Détection de virus de papillome humain à haut risque par Hybride Capture II® Selon les résultats cytologiques chez les femmes traitées par des lésions cervicales intraépithéliales, période 2006/2010

Introduction

Le cancer du col utérin est le troisième cancer le plus fréquent chez les femmes au monde, avec 529 828 nouveaux cas et 275 128 décès, dont 31 712 en Amérique latine et dans les Caraïbes. 85% des nouveaux cas se produisent dans les pays en développement. Le taux d’incidence normalisé de l’âge en Amérique du Sud est de 24,1 x 100 000 femmes. Au Paraguay, le taux d’incidence et de mortalité est de 35,0 et 16,6 x 100 000 femmes respectivement. Ce taux est beaucoup plus élevé que ceux enregistrés dans d’autres pays voisins tels que l’Argentine, le Brésil, l’Uruguay et le Chili1.

Le papillomavirus humain (VPH) est un facteur nécessaire pour le développement du cancer du col utérin, il y a plus de 100 types de VPH, d’eux environ 40 infect de la muqueuse anogénitale, ceux-ci sont classés en fonction de leur potentiel oncogène dans le virus à haut risque (VPH) et à faible risque (LR-HPV), avec HR-HPV (16, 18, 31. , 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 et 66) détectés dans plus de 95% des cas de cancer du col utérin2-5.

cytologie est simple et faible Méthode de coût utilisé pour détecter l’effet cytopathique produit par le virus, mais ne détermine pas le type viral. Étant donné que le VPH ne pousse pas dans les cultures de cellules conventionnelles, des méthodes moléculaires ont été utilisées ces dernières années capables de détecter le génotype viral sous forme de capture hybride II (R) (CH II (R)), qui détecte 13 types d’HR-HPV et fournit une estionne estimée. Valeur de la charge virale 6.7.

Il n’y a toujours pas de traitement pour éliminer l’infection liée au VPH, mais si pour les blessures produites par le virus. Les méthodologies utilisées pour le traitement sont les suivantes: le processus scint de scintilité électrochurgique électrochurgique, la cryothérapie et la conduction électrochurgique (boucle électrochirurgicale. Malgré la possibilité de traiter les lésions intraépithéliales produites par le VPH, il existe une probabilité de récurrence ou de développer un cancer du col utérin. Si la lésion s’étend sur la marge endocervicale, le risque de défaillance du traitement est plus important, y compris les femmes qui ont des marges sans blessure ont un risque d’échec de traitement de 2 à 6%, quel que soit le traitement utilisé. La raison accumulée de l’invasion en 8 ans après le traitement est de 5,8% pour 1 000 femmes, qui est à son tour supérieure à celle de la population générale8-14.

en plus de la prise en compte des marges chirurgicales commises comme un facteur de récurrence, Il existe d’autres cofacteurs qui favorisent la persistance ou la récurrence des lésions squameuses intraépithéliales après traitement, telles que l’âge, la parité, le diagnostic cytologique et le degré de blessure avant le traitement15.

Pour ce qui précède, il est important de ce que cela soit important et méticuleux Suivi après traitement. Des études récentes suggèrent que l’utilisation combinée de la cytologie ainsi que le CHI II (R) augmente l’efficacité pour sélectionner des femmes traitées à risque de développer une lésion résiduelle intraépithéliale (SIL) ou récurrente, à six mois de traitement16-19.

Au Paraguay, des études antérieures ont observé une fréquence élevée du HR-VPH chez les femmes avec l’absence de blessures cervicales, ainsi que des facteurs de risque (nombre élevé de couples sexuels, de multiperités, entre autres) associés au développement du cancer du col utérin, comparables ou supérieurs à ceux détectés dans d’autres pays en développement, ce qui pourrait expliquer partiellement l’incidence élevée de ce cancer dans notre pays20-23.

Dans le pays, il n’y a pas de travail sur la fréquence du HR-HPV chez les femmes traité par SIL, considérant donc le comportement sexuel des femmes paraguayennes qui pourraient favoriser l’acquisition de l’infection virale post-traitement et augmenter le risque de récurrence, L’objectif de l’étude préliminaire actuelle était de déterminer la fréquence du HR-HPV par le CH II (R) selon les résultats cytologiques chez les femmes traitées par SIL du col utérin, période 2006-2010.

Matériaux et méthodes

Etude descriptive de la coupe transversale d’une série de cas, réalisée avec 122 femmes traitées des blessures cervicales qui sont venues consécutivement au ministère de la Santé publique et de l’épidémiologie de l’Institut de la recherche en sciences de la santé (ICS) de l’Université nationale d’Asunción (ONE) de la période 2006/2010 avec une indication médicale pour la détection de HR-HPV par CH II (R).

Le traité Les femmes ont été dérivées de l’IIC, l’une de différents centres de santé publique et privés du département central du Paraguay. Dans cette étude, les femmes qui avaient un diagnostic cytologique de la blessure avant le traitement étaient incluses, qui ont été traitées avec une antécédence d’au moins 6 mois et qu’après le traitement présentait un diagnostic cytologique mis à jour au moment de la détection de HR-HPV par CH Ii (r). Ceux qui sont allés à l’IIC, une, avec plus de 2 ans de traitement ont été exclus. Le traitement appliqué dépendait des critères médicaux et reposait sur le manuel national des normes et procédures de prévention et de contrôle du cancer du col utérin du ministère de la Santé publique et du bien-être social du Paraguay24.

Avant le traitement, Sur les 122 femmes, 79 ont présenté un diagnostic histologique confirmé de SIL de faible grade (LSIL) et 43 SIL de haute qualité (HSIL). Sur la totalité des femmes, 97 ont été traitées avec du déchets et 25 avec la coninalisation.

Toutes les femmes incluses ont été menées à un questionnaire composé de données démographiques, socio-économiques, gynéco-obstétrics et de comportement sexuel. Toutes les informations ont été traitées concernant la confidentialité des patients. Le travail a été approuvé par le Comité d’éthique de l’IICS de l’Université nationale d’Asunción, no M07 / 10.

La taille minimale de l’échantillon de 144 femmes traitées a été calculée à l’aide de la table Annexe 13e pour une étude descriptive avec une variable dichotomique avec une variable dichotomique , considérant 30% de la fréquence attendue de HR-HPV après traitement, avec une amplitude (?) de 0,15 et une plage de confiance de 95%.

Détection de blessures au cou utérin chez les femmes traitées par la cytologie

L’étude cytologique a été réalisée dans les centres de santé participants. L’échantillon de prise consistait en un brossage cervical placé dans une feuille givrée correctement identifiée. En bref, les feuilles ont été submergées pendant 15 minutes dans un récipient à grande bouche avec de l’alcool rectifié (96%) suffisamment pour couvrir toute la surface de celui-ci. Ensuite, la lame du conteneur a été éliminée en le laissant sécher pendant 10 minutes et un pulvérisation fixe a été placé. Les résultats cytologiques ont été classés selon le système Bethesda 200126.

Détection HR-HPV chez les femmes traitées par CH II

L’échantillon a été recueilli dans les IIC, l’un, en utilisant une brosse endocervicale (cytobrush), qui a été introduit dans un tube de collectionneur, fourni par le fabricant, Qiagen (Allemagne).

Les échantillons ont été traités par la méthode Chi II détectant 13 types de HR-HPV: 16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58, 59 et 68. Après le protocole du fabricant, les échantillons cervicaux ont été traités avec de l’hydroxyde de sodium afin de dénaturer l’ADN. L’ADN Strart Strand a été hybridé en solution avec un cockey d’ARN des 13 types de HR-HPV. Chaque mélange réactionnel contenant un peu hybride d’ARN-ADN a été transféré dans une microplaque bien sensibilisée bien sensibilisée, permettant son immobilisation. L’ADN d’ARN hybride relié à l’anticorps a été mis en contact avec un deuxième anticorps conjugué à une phosphatase alcaline. Le matériau mutilé a été éliminé par lavé successif, puis un réactif chimioluminescent (Lumi-phs 530) a été ajouté, comme substrat pour la phosphatase alcaline. La luminescence produite par la réaction a été mesurée par un luminomètre. L’unité de mesure de la lumière a été exprimée en unités de lumière relatives (RUS). Les contrôles positifs et négatifs fournis par QIAGEN ont été utilisés par TriClicate.

La valeur de charge virale relative a été obtenue en comparant les URL de l’échantillon avec celles de la commande positive (URL / CP). L’échantillon avec des valeurs URL / CP a été considéré comme positif positif? 1.0 pg / ml. La charge virale relative a été divisée en quatre catégories selon ses valeurs PG / ML; De 1 à moins de 10 pg / ml (charge virale relative faible), de 10 à moins de 100 (charge virale relative intermédiaire), de 100 à moins de 1000 (charge virale relative élevée), égale ou supérieure à 1000 (virale Chargement relatif très élevé) 27.

Il convient de noter que les professionnels ayant participé au traitement des échantillons et le rapport des résultats de CH II (R) ne connaissaient donc pas les résultats de la cytologie. Il y avait une indépendance dans les résultats de la lecture des deux méthodologies.

Analyse statistique

L’analyse des données a été réalisée à l’aide de procédures de statistiques descriptives et de programme (CDC, Atlanta) Epiinfo version 3.2. Pour identifier l’association entre le type de traitement, le temps écoulé du traitement et de la fréquence de l’infection par HPV, l’analyse Chi-Square a été réalisée par le programme Epiinfo version 3,2. Pour toutes les analyses de données effectuées, les valeurs de p < 0,05 ont été considérées comme statistiquement significatives.

résultats

L’âge moyen de la 122 Les femmes incluses dans l’étude étaient de 34 ± 10 ans (IC95% 17-67). Il était possible d’obtenir des informations sur les caractéristiques socio-économiques, l’histoire obstétricale et le comportement sexuel de 86% de la population à l’étude (105/122 femmes) (tableau 1).

Tableau 1
Caractéristiques socioéconomiques, fond obstétricale et comportement sexuel des femmes traitées par des lésions cervicales intraépithéliales d’utérus.

Au total, 28% ont été observés (34/122) de femmes Traité par SIL positif pour HR-HPV, détecter une infection virale de 20% des femmes ayant une absence de SIL (NSIL) (22/108), 83% des femmes atteintes de LSIL (10/12) et 100% des femmes atteintes de HSIL (2 / 2) (Tableau 2).

Tableau 2
Résultat de HR-HPV par CH II (R) chez les femmes traitées par des blessures irrapithéliales squameuses en fonction du diagnostic cytologique.

doit être noté, qu’aucune différence significative n’a été observée entre les fréquences HR-HPV en fonction du type de traitement, présentant la présence d’infection Viral 27/97 (28%) Les femmes traitées avec des femmes et 7/25 (28%) traitées avec une conduction (p = 0,7).

En ce qui concerne le temps écoulé du traitement, pas une différence significative entre Les fréquences HR-HPV ont été observées chez les femmes qui ont assisté à la détection de l’infection virale jusqu’à 1 an après le traitement (32% de femmes) et de ceux qui ont assisté après année (20%, 9/45 femmes), p = 0,1.

par rapport à la charge virale relative, du total des femmes positives pour HR-HPV était de 29% (10/34) avec des valeurs élevées ou plus. Selon le diagnostic cytologique, ils ont présenté des valeurs de charge virale relatives élevées ou plus 28% des femmes atteintes de NSIL, 30% avec LSIL et 50% avec HSIL. Il convient de noter que chez les femmes atteintes de HSIL, aucune valeur de charge virale relative faible n’a été observée (tableau 3).

Tableau 3
Fréquence des femmes traitées par une écaille intraépithéliale positive Blessures pour HR -HPV par CH II (R) selon les valeurs de charge virale relatives.

Discussion

El Paraguay, est un pays à forte incidence des préjudies – Néoplassiques et cancer du col utérin, compte tenu de ce problème de santé publique. L’étude réalisée présente des résultats préliminaires de la détection HR-HPV par CH II (R) selon le diagnostic cytologique chez les femmes traitées par SIL.

dans le travail actuel, la fréquence des femmes traitées par SIL positif pour HR – HPV (28%) était comparable ou supérieur à ceux détectés au Brésil de 33% (22/67 femmes) et 22% (16/74 femmes); Corée de 18% (44/243 femmes) et Belgique de 29% (21/72 femmes), présentant dans ces études Femmes positives pour HR-HPV une fréquence élevée de 18 à 44% de la récurrence de SIL16,28-30 . Qui suggère que l’exécution de la détection de la section HR-HR-VPH post-traitement pourrait être un outil utile dans le suivi et l’orientation des femmes traitées.

par rapport à la cytologie, 20% des femmes avec Nsil ils étaient positifs pour HR-HPV. Ce manque d’accord entre CH II (R) et la cytologie pourrait être due au fait que la technique de la Chi II (R) permet de détecter la présence virale même en l’absence de blessure6,22. Des études antérieures suggèrent que les femmes atteintes du NSIL et du HR-HR-VPH positif ont un risque plus élevé de développer des blessures cervicales, d’observer Koutsky et al, dont 30% des femmes ayant un diagnostic cytologique normal et positif pour HR-HPV ont élaboré des blessures par intraéptyle au cours de 2 ans. . Il convient de noter que 80% (86/122) des femmes atteintes de NSIL ont présenté des résultats négatifs pour le HR-HPV, qui, compte tenu de la valeur prédictive négative élevée de CH II (R), présentent un risque réduit de développer des lésions de haute qualité14, 16-18.31-35.

Les résultats observés dans les travaux actuels suggèrent que la fréquence du HR-HPV chez les femmes traitées ne varie pas en fonction du type de traitement et du temps écoulé pour effectuer le post-traitement. Contrôle (jusqu’à 2 ans), qui pourrait être dû au fait qu’il existe d’autres facteurs susceptibles d’influencer la persistance de l’infection HR-HPV après traitement.Les études précédentes ont observé que les femmes atteintes de HPV 16, 18, 33 et 45, ainsi que de multiples types de pré-déductions ou de conserves de HPV, ont une fréquence de récurrence ou de récurrence significativement plus élevée d’infection virale après le traitement15,36, 37 .

En ce qui concerne la charge virale relative, les travaux antérieurs suggèrent que les patients présentant une charge virale relative forte et persistante ont un risque accru pour développer HSIL en une courte période même en l’absence de modifications cytologiques détectables38, 39 Conformément aux résultats observés dans cette étude, en ce qui concerne le diagnostic cytologique, l’augmentation de la gravité de SIL a été observée une plus grande fréquence des femmes ayant une charge virale élevée ou très élevée. Il convient de noter que, chez les femmes atteintes de HSIL, n’a pas observé de faibles valeurs de charge virale relatives, ce qui indique ainsi que d’autres tâches que les femmes positives pour le VPH avec une charge virale faible relative ont une probabilité plus faible de développer des blessures à l’aide de HSIL. Par conséquent, les résultats suggèrent que les valeurs de charge virale relatives pourraient contribuer à orienter le contrôle post-traitement des femmes, en identifiant les femmes à un risque de pré-développement de la blessure au cou utérine38.39.

a L’étude actuelle présente certaines limitations, car il n’était pas possible de compléter la taille de l’échantillon de 144 femmes et n’a pas été comptée sur les données de charge virale relatives avant le traitement, les résultats observés suggèrent que l’utilisation du CH II (R) de détection de HR-HPV et la détermination de la charge virale relative de manière complémentaire de cytologie pourraient contribuer à identifier les femmes traitées par des lésions pré-néoplasiques à des risques plus élevés de se développer de récidives. Les données obtenues pourraient contribuer au renforcement du programme national de prévention, de détection et de traitement du cancer du col utérin, du ministère de la santé publique et du bien-être social (MSP et BS), qui vise à améliorer le service dans les unités de santé primaires de la santé ( APS).

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