Facteurs extrinsèques et intrinsèques associés à des populations de champignons mycotoxygéniques de grains de maïs (Zea Maies L.) stockées en Silos Stock Exchange en Argentine | Magazine Argentine de la microbiologie

Introduction

Le sac de technologie Silos pour stocker des grains secs est devenu un outil important pour les agriculteurs en Argentine et dans d’autres pays du monde (Bartosik, communication personnelle) . Le sac de silos avec une plus grande capacité de stockage a des dimensions atteignant 100 m de long et de 4,3 m de diamètre et avoir une capacité de 500 tonnes de grains, bien que la capacité la plus courante soit de 200 tonnes. Les silos de sacs sont relativement étanches à l’eau et ont un niveau élevé d’hydroxyde d’oxygène (O2) et de dioxyde de carbone (CO2). La respiration des composants en vrac (grains, insectes et champignons, entre autres) consomme l’O2 et génère le CO225. Cela crée des conditions défavorables pour la survie des champignons et des insectes, empêchant ainsi les pertes de qualité des Grains36. Cependant, lorsque les grains sont stockés avec des niveaux d’humidité supérieurs à l’assurance recommandé (pour le maïs, le blé et le soja: 14%; pour le tournesol: 11%) (http://www.cosechaypostcosecha.org, consulté en avril 2015 ), il existe une forte probabilité que les micro-organismes aérobiques stricts, certains anaérobies facultatifs tels que les bactéries et la levure. Même certaines espèces fongiques, telles que Fusarium Oxysporum, sont capables de changer de métabolisme et de s’adapter aux conditions d’absence d’O242.

nombreuses espèces de fusarium, aspergillus et pénicillium et d’autres genres colonisent des grains dans le champ et ils peuvent poursuivre leur développement dans des conditions de stockage. Étant donné que certains d’entre eux ont le potentiel de produire des mycotoxines, en plus de modifier les propriétés physiques des grains, ces agents peuvent provoquer des inconvénients de la santé humaine et des animaux. Les manifestations de la toxicité chez les animaux sont aussi diverses que les espèces de champignons qui produisent ces métabolites, aspect qui a provoqué une préoccupation globale de la sécurité alimentaire et de la sécurité alimentaire. La consommation répétée de basses doses d’aflatoxines, produites par Aspergillus flavus, a un effet mutagène et un cancérogène chez les animaux, ainsi que d’être mortel à des doses élevées. Les fumonisines, produites par des espèces de fusarium, ont été liées à certaines maladies spécifiques telles que le leucoencéphalome équin et le syndrome d’œdème pulmonaire à Porcinos7. Bien qu’il soit connu que Aspergillus et les espèces de pénicillium présentent une plus grande compétitivité lors du stockage des céréales sèches par rapport à l’espèce de Fusarium22,33, l’espèce de ce sexe peut se développer pendant le stockage lorsque les grains sont mouillés.

La détérioration produite par des champignons dans des céréales stockées dépend d’une série de facteurs, qui peuvent être classés comme extrinses, intrinsèques et technologiques40. Les facteurs extrinsèques sont associés à des conditions environnementales, telles que la température, l’humidité relative et la tension d’O2 et de CO2. Les facteurs intrinsèques sont liés à la composition chimique et aux propriétés physiques des grains, tandis que les types technologiques comprennent l’emplacement des grains dans les différents secteurs des structures qui les contiennent, dans ce cas particulier, en référence au sac à silos. Ces facteurs conditionneraient la croissance des champignons, la production potentielle de mycotoxines et la qualité finale du grain stocké. Pour cette raison, la pertinence de la détection de la présence de populations fongiques est comprise, ainsi que de connaître sa distribution et sa taille et ses facteurs environnementaux qui conditionnent son développement sur les grains stockés dans les sacs.

Les informations compilées Peut être utilisé pour concevoir des stratégies et appliquer des pratiques correctives lors de la culture ou du stockage, et d’éviter les pertes de qualité des grains, principalement par la production de mycotoxines.

L’objectif de cette étude a été caractérisé les populations fongiques, en particulier mycotoxigenic, qui colonise grains de maïs stockés dans des sacs de silos avec des humidités supérieures à celles recommandées et évaluent également des facteurs extrinsèques, intrinsèques et technologiques susceptibles d’influencer de telles populations.

Sac de matériaux et Métosis

Les échantillons de maïs ont été obtenus à partir de 5 sols Silos situés dans le sud-est de la province de Buenos Aires, Argentine (37 ° 45 ‘S, 58 ° 18’ O; 130m au dessus du niveau de la mer). Le sac en silos (polyéthylène de 250 μm d’épaisseur) était de 60 m de long, de 2,5 m de diamètre de 1,7 m de haut et une capacité de stockage de 180 tonnes de grains chacune. La teneur en humidité des grains enregistrée pour chacun des 5 sacs de silos au cours de la récolte était supérieure à 14,5%.Les silos de sacs identifiés comme 1, 2, 3, 4 et 5 ont présenté des valeurs d’humidité de 16,8% de 16,9%, 15,7%, 15,4% et 17,4%, respectivement. La préparation des Silos Bolsa a eu lieu en juillet (Silos Bolsa 1 et 2) et août (Silos Bolsa 3, 4 et 5) de 2010, et celles-ci ont été extraites en décembre 2010 (Silos Bolsa 1 et 2) et janvier 2011 (Silos sac 3, 4 et 5). Au total, 270 échantillons de haricots de maïs ont été analysés, extraits de 3 strates du profil vertical des silos de sac. La strate supérieure englobait une profondeur de 0 à 0,2 m, la couche moyenne de 0,2 à 0,6 m et la couche inférieure de 0,6 à 1,8 m. De plus, du point de fermeture des sacs, différentes zones ont été établies pour l’extraction des échantillons, situées dans 6 secteurs équidistants le long des silos bolsa: à 10 m (zone 1), la 20 m (zone 2), 30m (zone 3 ), 40m (zone 4), 50m (zone 5) et 60m (zone 6). Les échantillons ont été collectés avec une salade de grains de 1,8 m de long, en 3 heures de stockage: à la fermeture du sac en silos (heure 1), après 90 jours (temps 2) et avant l’ouverture du sac de silos ou de la fin de la période. (temps 3). Dans chaque strate et zone, 3 échantillons d’environ 1,5 kg ont été collectés pour former un échantillon composé de 4,5 à 5 kg. Les grains collectés ont été placés sur des sacs en papier et stockés à 4 ° C jusqu’à leur analyse.

Analyses physiques et chimiques

à l’intérieur du sac de silos a été enregistré la température du profil en vrac dans les 3 fois d’échantillonnage. Pour cela, un tube de température portable équipé de capteurs à 3 points a été utilisé, qui a été inséré dans le centre de chaque sac de silo à 30 m de la fermeture de chacun (entre les zones 3 et 4). L’emplacement de chaque capteur a coïncidé avec les 3 strates du profil vertical du sac.

La concentration de O2 et de CO2 de l’atmosphère interne des sacs a été déterminée dans les trois temps de stockage et pour les 6 zones , bien que seule la strate moyenne du profilé vertical ait été prise en compte, car les gaz diffusent verticalement. Pour cette mesure, un compteur de gase portable (point de contrôle, PBI, capteur DAN, Danemark) a été utilisé.

La teneur en humidité des grains a été mesurée avec un mètre d’humidité (Dickey-John, GAC 2100, USA) . Le pH des grains en solution aqueuse a également été enregistré dans un rapport de 2: 1 (20 ml d’eau distillée: 10 g de grains au sol), avec l’utilisation d’un peachmeter numérique et portable (Oakton modèle Ph11, série N ° 203852, Singapour )) , Merck®, USA UU) 29 Pour ce faire, et de chaque échantillon, des suspensions ont été effectuées avec 10 g de grains dans 90 ml de solution de diluant (0,1%) de la caséine Pepton (Britania®, Argentine). Les plaques ont été incubées à 25 ° C (dans l’obscurité) pendant 7 jours et le nombre total de colonies formant des unités (UFC / G) a été déterminée, ainsi que de chaque sexe ou espèce identifiée. Les valeurs UFC / G ont été transformées en log10 UFC / G pour effectuer des analyses statistiques.

Pour obtenir les isolats d’identification, chaque colonie de caractéristiques morphologiques différentes a été cultivée à nouveau dans des plaques de vaisselle de Pétri avec YGCA pendant 7 jours à 25 ° C et dans l’obscurité. Les souches pures ont été préservées à une température de -20 ° C dans le glycérol élevé (Biopack®, l’Argentine) à une concentration à 35% V / V dans l’eau.

L’isolation des espèces de pénicillium, Aspergillus, Eurotium , Euplenicillium, wallemie, clasporium, épiccocum, acremonium et levures ont été identifiés avec des touches taxonomiques29. Les isolats d’espèces de Fusarium ont été identifiés à partir de clés spécifiques15,26,38,41. Pour la dénomination de l’espèce, la dernière mise à jour de la nomenclature du code international de nomenclature (ICN) 20.30 et de l’indice Fungorum ont été consultés (http://www.speciesfungorum.org, consulté en avril 2015).

Les identifications de l’espèce de fusarium et une espèce d’Aspergillus ont été confirmées par analyse phylogénétique du facteur d’allongement de la transcription 1 alpha (TEF1) avec les amorces EF-728M / EF239, avec la méthodologie proposée par Chaaverri et Samuels8. Les réactions de séquençage ont été menées sur un équipement BigDyetM Terminator V 3.1 (biosystèmes appliqués, États-Unis), sur la base de la méthode Sanger et des éjaculations avec l’analyseur génétique 3130XL dans SIGYSA (Argentine). Un alignement avec Clustalw a été réalisé dans Mega 4.1 des séquences obtenues avec des séquences de référence enregistrées dans la Genbank.Des analyses de parcimonie ont été réalisées dans Nona avec l’utilisation de l’environnement entendu avec une recherche heuristique avec 10000 répétitions et une stratégie de recherche TBR, et le soutien des succursales a été calculé sur la base d’une bootstrap de 1000 répliques. Pour ces analyses, des séquences d’espèces étroites ont été ajoutées sous la forme d’un groupe de contrôle externe.

Détermination des mycotoxines

composées de grains de 5 kg ont été formés par chaque strate, y compris les 6 zones de chacun des 5 sacs de silos, et ils ont été renvoyés à la fondation de la recherche scientifique Teresa Benoît de La Cruz, Luján (province de Buenos Aires), où ils ont été évalués. La présence d’aflatoxines a été étudiée (AFLA: B1, B2, G1, G2), Zaralenone (Zea) et Deoxinivalénol (Don), selon le n ° Romer My8402S, version 94 237, et les fumonisines (FB1, FB2, FB3) ont été étudiés. Avec le protocole AOAC, la méthode officielle 995.152. Pour les quantifications susmentionnées, la chromatographie liquide haute résolution (HPLC) a été utilisée. Le système HPLC utilisé provient de la série Agilent 1100 (Allemagne), qui comprenait un dégazeur G1322A, un échantillonneur automatique G1313A, un détecteur de fluorescence G1321A, une pompe G1311A quaternaire et un contrôleur de température G1316A.

Analyse statistique

Parce que Les observations faites dans le même sac de silo n’ont pas pu être supposées statistiquement indépendantes, l’utilisation de modèles linéaires mixtes qui nous ont permis d’étudier les effets des facteurs d’intérêt et de modéliser en même temps la structure de corrélation possible entre les observations. Les modèles linéaires mélangés ont été ajustés afin de déterminer l’effet fixe de la strate, la zone du récipient, le temps de stockage et ses interactions sur le pH, l’humidité des grains, le nombre total de champignons et de levures UFC et Le nombre total de Fusarium spp ufc. Et de A. Flavus. Ces modèles ont également incorporé les effets aléatoires du sac, de la strate, de la zone et du temps pour incorporer une corrélation positive entre les observations effectuées dans le même niveau de l’un de ces facteurs. D’autre part, les modèles ajustés pour analyser les concentrations d’O2 et de CO2 n’ont pas considéré l’effet fixe de la strate et pour la température qu’ils ne considéraient pas l’effet fixe de la zone du sac. La fonction LME du paquet « NLME » de la langue R34 a été utilisée. Lorsque l’effet significatif des facteurs (P

0,05) a été détecté, des comparaisons multiples simultanées des mesures estimées par le modèle ont été effectuées, à l’aide de la fonction « GLHT » du package « multicup » R19. Cette fonction utilise la répartition de TO conjointe de toutes les différences de moyens estimées à comparer, sans corriger le niveau de signification par les multiples comparaisons, de la même manière à un test de différence minimum significatif. Analyse physique et chimique

au moment de la bagation des grains , la teneur moyenne d’humidité considérant que 5 sacs de silos était de 16,4 ± 0,7%, tandis qu’à la fin de la période analysée, les valeurs ont augmenté de manière significative (p = 0,005) à 16,7 ± 1, 11% dans la couche supérieure. La température des grains a été augmentée de 8,6 ° C au début du stockage à 22,8 ° C à 5 mois de stockage. A cette époque, la température était significativement différente dans les 3 strates analysées: ceci était plus élevé dans la couche supérieure par rapport à la strate moyenne (p = 0,029) et inférieure (p

0,001). Les concentrations d’O2 et de CO2 pendant le stockage peuvent être observées dans le tableau 1. Au début du stockage, les niveaux d’O2 variaient entre 19,20 et 19,66% et les taux de CO2 compris entre 0,76 et 1,30%. Après la réussite du temps, les niveaux d’O2 ont été progressivement réduits, tandis que le CO2 a augmenté. Un effet d’interaction significatif a été détecté entre la zone du silo du sac et le temps de stockage pour le niveau d’O2 (p = 0,0054) et CO2 (p = 0,0226). La concentration de CO2 a été augmentée vers le troisième échantillonnage et était significativement différente (p = 0,0091) entre les zones. La concentration de O2 a diminué de manière significative vers la fin de la période analysée et des concentrations significativement différentes ont également été détectées (p = 0,0003) entre les zones des silos de sac. Le pH des grains variait de manière significative entre les strates (p0 001) et les temps (p = 0,0036): l’acidité la plus élevée a été enregistrée dans la couche supérieure et vers la fin de la période de stockage (tableau 2).

Tableau 1.

Evolution du CO2 et O2 concentrations dans l’atmosphère de grains de maïs stocké dans le sac de silos

Zonasa Concentration de CO2 (% ) O2 concentration (%)
temps 1 temps 2 temps 3 Temps 1 Temps 2 Temps 3
1 0,78 ± 0,5 AB 9,50 ± 5,1 AA 12,57 ± 4,4 BA 19,58 ± 0,7 A à 10,54 ± 5.1 AB 7.80 ± 4.1 AB
2 1,30 ± 1,2 AB 11,24 ± 4,4 AA 14,68 ± 4,3 B A 19,20 ± 0,9 A A 7,70 ± 5,4 A B 5,72 ± 3,3 A B
3 0,90 ± 0,5 AB 10,80 ± 4,0 AA 14,44 ± 6,5 BA 19, 30 ± 0,8 AA 7,38 ± 4,6 AB 6,68 ± 4,3 AB
4 0,84 ± 0,5 AB 12,06 ± 3,3 AA 17,72 ± 4,7 AB A 19,40 ± 0,4 A A 6,62 ± A B 5,3 3,12 ± 1,5 A B
5 0,76 ± 0,2 C 12,34 ± 4,1 AB 19,00 ± 4,5 AB A 19,46 ± 0,4 AA 6,16 ± 5.1 AB 2,86 ± 2,3 AB B
6 0,81 ± 0,5 AC 12, 12 ± 5,5 AB 21,44 ± 3,9 AA 19, 66 ± 0,6 AA 7.50 ± 5.7 AB 1,14 ± 0,4 BC

les valeurs correspondent aux moyennes ± du sac 5 silos. Différentes lettres minuscules dans la même colonne indiquent des différences significatives (p0.05) entre les différentes zones évaluées. Les différentes lettres majuscules dans la même ligne indiquent des différences significatives (p0.05) entre les différents temps.

zones 1, 2, 3, 4, 5 et 6: 10, 20, 30, 40, 50 et 60 m du point de fermeture du sac de silos, respectivement. TEMPS 1: Gros plan de sac de silos; TEMPS 2: 90 jours de stockage; Temps 3:. 5 mois de stockage

Tableau 2

Evolution du pH des grains de maïs stocké dans le sac de silos

pH
temps Est em ei moyenne
1 6, 12 ± 0,1 6,14 ± 0,0 6,16 ± 0,1 6,14 ± 0,1 à
2 6,13 ± 0,1 6,15 ± 0,1 6, 17 ± 0,2 6,15 ± 0,1 A
3 5,88 ± 0,0 5,90 ± 0,0 5,93 ± 0,1 5,90 ± 0,1 B
médias 6,04 ± 0,1 C 6,06 ± 0,1 B 6,09 ± 0,1 A

les valeurs correspondent aux bas du sac ± 5 silos

Temps 1:. Fermeture du sac de silos; TEMPS 2: 90 jours de stockage; Temps 3: Cinq mois de stockage

différentes lettres indiquent des différences significatives (p0.05) entre les couches ou les temps

est la suivante:.. Couche supérieure; EM: Stratum moyen; EI: Stratum inférieur.

Composition du microbiota

Le nombre LOG10 TOTAL10 UFC / G Au début de la mémoire était de 4,11 ± 0,5 et avant l’ouverture des sacs de 4,42 ± 1,0) (tableau 3). Bien qu’aucune différence significative n’a été enregistré dans les comptes totaux entre les temps (p > 0,05) et les zones du sac de silos (p > 0,05), un effet significatif de la strate (p = 0,0314) a été déterminée, dans lequel la couche supérieure a enregistré un nombre plus élevé de UFC / g par rapport à la couche inférieure.

Tableau 3.

Evolución del recuento totale de la micobiota en Granos de maíz almacenados en silos Bolsa


4,04 ± 0,3

2

4,22 ± 0,7

4,18 ± 0,7 à

Los Valores corresponden médias éclairés de DE para los 5 silos Bolsa

Tiempo 1:. de Cierre de los la Bolsa; Tiempo 2: 90 Dias de almacenamiento; Tiempo 3: 5 mois plus de almacenamiento

letras diferentes indican diferencias significativas (p0,05) Entre Estratos de Tiempos

ES:.. Estrato supérieure; EM: estrato MEDIO; EI:. Estrato inférieure

La población fúngica totale hallada en las muestras de granos de maíz almacenados Durante est constituyó 5 meses por especies pertenecientes 35 à 10 géneros de l’y 3 géneros de Hongos de Levaduras (Tabla 4). Identificaron est de 18 especies de Penicillium, en clasificadas 4 subgéneros, Segun continuación pour le décrire. Subgénero Aspergilloides: de Penicillium J.F.H. Beyma, implicatum Biourge Penicillium, Penicillium oxalicum (syn. P. decumbens Currie & Thom), Penicillium restrictum J.C. Gilman & EV. Abbott; subgénero Biverticillium: Talaromyces funiculosus (. syn Pénicillium funiculosum Thom), Talaromyces variabilis (syn P. variabile Sopp.), Talaromyces (syn P. islandicum Sopp.), Talaromyces pinophilus (syn P. pinophilum Hedgcock); subgénero furcatum: P. Currie oxalicum & Thom, Penicillium corylophilum Dierckx, Penicillium citrinum Thom; subgénero Penicillium: Penicillium brevicompactum Dierckx, Penicillium solitum Westling, Penicillium aurantiogriseum (. syn Penicillium viridicatum Westling), Penicillium verrocusum Dierckx, Penicillium Rubens Biourge (. syn P. chrysogenum Thom), Penicillium griseofulvum Dierckx, Penicillium olsonii Bainier y Sartory. En général, las especies de Penicillium est encontraron Alta con frecuencia (51%) du total en el muestras analizadas. Cet embargo, la frecuencia de aparición (%) de cada una de estas y su recuento (log10UFC / g) Variable fue Durante el período analizado. T. funiculosus fue la especie predominante en los Tiempos 3 muestreo. Al comienzo del almacenamiento, el 75,5% de las muestras Presento T. funiculosus (3,37 ± 0,71 log10 UFC / g). 2 en el Tiempo, el porcentaje de chien las de T. Incremento al funiculosus est 76,6% (± 0,79 log10 3,25 UFC / g) y al finale del período considerado el porcentaje est redujo al 69%, aunque que variación en los recuentos (3,28 ± 0,71 log10 UFC / g).

Tabla 4.

Composición de las les Asociadas à Granos de de poblaciones maíz almacenados en silos Bolsa

total recuento (log10UFC / g)
Tiempo ES EM EI médias
1

4,21 ± 0,3

4,07 ± 0,6 4,11 ± 0,5 à
4,28 ± 0,7 4,05 ± 0,8
3 4,64 ± 1,0 4,46 ± 1,0 4,15 ± 0,9 4,42 ± 1,0 à
médias 4,36 ± 0,7 à

4,26 ± 0,7 à

0,8 ± 4,09 b

Eurotium spp. Lien: Fr.

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a

proportion d’espèces de chaque sexe par rapport au nombre total d’espèces identifiées.

T1: heure 1, fermeture du sac de silos; T2: Time 2, 90 jours de stockage; T3: Time 3, 5 mois de stockage.

Les espèces de Fusarium ont été isolées à 82,3% des échantillons totaux analysés au cours des 5 mois de stockage. Sur la base des caractéristiques macroscopiques des colonies et du microscopique des structures de reproduction et de l’étude phylogénétique avec le marqueur TEF1, les espèces de fusarium suivantes ont été identifiées: Verticillioides de Fusarium (SACC.) NIRENBERG, FUSARIUM PROLIFERATUM (MATSUSHIMA) NIRENBERG, Subglutins de Fusarium (Wollenw et séminant) Nelson, Toussoun et Marasas et F. Oxysporum Schlecht. Délicieux Snyd. et Hans.

Concernant Aspergillus spp. De la caractérisation morphologique des isolats et de l’étude des séquences STI identifiées 2 espèces dans la première heure de stockage, dans tous les sacs de silos. Ces espèces appartenaient au Subgender Circurenda, section Flavi, A. Flavus Link et la section Nigri, Aspergillus Niger Tiegh.

La présence d’Eurotium spp. Il a été observé dans la seconde et dans le troisième échantillonnage de 10% et 37,8% des échantillons, respectivement. L’espèce prédominante était Eurotium Amstelodami L. Marge.

Concernant la levure, 27,8% des échantillons de maïs recueillis au début du stockage ont montré une contamination avec ce groupe microbien, tandis qu’à la fin de la période, ils ont été isolés dans 58% d’entre eux. Les comptes moyens étaient de 3,3 ± 0,70 log10 ufc / g et 4,62 (± 0,74) log10 ufc / g au début et à la fin du stockage, respectivement. L’espèce dominante était Hyphopichia Burtoniiiii (Bidin et al.) Arx & Van der Walt, isolé sur 91,9% des échantillons de grains. Les espèces restantes ont été classées comme appartenant au genre Candida.

espèces fongiques avec une capacité potentielle de produire des mycotoxines

f. Verticillioides, F. ProLiferatum, A. Flavus, P. Citrinum, P. Verrucosum et E. Amstelodami ont été des espèces isolées d’échantillons de céréales de tout sac en silos. La fréquence d’isolement et de comptes des espèces de fusarium ont été réduites à la fin de la période analysée et Aspergillus n’a pas été trouvée à ce moment-là. A. Flavus a été isolé sur 11,44% des échantillons de temps 1, avec un nombre de 2,73 ± 0,71 log10 ufc / g. Le pourcentage d’échantillons contaminés avec des espèces de fusarium a été réduit à 5 mois à une valeur de 54,4%, malgré le fait que les comptes ne présentaient pas de variations significatives (p = 0,0552) entre le premier (2,83 ± 0, 92 log10 ufc / g) et la troisième heure d’échantillonnage (3.18 ± 0,77 log10 ufc / g). En revanche, les espèces de pénicillium et d’eurotium ont augmenté leur fréquence d’isolement et d’abondance vers la fin du stockage. P. citrinum a été isolé à 3,30% d’échantillons de grains de la seconde moitié et avec un nombre de 3,53 ± 0,60 log10 ufc / g, tandis que P. verrucosum a été isolé des échantillons de grains collectés dans la seconde (0,55% des échantillons et des comptes de 2,3 ± 0,00 log10 ufc / g) et la troisième période de stockage (3,88% des échantillons et des comptes de 2,98 ± 1,00 log10 ufc / g) Le nombre de populations de SPP Eurotue. Il a augmenté entre le deuxième et troisième temps de stockage et était de 2,08 ± 0,49 et 2,57 ± 0,49 log10 ufc / g, respectivement.

mycotoxines

Les échantillons totaux analysés ont présenté une contamination avec des fumonnes, tandis que 40% ont révélé la présence de aflatoxines. Les fb1 ont été détectées dans 100% des échantillons, des fumonisines FB2 à 86% et des fumonnes FB3 à 53%. D’autre part, 18,4% des échantillons ne présentaient que FB1; 18,4%, FB1 + FB2 et 47,3%, FB1 + FB2 + FB3 (tableau 5).

Tableau 5.

Concentración de fumonisinas (mg / kg) en Granos de maíz almacenados en los cinco silos bolsa était si 90 Dias

Género % à

Nombre de especies
T1 T2 T3b
Penicillium spp. Lien

51.40

7

10

11

Aspergillus spp. F RFR. 5,71 2 0 0
Fusarium spp. Lien

11,40

4

4

4

Eupenicillium spp. A. Ludw. 2,85 1 0

1

Cladosporium sp. Lien 2,85 1 0 0
Epicocum sp. Lien 2,85 0

1

0
Wallemia sp. (Fr.) Arx 2,85 0

1

0
5,71 0

1

2

Moniliella sp. Stolk & Dakin 2,85 0 0

1

Acremonium spp.Lien 2,85 1 1 1
HYPHOPICHIA spp. (Biidin et al.) Arx & 2,85 1 1 1
Candida spp. Berkhout 2,85 0 1 1
debaryomyces spp. Lodder & Kreger Ex Kreger 2,85 0 1 1

Totales

Fumonisinas Valor mínimo Valor Máximo Media Mediana
0,120 5,707 1,708 0,479
FB1 0,116 4,166 1,190 0,299
FB2 0,067 1,217 0,446 0,196
FB3 0,049 0,317 0,176 0,171

Cuando las analizaron est-af latoxinas solo est DETECTO la presencia en B1 de AFLA concentraciones mínimas de 0,0003mg / kg de 0,0008mg maximas y / kg.

Los valores de micotoxinas determinados al finales del ALMACENAMIENTO ou registraron incrementos respecto de los niveles detectados de telle sorte que 90 Dias (Cardoso, Comunicación personnel). Las de la ZEA y ENTER ou detectadas de Fueron por les empleadas de las.

Discusión

La temperatura, la actividad Agua (aw) y la Humedad de los Granos pour factores condicionantes de la Colonización fúngica y de la PRODUCCIÓN de micotoxinas Durante el almacenamiento de los granos23. Cet embargo, hasta el Sonido ou est realizaron Estudios Sobre la composición de gaz de la atmósfera intergranaria y de la acidez de los Granos, factores Que podrian contribuir à explicar el comportamiento de las poblaciones fúngicas en Sistemas de almacenamiento COME los de Bolsa.

El incremento de la Humedad registrado hacia el finale del almacenamiento en el estrato Superior de los silos Bolsa estudiados podría Ser explicado por la existencia de estratificación de la Humedad de los Granos ubicados en Áreas de Contacto con la cubierta plástica, causado Posiblemente por ciclos repetidos de adsorción condensación de Agua y como consecuencia de la variación diaria de la temperatura ambiente. Casini et al.5 comunicaron estratificación de Humedad en la capa superficielle de Granos de Girasol almacenados plásticas en Bolsas y con la la relacionaron disminución de la temperatura nocturna, Qué una provocó condensación de la superficie de los Granos y de la cubierta plástica.

Los cambios en la composición de O2 y de CO2 Durante el período de la actividad almacenamiento reflejaron metabólica en el intérieur de los la Bolsa. Asi que es la de los Granos respiración y de la microflore asociada redujo el nivel de O2 est Incremento el nivel de CO2, Generando una atmósfera anaérobiose. Estos con los resultados reportados coinciden en Italia para el almacenamiento de Granos de maíz de Trigo y en bolsa18 silos. Por otro lado, en la zona 1 (Cierre de la Bolsa) de los 5 silos Bolsa al finale del almacenamiento est determinó la Mayor concentración de O2, lo que podría indicar un cierre inadecuado de Aquellas; en consecuencia, est favorecería la PRODUCCIÓN de microambientes para el desarrollo de la micobiota aeróbica. Respecto del pH de los Granos, est determinó su disminución en los Granos ubicados en el estrato Supérieur hacia el Tercer del Tiempo almacenamiento. Este resultado podría Ser explicado à partir du Registre des Nations Unies Mairie de UFC Nombre / g Totales en los Granos dispuestos en dicho estrato, ocasionado por la actividad Mayor metabólica. El comportamiento de la variable Esta en condiciones de almacenamiento hermético ou estudiado fue hasta el Sonido. Por ello, el monitoreo de la acidez de los Granos Durante el almacenamiento Puede contribuir à Comprender y explicar La dinámica de las poblaciones fúngicas, y en particulier la de las micotoxigénicas Asociadas a ellos.

El recuento totale de la micobiota colonizó los Que Granos de maíz ou presento variaciones à través del Tiempo, coincidiendo informado con lo por otros en investigadores Argentina28. Estos resultados determinados podrian estar por el incremento de la concentración de CO2 acidez y la de los Granos, y por la reducción del nivel de O2, Que la actividad afectaron metabólica. Por el contrario, en Italia los Reportes indicaron una reducción en el recuento de Hongos Totales Durante el almacenamiento de maíz en silos bolsa18.

Otro aspecto relevante d’Este estudio determinó Que los recuentos fúngicos Totales Fueron afectados por el estrato (posición de los Granos en el perfil del silos verticaux Bolsa): est encontraron los mayores valores en el estrato Superior y los menores en el inférieure.Cette découverte différentielle dans la population compte influencé par l’emplacement des grains n’a jamais été signalée; Cela pourrait être dû aux 3 facteurs extrinsèques expliqués ci-dessus: a) l’augmentation de la température dans la couche supérieure du sac, en réponse aux variations quotidiennes de la température ambiante; b) l’existence de variations d’humidité dans les grains individuels situées dans la couche supérieure du sac, causée par des variations de température diurnes et nocturnes de la température, qui provoque une condensation à la surface des grains, et c) l’influence d’un plus grand échange de gaz entre l’environnement et l’intérieur du sac sur les grains situés dans la strate supérieure35. Dans la couche inférieure, des microemplies ont également été générés lorsque la température et l’humidité plus basse et le plus bas échange gazeux ont influencé négativement le métabolisme respiratoire, qui aurait peut-être affecté la survie de différentes espèces fongiques, y compris mycotoxgénique.

concernant la composition de la composition de Les populations fongiques, il a été observé que la présence d’espèces différentes a été influencée par des conditions environnementales dynamiques qui ont dominé l’intérieur du navire. Au début du stockage, les espèces de Fusarium et Aspergillus ont été isolées avec d’autres espèces associées aux grains. Cependant, la génération d’un environnement anaérobie et l’augmentation de la température et de l’acidité des grains en tant que temps de stockage avancé d’une micobota dominée par des espèces de pénicillium, d’eurotium et de levure. L’augmentation du nombre d’échantillons positifs avec l’eurotium vers la fin du stockage pourrait être due au fait que ce genre est tolérant au stress, ses spores germinent à une température optimale fermer à 30 ° C et sont capables d’adapter davantage à l’acide. pH16. De même, la fréquence d’isolement et les comptes de levure ont augmenté vers la fin de la période considérée. Bien que ces résultats ne soient pas coïncidés avec ceux rapportés par d’autres chercheurs dans des conditions similaires28, l’augmentation pourrait être expliquée par la domination d’une atmosphère anaérobie.

La fréquence d’isolement d’espèces potentiellement productrices (A. Flavus et Fumonisines (F. Verticillioides et F. ProLiferatum) ont été réduits vers la fin du stockage. Certains chercheurs ont signalé que Aspergillus espèces seraient mieux adaptées à la croissance des substrats atteints de PH43 alcaline. La réduction du pH des grains pourrait donc avoir affecté la survie de ces espèces. D’autre part, on pourrait en déduire que, bien que A. Flavus soit considéré comme une espèce favorisée par des conditions de stockage4, il aurait probablement des inconvénients de s’adapter aux conditions environnementales de stockage dans le sac Silos, avec des restrictions importantes sur la concentration et l’augmentation de la acidité. L’identification de A. Flavus dans le maïs dans différentes conditions de stockage a coïncidé avec les autres chercheurs éclairés dans différentes régions agroécologiques de l’Argentine10,17,32.

la fréquence d’isolation de Fusarium spp. Il a été réduit vers la fin du stockage; Cependant, son nombre de population n’a pas enregistré de variations. Ces résultats sont d’accord avec ceux rapportés par d’autres chercheurs en Argentine6,14 et d’autres pays13,31.

Contrairement à ce qui s’est passé avec le nombre total de populations fongiques, qui a été affectée par la strate grenière, aucun effet de la position des grains ont été détectés dans le sac sur le comte des espèces de fusarium. Pour la première fois, il est communiqué que la position des grains à l’intérieur du sac silo n’a pas affecté le nombre de population; Peut-être que cela est dû au fait que les espèces de ce genre sont associées au substrat de maïs et sont moins influencées par les conditions environnementales à l’intérieur du silo Bolsa21,33.

la capacité des espèces de fusarium et une. Flavus Pour produire des fumonisines et des aflatoxines dans le maïs, il a été démontré dans différentes enquêtes menées dans notre pays3. Cependant, en Argentine, il n’existe que de législation pour les aflatoxines totales et spécifie les limites maximales des cacahuètes, du maïs et de leurs dérivés, ainsi que pour l’aflatoxine M1 dans le lait de fluide et de lait (http://www.anmat.gov.ar/alimentos/codigoa, consulté dans Avril 2015). Pour les mycotoxines restantes, l’Argentine considère les limites de tolérance indiquées par la législation en vigueur dans la Communauté européenne12.

Les niveaux totaux de la fumonisine ont dépassé les valeurs maximales autorisées de 4 mg / kg11 dans 3 des échantillons analysés, correspondant 3 dans le même sac de silo (sac de silo 3).Les grains de ce sac de silo étaient des Pampers au mois d’août, de sorte que les fortes concentrations déterminées pouvaient être expliquées par une plus grande permanence de grains dans la culture, où les espèces de Fusarium ont des avantages d’adaptation plus importants pour coloniser les céréales et produisent la mycotoxine9. Cet aspect est pertinent, car on pourrait en déduire qu’un retard dans la récolte provoquerait une accumulation de fumonisines dans les grains sur le terrain. Ces chercheurs qui ont analysé des fumonnes totales dans le maïs dans différentes zones de production des niveaux déterminés par l’Argentine, passant de 2 525 mg / kg à 11 528 mg / kg14 et de 0,01 mg / kg à 31 108 mg / kg28, des données qui manifestent une variabilité marquée.

En ce qui concerne les aflatoxines, les niveaux enregistrés étaient inférieurs aux limites établies dans notre pays pour les grains de maïs (0,020 mg / kg), ce qui pourrait être lié à la moindre adaptation de A. Flavus aux conditions Descriptions environnementales de la zone d’étude . Cette espèce est généralement isolée dans le maïs cultivé dans les régions centrales et nord de l’Argentine, où elle est favorisée par des températures supérieures à 30 ° C24.

entre les mycotoxines produites par Penicillium spp. Ocratoxine A (OTA), Patuline et Citrinine27 se démarquent. Dans cette étude, P. citrinum et P. verrucosum, les producteurs potentiels de la citrinine et de l’OTA, respectivement, ont été isolés avec une fréquence basse. Peut-être que la composition de gase de l’atmosphère et l’augmentation de l’acidité ne favorisaient pas leur développement.

En référence à l’augmentation de E. AMSTÉLODAMI, aucun rapport de production OTA n’est pas connu pour cette espèce dans le maïs. stocké dans un sac de silos. Toutefois, il a été signalé que cette espèce a produit OTA dans des céréales de céréales au stockage1. Il y aurait donc des études nécessaires sur la production de l’OTO par Eurotium SPP. Dans les grains de maïs stockés dans un sac en silos depuis cette mycotoxine, ainsi que ceux déjà mentionnés, représentent un risque potentiel de santé humaine et animale.

tandis que le stockage des grains dans un sac Silos constitue un stockage simple et un système LOW COÛT D’INVESTISSEMENT Pour préserver les grains, il est nécessaire de surveiller l’état des grains avant qu’ils ne soient emballés et de stockage périodiquement, afin de détecter précisément leur détérioration éventuelle en raison du développement de champignons. Les données sur la dynamique des populations mycotoxygéniques et les facteurs qui conditionnent leur apparence et leur prolifération fournies par cette étude pourraient contribuer à la conception de stratégies visant à éviter l’altération de la qualité des grains pendant le stockage. On pourrait être associé à l’utilisation de différents mélanges de gaz (avec teneur en CO2 élevée), en tenant compte de la faible fonctionnalité de perméabilité du plastique du navire. De cette manière, ce serait une alternative valable pour réduire les pertes de qualité des grains destinés à la consommation humaine et animale causée par la production de métabolites toxiques, lorsque ceux-ci sont stockés pendant des périodes supérieures à 5 mois.

concernant le La législation qui établit des limites de tolérance pour différentes mycotoxines dans des matières premières et de la nourriture élaborée, il serait pertinent d’établir des valeurs de tolérance maximales pour les fumonisines, car sa présence a été détectée dans un pourcentage élevé d’échantillons de grains de maïs analysés ces dernières années en Argentine, une situation qui pourrait être un problème pour le marketing et l’industrialisation des grains, que ce soit pour la consommation humaine ou animale.

Responsabilités éthiquesProtection des personnes et des animaux

Les auteurs déclarent que pour cette recherche n’a pas été effectuée d’expériences chez l’homme ou des animaux.

Confidentialité des données

Les auteurs Ils déclarent que dans cet article, aucune donnée de patients n’apparaît.

droit à la vie privée et au consentement éclairé

Les auteurs déclarent que les données du patient n’apparaissent pas dans cet article.

Financement

Le présent travail a été financé. Par l’Université nationale de Mar del Plata (projet AGR375 / 12) et l’Institut national de la technologie agricole (projet AEAI 274 420, domaine stratégique de l’agrodrisation) et a été présentée par Claudia C. Castellari comme une exigence partielle d’obtenir le degré académique du docteur En sciences agricoles à l’Université nationale de Mar del Plata, en Argentine.

Conflit d’intérêts

Les auteurs déclarent ne pas avoir de conflit d’intérêts.