAD / Plant, P < 0.001), en comparación co resto dos tratamentos. O tratamento foi seguido onde se combinaron as cepas A2 e N7, aplicadas ao momento da sementeira (40,35 espías / plantas), que compartían supervisores comúns con outros tratamentos; pero foi estatisticamente maior (P < 0.001) ao control absoluto (38,48 SPAD / planta), así como A2-N7 + Trichoderma 5D. (38.55 SPAD / planta), Trichoderma + A2-DS2 5D. (38,40 SPAD / planta), Trichoderma ( 38,35 SPADS / Plant), NRG34-DS2. (37,55 SPADS / Plant) e A2-DS2 + Trichoderma 5D. (35,93 SPAD / planta).
O feito de que o tratamento fecundado p Recalentar o valor máis alto desta variable é unha indicación da alta concentración de n inducida pola aplicación do fertilizante de nitróxeno, xa que o contido de clorofila é directamente proporcional a N na planta (Biswas et al., 2000). A combinación microbiana A2 (S. Meliloti) e N7 (A. Zeae), ao momento da sementeira, foi a máis efectiva. Segundo askary et al. (2009), Sinorhizobium é un xénero altamente eficiente, debido ao seu efecto estimulante do crecemento vexetal en trigo, en combinación con Azospirillum. Neste sentido, Bécquer et al. (2012a) informou que a combinación de A2 e N7 induciron o contido máis alto de clorofila, nesta especie.
A presenza de Trichoderma nas diferentes combinacións non foi positiva, que podería ser debido a este fungo, debido ao seu carácter antagónico con moitas bacterias (Harman et al., 2004), discretamente interferido no posible beneficio Para o uso dalgúns dos tratamentos combinados e exerceu un efecto deprimente máis palpable sobre tres destes (A2-DS2 + Trichoderma 5D., Trichoderma + A2-DS2 5D., e A2-N7 + Trichoderma 5D.). Isto quizais dependese do grao de resistencia antifúngica das especies bacterianas utilizadas na combinación.
Peso seco aéreo
No peso seco aéreo (Táboa 1), independentemente do control fecundado (0,82 g / plantas) mostrou valores estatísticamente superiores (P < 0,05) Ao resto dos tratamentos, atopouse o efecto positivo do A2-N7 + Trichoderma 5D. (0,58 g / piso), así como Trichoderma + NRG34-DS2 5D. (0,58 g / piso). Estes, aínda que eran estadísticamente superiores a Trichoderma + A2-DS2 5D., A2-N7, NRG34-DS2 + Trichoderma 5D., NRG34-DS2-Trichoderma, A2-N7-Trichoderma e A2-DS2-Trichoderma, non difiren Control absoluto e doutros tratamentos, como A2-DS2. Estes resultados indican que o efecto positivo destas combinacións no aumento da biomasa vexetal foi enmascarado polos microorganismos presentes no solo (non estéril) utilizado en control absoluto, no que a comunidade bacteriana nativa da rizosphere debía desempeñar un papel importante. Segundo Chelius e Triplett (2000), estas rizobacterias, así como as introducidas, están asociadas coas raíces da planta, debido á influencia dos compostos orgánicos de exudes radicais. Do mesmo xeito, o feito de que os mellores tratamentos da inoculación combinados cos de control absoluto corresponden estadísticamente, de forma determinada, a hipótese de que as combinacións de bacterias con Trichoderma poden verse afectadas pola acción antagónica do fungo.
Lonxitude do tronco
En canto á lonxitude do tronco (Táboa 2), Trichoderma (5.58 cm), A2-N7 (5,50 cm) e NRG34-DS2 (5,50 cm) foron Estatísticamente máis alto (P < 0,001) a un control absoluto e trichoderma + A2-DS2 5D. (5.05 cm), NRG34-DS2 + Trichoderma 5D. (5.03 cm), NRG34-DS2-Trichoderma (4.95 cm), Trichoderma + A2-N7 5D. (4,80 cm), A2-N7-Trichoderma (4.73 cm) e A2-DS2-Trichoderma (4,68 cm); E non difiren do resto dos tratamentos e do control fertilizado (5,18 cm).
Aínda que o tratamento inoculado só con Trichoderma presentou valores estadísticamente superiores á maioría dos tratamentos, os outros dous que o seguían foron compostos só por bacterias. Isto podería constituír unha proba palpable da influencia antagónica do fungo, que se manifestou en certas variables agronómicas; Aínda que a súa aplicación, por separado, exerceu un efecto positivo sobre a duración do tronco. Neste sentido, Avis et al. (2008) e Shoresh et al. (2010) informaron sobre as propiedades biofertilizing de Trichoderma, con base do aumento da absorción de minerais ea súa solubilização, así como na produción de substancias estimulantes do crecemento de plantas. Doutra banda, o antagonismo do fungo con algunha tensión específicas pode deberse ao feito de que realiza a súa acción de biocontrol a través da antibiose, o micoparasitismo e a competencia por nutrientes como criado polo reino et al. (2008). Estes autores sinalan que a maioría das cepas de Trichoderma producen metabolitos tóxicos volátiles e non volátiles que impiden a colonización doutros microorganismos antagónicos. Estes metabolitos foron detectados coñecendo et al. (2009), en T. Harzianum. Non se descarta que algúns destes compostos influíron negativamente certas funcións de bacterias que estimulan indicadores específicos do crecemento das plantas, como as variables descritas anteriormente. Aínda que Bécquer et al. (2001) descubriu que A. brasileiro contrarrestou T. Harzianum nun estudo in vitro, Bécquerer et al. (2013) determinou que esta mesma especie de fungo realizou unha actividade antagónica con A. Canadense e A. Zeae.
Peso seco radical
Respecto ao peso seco radical (Táboa 2), Trichoderma + A2-DS2 5D. Foi estatisticamente superior (P < 0,001) A: A2-N7-Trichoderma, A2-DS2-Trichoderma, NRG34-DS2, A2-N7, control absoluto, control fertilizado, NRG34- DS2 + Trichoderma 5D. e Trichoderma. Seguiu a Trichoderma + NRG34-DS2 5D., Que tamén foi estatisticamente superior ao resto dos tratamentos, con excepción de A2-N7-Trichoderma.
Na devandita variable, dous tratamentos combinados que non foron destacados nas variables anteriores influíron positivamente. O antagonismo obvio entre os microorganismos utilizados neste experimento non foi evidenciado polo peso seco radical, debido a que Trichoderma, usando os seus mecanismos de degradación celulolítica nas raíces do anfitrión (Infante et al., 2009), permitiu a entrada de As bacterias que foron inoculadas dentro de cinco días despois da aplicación do fungo e logrou afectar directamente o desenvolvemento radical (Sarig et al., 1992).
É importante que a aplicación sinxela de Trichoderma non exercise ningún efecto positivo sobre as raíces; Aínda que grava et al. (2006) e Chacón et al. (2007) observou un aumento do peso radical en seco en tomate e tabaco, respectivamente, como os inoculan con Trichoderma. Por outra banda, Benítez et al. (2004) considerou que a colonización das raíces do fungo, independentemente do seu xénero e especie, implica a produción de metabolitos tóxicos (fitoalexinas, flavonoides e terbenoides, derivados fenólicos e outros compostos antimicrobianos) pola planta, como resposta ao invasión fúngica. A capacidade de sobrevivir á acción dos devanditos compostos debe variar segundo a tensión usada (Harman et al., 2004).
Xerminación
Os valores de xerminación (táboa 3) mostraron pouca ou ningunha influencia positiva das cepas inoculadas. Tanto o control fertilizado eo control absoluto foron estadísticamente superiores a A2-N7, Trichoderma, A2-DS2-Trichoderma, A2-N7-Trichoderma, NRG34-DS2 + Trichoderma 5D; E non difiren do resto dos tratamentos.
Estes resultados non coinciden cos atopados por Benítez et al. (1998), aqueles que afirman que Trichoderma produce sustancias estimulantes de crecemento que inflúen no aumento da taxa de xerminación nas sementes. Ademais, Arora et al. (2001) informou que S. Meliloti Sideróforo produce cepas aumentou a xerminación en cacahuete, en presenza de macrofomina faseolina. Con todo, Canto-Martin et al.(2004) non observou as diferenzas na xerminación de sementes de AJI inoculada con Azospirillum; Como Torres et al. (2003), en sementes de faseolus vulgaris, inoculado co brasileiro A., Azotobacter Chroococcum e Rhizobium leguosarum, simplemente ou combinado. Bécquer et al. (2012b) tampouco atopou diferenzas na xerminación, o trigo, ao aplicar inóculos formados por Azospirillum e Sinorhizobium. Ao parecer, a capacidade estimulante ou depressante dos microorganismos na xerminación depende non só do xénero e das especies destes, senón tamén do tipo de planta á que pertencen as sementes.
Consideracións xerais sobre as variables analizadas
Aínda que varios tratamentos mostraron valores altos, polo menos unha das cinco variables, Trichoderma + NRG34-DS2 5D. e A2-N7 destacouse cunha superioridade obvia no contido de clorofila e na lonxitude do tallo (A2-N7); así como no peso seco do aire e no peso seco radical (Trichoderma + NRG34-DS2 5D). Esta última variable é fundamental, xa que o desenvolvemento da planta depende das raíces. Segundo Sarig et al. (1992), os cambios na morfoloxía e fisioloxía do sistema radical son un dos efectos máis coñecidos das bacterias no crecemento das plantas. O aumento do número de raíces laterales e os pelos radicais causa o aumento da superficie radical dispoñible para as actualizacións de auga e nutrientes (BAI et al., 2003). A partir de aquí infórmase a importancia da implementación precoz de Trichoderma, seguida dunha combinación de bacterias rosênicas que colonizan o interior das raíces, grazas á acción celulolítica do fungo (infante et al., 2009). Sobre a base destas consideracións, o tratamento 5D de Trichoderma + NRG34-DS2. pode proporcionar os mellores resultados na práctica agrícola; Aínda que a combinación de cepas bacterianas A2 e N7 nos experimentos de campo que derivan desta investigación tamén podería ser exitosa.
É sinalar que o tratamento fertilizado presentou diferenzas significativas con respecto ao control absoluto en contido de clorofila e peso seco aerial, non no resto das variables (peso seco radical, lonxitude e xerminación). Neste sentido, Díaz et al. (2008) obtivo resultados similares na lonxitude do tronco, en experimentos de campo con Sorghum e tamén Bécquer et al. (2012a), en xerminación. Estes últimos autores informaron que dúas variedades de trigo presentaron valores estatísticamente menores no peso seco radical, no caso de tratamento fertilizado con respecto ao control absoluto.
Na variable de peso seco radical, o tratamento fertilizado e o control absoluto foron menores de forma estatística que algúns dos tratamentos inoculados indistintamente con sinorízobio, Azospirillum e Trichoderma, que tamén demostran o efecto positivo destes microorganismos no desenvolvemento da planta.
Conclusións
Aínda que a combinación de bacterias rosênicas con trichoderma ao momento de sementar, ou máis tarde, non mostrou resultados uniformes nas variables estudadas, trichoderma + nrg34 tratamento -DS2 5D. Destacábase sobre o peso seco radical eo peso seco do aire. O tratamento A2-N7 tamén se destacou, no contido de clorofila e na lonxitude do tronco. A simple aplicación de Trichoderma non mostrou un efecto positivo na maioría das variables, e ningún dos tratamentos influenciado positivamente á xerminación.
Recoméndase avaliar tratamentos 5D de Trichoderma + NRG34-DS2. e A2-N7 en Experimentos de campo con trigo.
Referencias bibliográficas
1. Antoun, H.; Beauchamp, C. J.; GOUSSARD, N.; Chabot, R. & Lalande, R. Potencial de Rhizobium e Bradyrhizobium Especies como crecemento vexetal que promove Rhizobacterias en non láminas: efecto sobre os rabanetes (Rhaphanus Sativus L.). Terreo de plantas. 204: 57-61, 1998.
2. Antoun, H. Prevost, D. Ecoloxía do crecemento das plantas promocionando Rhizobacterias. En: Z. A. Siddiqui, ed. PGPR: biocontrol e biosetilización. Dordrecht, Holanda: Springer. p. 1-38, 2005.
3. Arora, N. K.; Kang, S. C. & Maheswari, D. K. Isollation of Siderófore-produción de cepas de rizobio meliloti eo seu potencial de biocontrol contra a phaseolina de macrofómeno que causa a podremia do carbón de cacahuete. Curr. SCI. INDIA. 81: 673-677, 2001.
4. Askary, Mehray; MISAGE, AKBAR; Amoaaghaei, rehaeh & mostajeran, maryam. Influencia da co-inoculação Azospirillum Brasilense E Rhizobium meliloti + 2,4-D no rendemento de grans e N, P, K contido Triticum aestivum (cv. Baccros e Mahdavi). American-Eurasia J. Agric. & Environ. Sci. 5: 296-307, 2009.
5. Avis, T. J.; Grava, Valerie; Antoun, Hani Tweddell, R. J.Efectos beneficiosos multifacetados das microorganismos de rizósfera na saúde e á produtividade das plantas. SOIL BIOL. Biochem. 40: 1733-1740, 2008.
6. Barea, J. M.; Azcón, R. Azcón-Aguilar, C. MyCorrhizal Fungi e crecemento das plantas promocionando Rhizobacterias. En: A. Varma, L. Abbott, D. Werner e R. Hampp, EDS. Microbioloxía da superficie das plantas. Heidelberg, Alemaña: Springer-Verlag, p. 351-371, 2004.
7. Bai, y.; Zhou, X. & Smith, D. L. Crop Ecoloxía, xestión e calidade. Crecemento da planta de soia mellorada resultante da coinocación das cepas de bacilo con Bradyrhizobium japonicum. Crop Sci. 43: 1774-1781, 2003.
8. Bécquer, C. J.; Antoun, Hani Prévost, Danielle. Estudio de la Interacción de Trichoderma Harzianum con bacterias Dinitrofijadoras de Vida Libre. Pastos y forrajes. 24 (1): 35-39, 2001.
9. Bécquer, C. J.; Lazarovits, G. & Lalin, i .. interacción in vitro entre trichoderma harzianum y bacterias Rizosféricas Estimuladoras del crecimiento Vegetal. Rev. Cub. Cienc. Agríc. 47: 97-102, 2013.
10. Bécquer, C. J.; Lazarovits, G.; Nielsen, Laura; Quintana, Maribel, Adesina, Modupe; Quigley, Laura et al. C. Efecto da inoculación con bacterias rosênicas en dúas variedades de trigo. Fase II: invernadoiro. Mexicano J. Agric. SCI. 3: 985-997, 2012a.
11. Bécquer, C. J.; Prévost, Danielle; Juge, Christine; Gauvin, Carole & Delaney, Sandra. Efecto da inoculación con bacterias Rizosféricas en Dos Variedades de Trigo. Fase I: CONDICIONES CONTROLADAS. Rev. Mex. Cienc. Agríc. 3: 973-984, 2012b.
12. Bécquer, C. J.; Ramos, Yamilka; Nápoles, J. A. & Arioza, María D. Efecto da interacción Trichoderma-Rizobio en Vigna Luteola SC-123. Pastos y forrajes. 27 (2): 139-145, 2004.
13. Benítez, Tahía; Rincón, Ana M.; Limón, M. Carmen & Codón, A. C. Mecanismos de biocontrol de cepas de Trichoderma. Int. Microbiol. 7: 249-260, 2004.
14. Benítez, Tahía; Delgado-Jarana, J.; Rincón, A. M.; Rey, M. Limón, M. Carmen. Biofungicidas: Trichoderma como axente de biocontrol contra fungos fitopatóxenos. En: S. G. Pandalai, ed. Desenvolvementos de investigación recentes na microbioloxía. Trivandrum, India. vol. 2. p. 129-150, 1998.
15. Biswas, J. C.; LADHA, J. K. & DAZZO, F. B. A inoculación de Rhizobia mellora a absorción de nutrientes e o crecemento do arroz baixa. SOIL SCI. Soc. Am. J. 64: 1644-1650, 2000.
16. Canto, J. C; Medina, S. MORALES, A. D. EFACO DE A INOCULACIÓN CON AZOSPIRILLUM SP. En Plantas de Chile Habanero (Capsicum Chínense Jacquin). Sistemas tropicais e subtropicais. 4: 21-27, 2004.
17. Chacón, M. R.; Rodríguez, O.; Benítez, t.; Sousa, s.; Rey, m.; Llobell, A. et al. Análise microscópica e transcriptome da colonización precoz das raíces de tomate de Trichoderma Harzianum. Int. Microbiol. 10: 19-27, 2007.
18. Chapman, L. J. & Putman, D. F. Fisiography of Southern Ontario. Toronto: Universidade de Toronto Press, 1966.
19. Chelius, M. K. & TRIPLETT, E. W. Fixación de nitróxeno procariota; Sistema modelo para a análise dun proceso biolóxico. Inglaterra: Horizont Scientific Press, 2000.
20. Díaz, A.; Garza, Idalia; Pecina, V. Montes, N. Respuesta del Sorgo A Micorriza Arbuscular e Azospirillum en Estrés Hídrico. Rev. fitotec. MEX. 31: 35-42, 2008.
21. Duncan, D. B. Rango múltiple e varias probas F. Biometría. 11: 1-42, 1955.
22. Grava, v.; Martínez, C.; Antoun, H. TWEDDELL, R. J. Control de inversión de tomate de invernadoiro (pythium ultimum) en sistemas hidropónicos, utilizando microorganismos de crecemento vexetal. Pode. J. Pathol Plant. 28: 475-483, 2006.
23. Harman, G. E.; Howell, C. R.; Viterbo, A.; CHET, I. Lorito, M. Trichoderma Symbions oportunistas e avirulentas. Nat. Rev. microbiol. 2: 43-56, 2004.
24. Howell, C. R. O papel de antibiose en biocontrol. En: G. E. HARMAN e C. P. KUBICEK, EDS. Trichoderma e gliocladium. London: Taylor & Francis. vol. 2. Enzimas, control biolóxico e aplicacións comerciais. p. 173-184, 1998.
25. Infante, Danay; Martínez, B.; González, noyma & Reyes, yusimy. Mecanismos de Acción de Trichoderma Frente a Hongos Fitopatógenos. Rev. Protección Veg. 24 (1), 2009. http://scielo.sld.cu/scielo.php?pid=S1010-27522009000100002&script=sci_arttext.
26. Lerch, G. La Experimentación en Las Ciencias Biológicas e Agrícolas. La Habana: Editorial Ciencia e Técnica, 1976.
27. LUPWAYI, N. Z.; Clayton, G. W.; Hanson, K. G.; Arroz, W. A & Biederbeck, V. O. O. Rhizobia endófica en cebada, trigo e canola Roots. Pode. J. PLANT SCI. 84: 37-45, 2004.
28. Reino, J. L.; Guerrero, R. F.; Hernández-Galán, R. & Collado, I. G. Metabolitos secundarios de especies do axente de biocontrol Trichoderma. Phytochem. Rev. 7: 89-123, 2008.
29. Rodríguez-Mendoza, María de Las n.; Alcántar, G.; Agulilar, A., Etchrevers, D. J. & Santizo, J. A. Estimación da concentración de nitrógeno e clorofila en Tomate Mediante Un Medidor Portátil de Clorofila. Terra Latinoamericana. 16: 135-141, 1998.
30. Rudresh, D. L.; Shivaprakash, M. K. & Prasad, R. D. Efecto da aplicación combinada de Rhizobium, fosfato Solubilizing Bacterium e Trichoderma spp. En crecemento, a absorción de nutrientes e rendemento do garavanzos (Cicer aritenium L.). Solo aplicado Ecol. 28: 139-146, 2005.
31. Sabre, W. I. A.; Abd El-Hai, K. M. & GHoneEm, K. M. Efecto sinérxico de Trichoderma e Rhizobium en ambos biocontrol de enfermidades de chocolate e indución de nodulación, actividades fisiolóxicas e produtividade de Vicia FABA. Res. J. Microbiol. 4: 286-300, 2009.
32. Sarig, s.; Okon, Y. Blum, A. Efecto da inoculación de Azospirillum Brasilense sobre dinámica de crecemento e condutividade hidráulica de raíces bicolores sorghum. J. planta nutr. 15: 805-819, 1992.
33. Shaban, W. I. & EL-Bramawy, M. A. Impacto da inoculación dobre con Rhizobium e Trichoderma na amortiguación, as enfermidades de rotación de raíz e os parámetros de crecemento das plantas dalgún campo de campo de leguminosas baixo condicións de efecto invernadoiro. Int. Res. J. Agric. SCI. SOIL SCI. 1: 98-108, 2011.
34. Shoresh, m.; HARMAN, G. E. & MASTOURI, FATEMEH. Resistencia sistémica inducida e respostas de plantas a axentes de biocontrol fúngicos. Annu. Rev. Phytopathol. 48: 21-43, 2010.
35. Somasegaran, P. & HOBEN, H. J. Manual para Rhizobia. Nova York: Springer-Verlag, 1994.
36. Torres, R.; Pérez, C. Suárez, Norma. Influencia da inoculación de rizobacterias sobre a germinación de Semillas de Frijol Común (Phaseolus vulgaris L.). Centro Agrícola. 30: 56-60, 2003.
37. Vincent, J. M. Un manual para o estudo práctico de bacterias de nodulos raíz. Oxford: Blackwell Publications, 1970.
38. Wolffhechel. H. & JENSEN, D. F. Uso de Trichoderma Harzianum e Vittens Glioocladium para o control biolóxico do amortiguamento post-emerxencia e a podremia dos pepinos causados por Pythium ultimum. J. Phytopathol. 136: 221-230, 1992.
39. Zahir, Z. A.; Arshad, M. & Frankenberger, promotora de crecemento W. T. plantas rizobactérias: aplicacións e perspectivas na agricultura. ADV. Agron. 81: 97-168, 2004.