Introdución
Os alteracións no metabolismo do calcio-fósforo son un problema prevalente e de gran importancia para os pacientes con CKD (enfermidade renal crónica) .1-8 apropiado e cedo A avaliación, así como o tratamento é vital para o control óptimo dos nosos pacientes.
O método de diagnóstico ideal para a nota e tipo de osteodistrofia renal aínda é a biopsia da cresta ilíaca seguindo a etiqueta dobre de tetraciclina, 9-25 pero, debido Para a súa natureza invasiva e dos traballos, é de difícil aplicación na práctica clínica diaria. 26 Actualmente, o diagnóstico e o tratamento destas alteracións baséanse na determinación dos niveis plasmáticos da hormona paratiroide intacta (IPTH) .10,17,27-31 Non obstante, a determinación desta hormona non é sinxela e está suxeita a gran variabilidade.32-34 Ademais disto, os métodos utilizados para procesar as mostras do IPT non están estandarizadas, un feito que pode ser unha importante fonte de variabilidade previa á proba.
Obxectivo do estudo
a Ana A variabilidade da LYSE en representación de determinación do IPTH que compara diferentes métodos de procesamento da mesma mostra de plasma tratada con ácido etilenediampetraacético (EDTA) en pacientes con CKD a diferentes etapas de desenvolvemento.
Método e método
No noso estudo analizamos 294 mostras de sangue de 49 pacientes con enfermidade renal crónica (CKD) en diferentes etapas de desenvolvemento, 18 foron de pacientes transplantados na unidade de trasplante renal (36,7%) e 31 da unidade crónica da hemodiálise no noso hospital ( 63,3%).
Todas as mostras de sangue foron recollidas pola mañá (entre as 8 e as 9 da mañá) despois dunha hora de oito horas rápido e prediaslysis para os pacientes que sufriron un tratamento renal substitutivo. O sangue foi deseñado no servizo de hemodiálise do noso hospital. Tres tubos de EDTA foron extraídos de cada paciente: dous tubos de 5 ml e un tubo de 10 ml. Inmediatamente despois da extracción, foron enviados ao frigorífico no Departamento de Medicina Nuclear, onde cada un foi procesado de forma diferente, como se describirá con aquí.
Grupo de referencia ou grupo 1 (EDTA 5ML Tube):
– Mostra de sangue recollida (e enviado rapidamente refrigerado ao departamento de Medicina Nuclear).
– Centrifugación frigorífica.
– plasma inmediatamente conxelado.
Grupo 2 (Tubo de 10 ml de EDTA):
– Mostra de sangue recollida.
– mantido unha hora a temperatura ambiente.
– Centrifugación normal.
– separado en 3 tubos:
– Un dos tubos está inmediatamente conxelado. Grupo 2A
– Un tubo é refrigerado durante oito horas e logo conxelado. Grupo 2B
– Outro tubo é refrigerado para > 24 horas e conxelado. GRUPO 2C
GRUPO 3 (Tubo de 5ml EDTA):
– Mostra de sangue recollida.
– mantido > 3 horas a temperatura ambiente.
– Centrifugación normal.
– separado en dous tubos:
– Inmediatamente conxelado. Grupo 3A
– un tubo é refrigerado para > 8 horas e conxelado. Grupo 3b
Os métodos de procesamento utilizados para as mostras de sangue no noso estudo foron as que normalmente aplicaron neste dominio. O IPTH foi medido usando o ensaio inmunorridiométrico (IRMA Total Intact Scantibodies Ensay, 2 ª xeración). A variabilidade interronte obtida foi inferior ao 2,5%. O Grupo 1 foi considerado o estándar de ouro, xa que estas son as condicións xeralmente recomendadas para este tipo de mostras, independentemente do método ou conservador utilizado (EDTA ou Citrato).
Un dos dous por dúas comparacións realizáronse entre o IPTH valores medios no grupo de referencia e os outros. Polo tanto, a normalidade de distribución foi verificada primeiro aplicando probas de varianza de homoxeneidade e normalidade. Posteriormente, realizamos unha comparación por parellas coa proba T incluíndo a corrección de Bonferroni. O nivel de importancia foi establecido en P
Resultados
A Idade Media da poboación estudada foi de 60.88 ± 17.65 eo rango de idade entre 26 e 90 anos. Dos 49 pacientes incluídos no estudo, 25 eran mulleres e 24 homes, que corresponde a 51 e 49%, respectivamente. A principal causa da enfermidade renal crónica non está afiliada, seguida de orixe vascular e glomerular. As características descritivas restantes da nosa poboación de estudo amósanse na táboa 1.
O valor medio no grupo de referencia foi de 202,25 ± 199,72pg / ml. Os valores medios de Ipth intacto nos outros grupos analizados, mostrados na Táboa 2, foron de 196 ± 203.23pg / ml, 202.8 ± 200.2pg / ml, 200.06 ± 194.87pg / ml, 204.08 ± 204.073pg / ml e 197.94 ± 182.31pg / ml. Como se pode ver na Figura 1, os resultados foron prácticamente idénticos para cada grupo, sen importantes diferenzas con respecto ao grupo de referencia (p = 0,87, p = 0,99, p = 0,95, p = 0,96, p = 0,90), cando Comparando cos grupos 2A, 2B, 2C, 3A e 3B, respectivamente).
Discusión
A determinación do serum paratório é difícil de cuantificar xa que é bastante inestable tanto no soro como no sangue43-45 (AV. 5 minutos). O método de referencia está baseado na fiación frigorífica e conxelación da mostra inmediatamente despois da extracción. Non obstante, este procedemento é moi difícil na práctica clínica diaria, xa que a actividade de nefroloxía non só se limita ao dominio hospitalario. En xeral, as mostras están deseñadas nas clínicas e despois envíanse aos hospitais de referencia para a análise. En ocasións, estas clínicas están a pouca distancia dos hospitais. A maioría das mostras non están xiradas ou separadas no lugar de extracción porque non teñen os medios necesarios para facelo. Ademais disto, as mostras están xiradas a temperatura ambiente. Podemos derivar desta a importancia de coñecer e reducir a variabilidade a un máximo no manexo de mostras.
Actualmente non hai un método estandarizado de procesalos. Hai algunha controversia sobre a estabilidade da paratória en soro ou plasma tratada con EDTA. Varios estudos afirman que a determinación do ipth en soro é menos estable que a obtida a partir de mostras de plasma e sangue conservado en tubos tratados con EDTA.35-42 Non obstante, Omar et al.38 en 2001 observou que os niveis de Ipth en EDTA diminuíron 14,8 % Despois de permanecer a temperatura ambiente durante 48 horas. Ademais disto, recentemente, Cavalier et al.42 demostrou que as mostras procesadas con EDTA non sempre son máis estables que en soro. Argumentan que a estabilidade do IPTH tras 24 horas a -20ºC é maior en soro que o plasma tratado con EDTA.
En case todos os estudos realizados ata a data, o soro e a EDTA son comparados. 35-42 Non obstante, unha das limitacións que presenta o noso estudo é que non se estableceu un grupo de control con soro (citrato). Polo tanto, non podemos avaliar as determinacións do IPTH en SERUM e PLASMA (EDTA) unha vez conxelados a -20ºC, nin comparar isto cos resultados de Cavalier et al. Ademais disto, non analizamos o que ocorre despois de 48 horas a temperatura ambiente para comparar co Omar et al. resultados.
As conclusións deste estudo non mostran diferenzas significativas entre o grupo de referencia e os outros grupos analizados. Confírmase que as mostras de plasma tratadas con EDTA son estables e recoméndase o seu uso coa centrifugación frigorífica e a conxelación inmediata é difícil de alcanzar.
Conclusión
O uso de EDTA como conservante No procesamento de mostras analíticas para a determinación de sangue do IPTH permite un maior tempo de procesamento sen o requisito de conxelación inmediata, mostrando unha variabilidade mínima nos resultados obtidos segundo diferentes métodos de procesamento. Estes resultados poden axudar a establecer estratexias loxísticas para o procesamento de mostras de sangue en pacientes con CKD.
Táboa 1. Características descritivas da poboación de estudo
Táboa 2. Valemento IPT (PG / ML) para cada grupo estudado
Figura 1.