Revisió bibliogràfica
Les substàncies húmiques com bioestimulants de plantes sota condicions d’estrès ambiental
Humic substances es plants biostimulantsunder environmental stress conditions
Helen Veobides-Amador, Fernando Guridi-Izquierdo, Vladimir Vázquez-Padró
Universitat Agrària de l’Havana (UNAH), Autopista Nacional km 23 ½, Sant Josep de les Lajas, Mayabeque, Cuba
RESUM
Les plantes estan sotmeses freqüentment a situacions desfavorables per al seu desenvolupament i funcionament òptims, ocasionades per alteracions en el medi ambient. Aquest conjunt de situacions desfavorables es coneix amb el nom d’estrès mediambiental. Els bioestimulants constitueixen substàncies, que per la seva acció poden estimular el creixement de la planta, millorar l’absorció de nutrients i incrementar els rendiments en condicions d’estrès ambiental, independentment que continguin elements nutrients en la composició. Hi ha diverses categories de bioestimulants específics, entre ells, els hidrolitzats de proteïnes, extractes d’algues, quitosana, àcids húmics i fúlvics, fongs micorízics i bacteris promotores de l’creixement. L’objectiu d’aquesta revisió és mostrar l’efecte bioestimulante de l’aplicació de substàncies húmiques en plantes, sota condicions d’estrès. També es sintetitzen aspectes relacionats amb les substàncies húmiques com són les seves característiques estructurals i la seva classificació. S’informen resultats emprant substàncies húmiques com bioestimulants, on es comprova el seu potencial per estimular diferents processos metabòlics i fisiològics en condicions d’estrès ambiental. Es conclou que les substàncies húmiques presenten una estructura complexa variable, una multiplicitat de grups funcionals i petites molècules heterogènies que interactuen mitjançant unions febles, la qual cosa fa que exhibeixin una gran varietat de funcions beneficioses entre les que es troba el seu potencial per incrementar els rendiments i atenuar els efectes de estressos abiòtics. Per tant, constitueixen una alternativa viable per evadir les conseqüències de l’canvi climàtic i emprar productes naturals i amigables amb el medi ambient.
Paraules clau: humus, canvi climàtic, efectes fisiològics, estrès abiòtic, rendiment.
ABSTRACT
Plants are frequently subjected to unfavorable situations for their optimal development and operation caused by Alterations in the environment . This set of unfavorable situations is known as environmental stress. Biostimulants are substances that by their action can stimulate the plant growth, improve the absorption of nutrients and increase yields under environmental estrès conditions regardless of whether they contain nutrients in their composition. There are several categories of specific biostimulants, among them protein hydrolysates, algae extracts, chitosan, Humic and fulvic àcids, mycorrhizal fungi and growth promoting bacteri. The objective of this review is to inform the biostimulating effect of the application of Humic Substances in plants under estrès conditions. It also synthesizes aspects related to Humic substances such as their structural characteristics and classification. Results are shown using Humic substances es biostimulants where their potential to stimulate different Metabolic and Physiological processes in abiotic stress conditions is demonstrated. It concludes that Humic substances present a complex structure, a multiplicity of functional groups and small molecules that interact by weak junctions, which makes them exhibit a great variety of beneficial functions among which is their potential to increase the yields and attenuate the effects of abiotic stresses . Therefore they s l a viable alternative to avoid the consequences of climate change and use natural and environmentally friendly products.
Key words: humus, climate change, Physiological effects, abiotic stress , yield.
INTRODUCCIÓ
Les plantes estan sotmeses, freqüentment, a situacions desfavorables per al seu desenvolupament i funcionament òptims, ocasionades per alteracions en el medi ambient. Aquest conjunt de situacions desfavorables es coneix amb el nom d’estrès mediambiental (1).
Els factors externs a la planta que constitueixen condicions d’estrès poden ser de dos tipus: biòtics i abiòtics (físics, químics i fisicoquímics. Els abiòtics cobreixen una àmplia gamma de factors ambientals, entre els quals es troben: la temperatura, l’aigua, les radiacions, les substàncies químiques i altres. els estressos abiòtics són la principal causa de pèrdues de cultius en el món i causen disminució en el rendiment de més de l’50 % de la majoria dels cultius (2).
Per elevar la productivitat agrícola és necessari augmentar la recerca de conreessis que es desenvolupin amb major tolerància als estressos abiòtics ( 3). les aportacions científics realitzats en aquest sentit, fins fa poc, estaven encaminats a adaptar el medi ambient per a un millor desenvolupament de les plantes, aplicant una gran quantitat de productes químics, com herbicides i insecticides, esgotant els recursos aigua i nutrients neces saris perquè la planta toleri les condicions estressants.
Actualment, però, hi ha una nova concepció que és adaptar la planta a aquest medi ambient canviant, sense esgotar els recursos o emprar productes químic-sintètics, només aconseguint una major eficiència en l’ús d’aquests recursos i una major producció, amb l’ocupació de les mateixes estratègies que potser van contribuir a la supervivència d’aquests éssers vius durant la seva evolució en condicions encara més estressants.
Entre els productes que s’han emprat per combatre els efectes de estressos i elevar els rendiments de les plantes, es troben els productes Bioestimulants (4). Aquestes substàncies i materials, quan s’apliquen a les plantes o mitjans de cultiu, han demostrat potencial per modificar la fisiologia de les plantes, promoure el seu creixement i millorar la seva resposta a l’estrès; la seva acció es distingeix de la de nutrients i pesticides (5).
La definició de bioestimulants inclou a materials orgànics i microorganismes que són aplicats als cultius per millorar l’absorció de nutrients, estimular el creixement, millorar la tolerància a l’estrès i la qualitat dels mateixos (5). D’acord a aquest autor existeixen diverses categories de bioestimulants específics, entre ells, els hidrolitzats de proteïnes (6), extractes d’algues (7), quitosana (8), àcids húmics i fúlvics (9), fongs micorízics (10) i bacteris promotores de el creixement (11). Els bioestimulants es classifiquen en tres grans grups d’acord amb la font i el contingut. Les substàncies húmiques han estat reconegudes per la seva acció bioestimulant, aquestes constitueixen un dels tres grups, en què, a més, figuren els diferents productes, contenint hormones i aquells que presenten aminoàcids en la seva formulació (4).
Les substàncies húmiques tenen impacte directe en la fisiologia de la planta. Per efectes directes s’entén que no estan intervingudes per característiques de terra o disponibilitat de nutrients, però involucren la regulació de l’activitat cel·lular, canvis metabòlics, alteren l’expressió de gens i tenen acció hormonal (5).
l’objectiu d’aquesta revisió és mostrar l’efecte bioestimulante de l’aplicació de substàncies húmiques en plantes en condicions d’estrès abiòtic.
També es sintetitzen aspectes, com ara les característiques estructurals i classificació de les substàncies húmiques. Es mostren resultats emprant bioestimulants a força de substàncies húmiques, on es comprova el seu potencial per estimular diferents processos metabòlics i fisiològics en condicions d’estrès.
Substàncies húmiques
Les substàncies húmiques, (SH), es defineixen com els més àmpliament distribuïts productes orgànics de biosíntesi a la superfície de la terra (12), que excedeixen la quantitat de carboni contingut en tots els organismes vius per aproximadament un ordre de magnitud (13). Pel que fa a l’origen i formació de les substàncies húmiques es planteja que aquests materials orgànics són resultants de reaccions concertades de diversos processos biòtics i abiòtics (14), que resulten de la descomposició dels residus vegetals, animals i de microbis però també provenen de l’activitat metabòlica dels microorganismes de terra usant aquests substrats (5).
Les SH constitueixen més de l’80% de la matèria orgànica de terra (MOS) (15), tot i que poden estar presents en ambients aquàtics i en l’atmosfera (16). Aquestes poden trobar-se, en diverses concentracions, en diferents fonts com ara: rius, llacs, oceans, materials orgànics, minerals com la leonardita, sediments, entre d’altres (17).
Com que representen el major component de la barreja de materials que comprèn la MOS (14) resulta de gran importància l’estudi de la seva estructura i propietats i com aquestes contribueixen a la fertilitat de terra, actuant en les propietats físiques, fisicoquímiques, químiques i biològiques de terra (5). Tot i que la elucidació estructural d’aquestes substàncies, donades les seves característiques, resulta encara bastant complexa, s’han realitzat investigacions al llarg de la història en la recerca d’un model estructural que estigui en correspondència amb les característiques de les SH (18).
estructura i classificació
Hi ha diverses concepcions sobre l’estructura de les SH, entre aquestes concepcions la més acceptada és que constitueixen macromolècules d’un polielectròlit que tenen una conformació variable, en dependència de les condicions de la solució de terra (pH, força iònica). És a dir, constitueixen col·loides orgànics que presenten massa molecular, densitat de càrrega elèctrica i acidesa. Aquest model permet explicar les principals interaccions de les SH, com ara: la interacció amb minerals de terra, la capacitat d’adsorció i complexació d’ions; és a dir, reaccions d’interès agronòmic-productiu.
En altres models es planteja que les SH són posseïdores d’estructura micel·lar, amb una part hidrofòbica i una part hidrofílica (18 ). Actualment s’accepta que l’humus constitueix un conjunt format per associacions supramoleculars de molècules orgàniques, relativament petites i heterogènies (9), acoblades bàsicament per interaccions febles (9,19). El fraccionament molecular seqüencial d’aquesta estructura supramolecular es basa en les forces d’enllaços de les substàncies orgàniques en la matriu húmica (20).
S’accepta que hi ha tres fraccions dins de les substàncies húmiques que es classifiquen d’acord al seu solubilitat en funció de l’pH: humina (H), àcid húmic (AH) i àcid fúlvic (AF); on la humina constitueix la fracció insoluble en aigua a qualsevol valor de pH, els àcids húmics són solubles en medi bàsic i insoluble en medi francament àcid, mentre que els àcids fúlvics, són la fracció soluble a qualsevol valor de pH (21).
a la llum d’estudis més moderns es redefineixen els àcids fúlvics com resultants d’associacions de molècules hidrofíliques petites, en les quals hi ha suficients grups funcionals per mantenir l’agregat fúlvic dispers en solució a qualsevol valor de pH, mentre els àcids húmics estan formats d’associacions de compostos predominantment hidrofòbics (àcids grassos, compostos esteroidals, cadenes de grups metilenos), les que estan estabilitzades a pH neutre per forces dispersives hidrofòbiques. Aquestes conformacions creixen en grandària quan augmenten els ponts d’hidrogen intermoleculars a baixos valors de pH, la qual cosa fa que aquests materials húmics floculen (22).
Encara que l’elucidació estructural d’aquestes substàncies, donades les seves característiques, resulta encara força complexa ja que està influenciada en bona mesura per la seva font d’origen, s’ha aconseguit trobar informació quantitativa i qualitativa sobre els grups funcionals presents en els AH i AF (23). Segons els estudis espectroscòpics, les SH generalment presenten estructures aromàtiques (benzens i fenols polisustituídos), així com -OH fenòlics i d’alcohols, -COOH d’àcids carboxílics, èsters, quinones, entre d’altres (21).
en l’actualitat es discuteix que aquestes substàncies estructuralment posseeixen un domini hidrofòbic i un altre hidrofílic i una determinada relació entre tots dos és la causant dels efectes biològics d’estimulació trobats a les plantes ja enunciats per diferents autors ( 24,25). S’han presentat, evidències experimentals (26) mostrant que la hidrofobicitat i la quantitat de grups funcionals àcids d’AH són necessaris en l’estimulació de la bioactivitat d’aquestes substàncies. D’acord als estudis introduïts en “Humeomics” (20,27), les SH presenten una organització estructural supramolecular amb estructures hidrofòbiques grans i altres hidrofíliques petites. Les fraccions hidrofòbiques són bàsicament compostes de fraccions húmiques de cadenes lineals alifàtiques i anells aromàtics condensats, mentre les fraccions hidrofíliques són compostes de fraccions húmiques irregulars.
Es conclou que l’ordenament supramolecular estructural de SH és el resultat de molècules húmiques heterogènies de relació no-uniforme que interactuen en funció de la seva talla, forma, afinitat química i hidrofobicitat (20).
Entre les tècniques fisicoquímiques per a l’estudi de les característiques estructurals de SH de diferents fonts d’origen s’han emprat la Espectroscòpia Infraroja per transformada de Fourier (FT-IR ), Espectroscòpia (UV-vis) i Ressonància Magnètica Nuclear de carboni-13 (13C-NMR) i Cromatografia. Aquestes tècniques són encara més poderoses quan es troben acoblades entre si o a altres mètodes com la cromatografia líquida d’alta eficàcia (HPLC) i a piròlisi (Py) (28). A través d’aquestes tècniques s’ha pogut verificar que SH d’aigües residuals presenten caràcter alifàtic, amb estructures que pertanyen a proteïnes i polisacàrids i una elevada presència de grups funcionals d’àcids i elevada aromaticitat (29).
la variabilitat de l’estructura de SH durant el vermicompostatge ha estat estudiada. En aquests estudis van ser identificats més de 300 compostos, principalment els derivats de lignines, de carbohidrats, de proteïnes, alcohols i àcids grassos, compostos terpènics i hidrocarburs, les abundàncies relatives varien d’acord amb l’avanç de l’estabilització de la matèria orgànica (29 ).
Acció bioestimulante de les substàncies húmiques
Els efectes indirectes de les SH en les plantes inclouen la millora de les característiques químiques, fisicoquímiques i biològiques de terra, a través d’augment en la retenció d’aigua i nutrients, influència en la diversitat de microorganismes benèfics i la formació de complexos amb ions, principalment micronutrients com el Fe i Zn. Aquests efectes són àmpliament acceptats com a contribuents a la fertilitat de terra i els mecanismes de l’acció indirecta dilucidados i àmpliament acceptats.
Els efectes bioestimulants de les SH sobre el creixement i desenvolupament de les plantes han estat extensament estudiats, trobant increment en la longitud d’la tija, arrel, fulles, massa fresca i seca, grandària i qualitat dels fruits; així com l’augment dels rendiments en les collites (30). La promoció de l’creixement de plantes per SH, definida aquí com bioestimulació, està ben documentada en la literatura (15,31-33). En suport d’això, un estudi previ va mostrar que la massa seca de brots i arrels de plantes herbàcies, es va incrementar prop d’un 22% en resposta a l’aplicació exògena de SH (34).
El Grup d’Investigacions de Matèria Orgànica i Bioestimulants (MOBI) de el Departament de Química de la Universitat Agrària de l’Havana, ha obtingut un nou extracte aquós de SH a partir de vermicompost de fem boví (35). La bioestimulació de diferents dosis de l’extracte de vermicompost s’ha comprovat en cultius d’interès agronòmic com blat de moro (Zea mays L.) (36), enciam (Lactuca sativa L.) (37), tomàquet (Solanum lycopersicum L.) (38) i fesol (Phaseolus vulgaris L.) (39). L’aplicació foliar d’aquests extractes en plantes de tomàquet (40) va promoure el desenvolupament biològic de les plantes, així com la productivitat agrícola en indicadors com la massa de l’fruit i el rendiment durant dos anys consecutius. La caracterització físic química d’aquests extractes ha mostrat la presència de substàncies húmiques com àcids húmics i fúlvics, fitohormones, microorganismes benèfics, aminoàcids, i elements essencials (21) que poguessin contribuir en la seva acció bioestimulant, no només centrada en la presència de substàncies húmiques .
Entre els processos metabòlics que contribueixen a promoure el creixement i desenvolupament de les plantes es troba l’estimulació de l’activitat d’enzims clau en el metabolisme de l’C i N per les SH. Enzims relacionats amb el metabolisme de l’nitrogen com la nitrat reductasa, glutamat deshidrogenasa i glutamina sintetasa van ser estimulades per SH en diferents condicions experimentals (19,41). Va ser descrit l’efecte positiu d’AH a diferents dosis en les principals enzims involucrats en la reducció i assimilació de nitrogen inorgànic (41).
Una altra dels enzims l’activitat és incrementada per les SH és la H + -ATPasa de la membrana plasmàtica (42,43), també anomenada bomba de protons per estar involucrada en el transport primari d’aquests ions, estimulant un gradient que proporciona energia per el transport d’altres ions i que contribueix amb el elongamiento cel·lular.
l’estimulació d’aquest enzim en les arrels es va relacionar amb la promoció en el transport secundari de ions i l’absorció de nutrients (19). En altres investigacions es comprova que la modificació en el desenvolupament de sistema radical, la seva arquitectura i l’emergència d’arrels laterals (15) augmenta l’eficiència en l’absorció de nutrients i la seva utilització per les plantes.
En resum, els efectes de SH sobre el creixement i desenvolupament de les plantes, assenyalen la influència positiva sobre el transport de ions facilitant l’absorció, l’acció directa sobre processos metabòlics com ara: respiració, fotosíntesi i síntesi de proteïnes, mitjançant l’augment o disminució de l’activitat de diversos enzims, el contingut de metabòlits i l’activitat tipus hormonal d’aquestes substàncies (44,45).
Aquestes clares modificacions en el metabolisme primari induïdes per les SH han estat confirmades mitjançant tècniques de biologia molecular (46), la qual cosa demostra que les substàncies húmiques exerceixen els seus efectes en la fisiologia de la planta per mitjà de complexes xarxes transcripcionals i mecanismes d’acció de múltiples facetes, parcialment connectats a la seva comprovada activitat auxínica però involucrant vies independents de l’àcid indolacètic (IAA) (47). Aquests mecanismes segueixen sent àmpliament estudiats i discutits.
Efecte bioestimulant en condicions d’estrès abiòtic
A més de l’ paper de les SH com reguladors de l’metabolisme primari i secundari, es discuteix la possibilitat d’usar aquestes substàncies per mitigar els efectes de diferents estressos abiòtics com l’estrès hídric, salí i per altes concentracions de metalls pesats. Aquests estressos indueixen la producció d’espècies reactives d’oxigen (ERO) que conseqüentment causen un estrès oxidatiu, cosa que resulta en serioses pèrdues de l’rendiment en cultius (48). En fesol comú l’aplicació d’àcids húmics sota condicions d’elevada salinitat (120 mM NaCl) va incrementar els nivells de prolina endògens i va reduir el trencament de la membrana, els quals constitueixen indicadors d’adaptació a un ambient salí (9).
Es va realitzar un experiment amb l’aplicació foliar de substàncies húmiques en el cultiu de la tomata (Solanum lycopersicum L.) que va ser cultivat en un sòl amb nivells naturals de salinitat. Les plantes que van rebre les aplicacions foliars de SH van mostrar una millora en les condicions i qualitat interna de l’fruit (49,50).
S’ha provat l’eficiència de humats de vermicompost com atenuants de l’efecte de la salinitat en l’emergència i creixement d’alfàbrega (alfàbrega L.) utilitzant dues varietats d’alfàbrega (Napoletano i Sweet Genovese). Es va mesurar el percentatge i taxa d’emergència, longitud d’radícula, alçada de plàntula, biomassa fresca i seca de radícula i de part aèria. L’ús d’humats estimular totes les variables en condicions de salinitat, destacant la varietat Napoletano amb aplicació de l’bioestimulante com el tractament amb millors resultats, permetent que la varietat tolerant millori la seva emergència i creixement i la varietat sensible incrementi la seva tolerància a l’estrès salí (51 ).
En arròs (Oryza sativa L.) es va comprovar que els AH aplicats a les arrels subjectes a estrès hídric van incrementar l’activitat de la peroxidasa (POX), el contingut de prolina i van reduir el contingut de H2O2 (52). Recentment va ser reportat l’estímul de diversos mecanismes enzimàtics associats als sistemes de defensa antioxidant, així com els gens per a les aquaporines que són proteïnes associades amb el transport d’aigua i H2O2.
En plantes d’arròs sotmeses a estrès hídric i tractades via radicular amb solució nutritiva d’AH es van reportar modificacions en fulles i arrels en l’expressió de aquaporines, la qual cosa es va traduir en una major permeabilitat de la membrana de les arrels, atribuint a aquestes substàncies un efecte protector davant l’estrès hídric (53). Les aquaporines són conegudes com les principals proteïnes intrínseques (MIPs) que regulen el flux d’aigua transmembrana i l’activitat està regulada per vies dependents i independents d’àcid abscísic (ABA) (53).
L’aplicació d’AH a plantes de blat de moro va exercir un efecte en la producció d’ERO i va incrementar l’activitat de catalasa (CAT) (54). La importància de la defensa antioxidant enzimàtica i no enzimàtica ha estat demostrada en condicions d’estrès hídric (55). La defensa enzimàtica és també estimulada per la presència de SH. Els nivells de superòxid dismutasa (SOD) i ascorbat peroxidasa (APX) van millorar amb l’aplicació d’un bioestimulante basat en SH i aminoàcids, tot i que aquesta millora en el sistema antioxidant no va ser capaç d’incrementar la tolerància de plantes de soja (Glycine max L. ) i blat de moro (Zea mays L.) sota condicions d’estrès hídric (55).
L’aplicació foliar dels mateixos compostos a plantes de fesol comú (Phaseolus vulgaris L.) crescudes en sòls amb alt contingut de metalls pesants va demostrar efectes protectors, intervinguts per la activació de mecanismes de defensa antioxidativa (56).L’activitat de la 1 pirrolin-5-carboxilat reductasa (P5CR) i la fenilalanina amonioliasa (PAL) va ser estimulada, resultant en increments en el contingut de prolina i compostos fenòlics (56). Àcids húmics d’elevada massa molecular van exercir efectes en el metabolisme secundari, associat amb la síntesi de fenols (57).
Tot i que el mecanisme que explica la relació entre les ERO i auxines en regular la resposta antiestrès encara no està ben aclarit (58) es coneix que compostos com l’òxid nítric, (NO) posseeixen un paper intermediari en l’acció de les SH en plantes el qual, a més, té propietats antioxidants i actua com una molècula de senyalització en la síntesi d’enzims relacionats a la catàlisi de l’ERO. Aquesta molècula intervé en la resistència de plantes a estressos abiòtics. En plantes de blat de moro tractades amb àcids húmics de vermicompost es va reportar una estimulació en la biosíntesi de (NO), el qual es planteja pot actuar com a missatger en estadis primerencs de el desenvolupament de l’arrel (59).
Estudis futurs podrien dedicar-se a investigar els efectes protectors d’extractes de vermicompost rics en àcids húmics en plantes, aplicats per via foliar o al medi de cultiu, donada la provada acció dels àcids húmics en condicions d’estrès i els efectes bioestimulants dels extractes de vermicompost, contenint substàncies orgàniques i naturalment enriquits per substàncies húmiques.
CONCLUSIONS
-
es conclou que les substàncies húmiques es caracteritzen per presentar una estructura complexa, variable i una multiplicitat de grups funcionals i petites molècules heterogènies que interactuen mitjançant unions febles, la qual cosa fa que exhibeixin una gran varietat de funcions beneficioses, entre les que es troba el seu potencial per incrementar els rendiments i atenuar els efectes de estressos mediambientals i les fonts de origen es troben en la matèria orgànica de terra, en minerals com la leonardita i residus orgànics de diversos orígens, després d’un procés de transformació per la flora microbiana.
-
Encara que la seva manera d’acció segueix sent un dels aspectes més debatuts, s’han realitzat estudis en relació a la seva estructura, les seves propietats i la seva funció, que han permès establir possibles mecanismes com l’activitat like-auxine per explicar els efectes bioestimulants. Això, a més, de la significativa acció sobre el metabolisme secundari amb l’estimulació de compostos antioxidants, permet concloure que les substàncies húmiques i la gran varietat de productes que les contenen, podrien ser una alternativa viable per evadir les conseqüències de l’canvi climàtic i emprar productes naturals i amigables amb el medi ambient.
BIBLIOGRAFIA
1. Moreno LJ. Resposta de plantes in vitro de banana cv.’Grande naine ‘(Musa AAA) transformades amb el gen de osmotina ap24 a l’estrès hídric. : Universitat Central “Marta Abreu” de les Viles; 2015. 100 p.
2. Bray I, Bailey-Serres J, Weretilnyk E. Response to abiotic stress. in: Gruissem W, Jones R, editors. Biochemistry and molecular biology of plants. American Society of Plant Physiologists, Rockville; 2000. p. 1158-203.
3 . Pimentel C. Respostas dónes plantes à seca. In: Pimentel C, editor. a Relação dóna planta com a água. Brasil: Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro; 2004. p. 119-41.
4. Van Oosten MJ, Pepe O, De Pascale S, Silletti S, Maggio A. El rol dels biostimulants and bioeffectors es alleviators of abiotic stress in crop plants. Chemical and Biological Technologies in Agriculture. 2017; 4 (5): 1-12. doi: 10.1186 / s40538-017-0089-5
5. du Jardin P. Plant biostimulants: definition, concept , main categories and regulation. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 3-14. doi: 10.1016 / j.scienta.2015.09.021
6. Colla G, Nardi S, Cardarelli M, Ertani A, Lucini L, Canaguier R, et al. Protein hydrolysates es biostimulants in horticulture. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 28-38. doi: 10.1016 / j.scienta.2015.08.037
7. Battacharyya D, Babgohari MZ, Rathor P, Prithiviraj B. Seaweed extracts es biostimulants in horticulture. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 39-48. doi: 10.1016 / j.scienta.2015.09.012
8. Pichyangkura R, Chadchawan S. Biostimulant activity of chitosan in horticulture. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 49-65. doi: 10.1016 / j.scienta.2015.09.031
9. Canellas LP, Olivares FL, Aguiar NO, Jones DL, Nebbioso A, Mazzei P, et al.Àcids húmics i fulvics com a biostimulants en horticultura. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 15-27. DOI: 10.1016 / J.SCIENTA.2015.09.013
10. Rouphael y, franken p, schneider c, schwarz d, giovannetti m, agnolucci m, et al. Els fongs micorrizals arbusculars actuen com a biostimulants en cultius hortícoles. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 91-108. DOI: 10.1016 / J.SCIENTA.2015.09.002
11. Ruzzi M, Aroca R. La promoció de la planta de creixement de la planta actua com a biostimulants en horticultura. Scientia Horticulturae. 2015; 196: 124-34. DOI: 10.1016 / J.SCIENTA.2015.08.042
12. Tan KH. Química coloidal dels constituents de sòls ecològics. A: Tan KH, editor. Principis de la química del sòl, Marcel Dekker, Nova York. Tercera edició. Marcel Dekker, Nova York: Premsa CRC; 1998. p. 177-258.
13. Steinberg CE, Paul A, Pfugmacher S, Meinelt T, Klöcking R, Wiegand C. Les substàncies húmiques pures tenen el potencial d’actuar com a productes químics xenobiòtics: una revisió. Butlletí ambiental de Fresenius. 2003; 12 (5): 391-401.
14. Nardi S, Pizzeghello d, Schiavon M, Ertani A. Bioestimulants vegetals: respostes fisiològiques induïdes per productes basats en proteïnes hidrolitzats i substàncies húmiques en metabolisme de plantes. Scientia Agricola. 2016; 73 (1): 18-23. DOI: 10.1590 / 0103-9016-2015-0006
15. Canellas LP, Olivares Fl. Respostes fisiològiques a substàncies húmiques com a promotors de creixement de plantes. Tecnologies químiques i biològiques en l’agricultura. 2014; 1 (1): 3. DOI: 10.1186 / 2196-5641-1-3
16. Graber Er, Rudich Y. Hulis atmosfèric: com són els humits? Una revisió integral i crítica. Química atmosfèrica i física. 2006; 6 (3): 729-53. DOI: 10.5194 / ACP-6-729-2006
17. Fujitake N, Yanagi Y. Relació entre la bipostabAbilitat i les propietats químiques de les substàncies húmiques del sòl. Geochimica et cosmochimica Acta suplement. 2003; 67 (18): 112.
18. Canellas LP, Xavier Velloso AC, d’Araújo Santos G. Modelos Estruturais de Substitucions Húmicas. A: Canel·les LP, d’Araújo Santos G, editors. HUMOSFERA: TRATAT PRELIMINAR SOBRE A QUÍMICA DAS Substâncias Húmicas. Seropédica e Campos Dos Goytacazes: UENF; 2005. p. 34-53.
19. Piccolo A. La naturalesa de la matèria orgànica del sòl i les gestions innovadores del sòl per combatre els canvis globals i mantenir la productivitat agrícola. A: Piccolo A, editor. Seqüestre de carboni en sòls agrícoles. Heidleberg, Alemanya: Springer; 2012. p. 1-19.
20. Nebbioso A, Piccolo A. Avanços en humeòmica: identificació estructural millorada de molècules húmiques després de la grandària de fraccionament d’un àcid humic del sòl. Analítica Chimica Acta. 2012; 720: 77-90. DOI: 10.1016 / J.ACA.2012.01.027
21. Caro I. Caracterització de Algunos Parámetros Químico-Físicos del Lígat, humus líquido obtenido a Partir del Vermicompost d’Estiércol Vacuno. : Universitat Agrària de la Habana; 2004. 91 p.
22. Piccolo A. L’estructura supramolecular de les substàncies húmiques: una nova comprensió de la química humus i les implicacions en la ciència del sòl. Avanços en Agronomia. 2002; 75: 57-134. DOI: 10.1016 / S0065-2113 (02) 75003-7
23. Chang Chien S-W, Chun-Chia H, min-Chao W. Característiques analítiques i espectroscòpiques de les substàncies húmiques derivades de compost de rebuigs. International Journal of Applied Science and Engineering. 2003; 1 (1): 62-71.
24. Piccolo A. L’estructura supramolecular de les substàncies húmiques. Ciència del sòl. 2001; 166 (11): 810-32.
25. Canellas LP, Piccolo A, Dobbss LB, Spaccini R, Olivares Fl, Zandonadi DB, et al. Composició química i propietats de bioactivitat de les fraccions de mida separades d’un àcid humic vermicompost. Chemosfera. 2010; 78 (4): 457-66. DOI: 10.1016 / J.Chemosphere.2009.10.018
26. Durand C, Ruban V, AMBLÈS A. Caracterització de la matèria orgànica complexa present en sediments contaminats dels estanys de retenció d’aigua. Revista de piròlisi analítica i aplicada. 2005; 73 (1): 17-28. DOI: 10.1016 / J.JAAP.2004.09.001
27. Calderín A, Guridi F, Berbara Rll. Efectes dels materials húmics sobre metabolisme de plantes i productivitat agrícola. A: Ahmad P, Rasool S, editors. Tecnologies emergents i gestió de la tolerància a l’estrès de cultius. Elsevier; 2014. p. 449-66. DOI: 10.1016 / B978-0-12-800876-8.00018-7
28. Aguiar No, Olivares Fl, Novotny EH, Dobbss LB, Balmori DM, Santos-Júnior LG, et al. Bioactivitat dels àcids húmics aïllats de vermicomposts en diferents etapes de maduració. Planta i sòl. 2013; 362 (1/2): 161-74. DOI: 10.1007 / S11104-012-1277-5
29. Martínez Balmori D. Caracteritzação Molecular Da Matéria Orgânica Durant un vermicompostagem.: Universidade Estadual do Norte Fluminense Darcy Ribeiro, Centro de Ciências e Tecnologies Agropecuárias; 2012. 112 p. Disponible a partir de: http://www.uenf.br/Uenf / descàrregues / prodvegetal _3434_1344947740.pdf
30. Trevisan S, Frantioso O, Quaggiotti S, Nardi S. Substàncies Humic Activitat biològica a la interfície de sòl-sòl: dels aspectes ambientals a factors moleculars. Senyalització de plantes & comportament. 2010; 5 (6): 635-43. DOI: 10.4161 / PSB.5.6.11211
31. Nardi S, Pizzeghello d, Muscolo A, Vianello A. Efectes fisiològics de les substàncies húmiques a les plantes superiors. Biologia del sòl i bioquímica. 2002; 34 (11): 1527-36. DOI: 10.1016 / S0038-0717 (02) 00174-8
32. Chen Y, CLAPP CE, Magen H. Mecanismes d’estimulació de creixement de les plantes per substàncies húmiques: el paper dels complexos de ferro organitzador. Ciència del sòl i nutrició vegetal. 2004; 50 (7): 1089-95. DOI: 10.1080 / 00380768.2004.10408579
33. Nardi S, Carletti P, Pizzeghello d, Muscolo A. Activitats biològiques de substàncies húmiques. A: Senesi N, Xing B, Huang PM, editors. Processos biofísico-químics que impliquen matèria orgànica natural no viva en sistemes ambientals. Hoboken, NJ, EUA: John Wiley & SONS, INC.; 2009. p. 305-39. DOI: 10.1002 / 9780470494950.CH8
34. Rosa Mt, Patti AF, Little Kr, Brown Al, Jackson W, Cavagnaro TR. Una meta-anàlisi i revisió de la resposta de creixement de les plantes a substàncies húmiques: implicacions pràctiques per a l’agricultura. A: Sparks D, editor. Avanços en Agronomia. 1a edició. Premsa acadèmica; 2014. p. 37-89. Disponible a partir de: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/B9780128001387000024
35. Hernández O. Modificaciones al Proceso d’Extracció de Sustancias Húmicas. Efectes biològics. . : Universitat Agrària de la Habana; 2010. 78 p.
36. Calderín A, Pimentel J, Martínez d, Huelva R, Guridi F. Efectusos No Cultivo Do Milho de UM Extrato Líquido Humificat Residual, obtido a Partir de Vermicomposto. Revista Ciencias Técnicas Agropecuarias. 2016; 25 (1): 38-43.
37. Hernández Ol, Calderín A, Huelva R, Martínez D, Guridi F, Aguiar No, et al. Les substàncies húmiques de la vermicompost milloren la producció d’enciam urbà. Agronomia per al desenvolupament sostenible. 2015; 35 (1): 225-32. DOI: 10.1007 / S13593-014-0221-X
38. Arteaga m, Garcés N, Guridi F, Pino JA, López A, Menéndez JL, et al. Avaluació de les aplicacions foliares de humus líquid en el cultiu del tomàquet (licopersicon esculentum molí) var. Amalia en condicicions de producció. Cultius tropicals. 2006; 27 (3): 95-101.
39. Hernández G, Hernández O, Guridi F, Arbelo N. Influència de la SIEMBRA Directa i les aplicaciones foliares de extracte Líquido de Vermicompost en el Crecimiento i Rendimiento del Frijol (Phaseolus vulgaris L.) CV. CC-25-9. Revista Ciencias Técnicas Agropecuarias. 2012; 21 (2): 86-90.
40. Arteaga M. Lipllant: Alternativa para La Producció Ecológica del Tomate (Solanum Lycopersicum linneo) y la conservación del medió edáfico. : Universitat Agrària de la Habana; 2013. 137 p.
41. Vaccaro S, Ertani A, Nebbioso A, Muscolo A, Quaggiotti S, Piccolo A, et al. Les substàncies húmiques estimulen l’assimilació de nitrogen de blat de moro i el metabolisme d’aminoàcids a nivell fisiològic i molecular. Tecnologies químiques i biològiques en l’agricultura. 2015; 2 (1): 5. DOI: 10.1186 / S40538-015-0033-5
42. Huelva R, Martínez d, Calderín A, Hernández Ol, Guridi F. Propiedades Químicas i Química-Físicas de Derivados Estructurals d’Ácidos Húmicos Obtenidos de Vermicompost. Activitat biològica. Revista Ciencias Técnicas Agropecuarias. 2013; 22 (2): 56-60.
43. Efecte quaggiotti S. de baixa mida molecular Substàncies húmiques sobre captació de nitrats i expressió de gens implicats en el transport de nitrat en blat de moro (Zea Mays L.). Journal of Experimental Botànica. 2004; 55 (398): 803-13. DOI: 10.1093 / JXB / ERH085
44. Hernández Ol, Huelva R, Guridi F, Olivares Fl, Canel·les LP. Humates aïllats de Vermicompost com a promotor de creixement en la producció d’enciam orgànics. Revista Ciencias Técnicas Agropecuarias. 2013; 22 (1): 70-5.
45. Canellas LP, Martínez d, Oliveira L, Oliveira N, Campostrini E, Rosa RCC, et al. Una combinació de substàncies húmiques i la inoculació de Herbaspirox Seropedicae millora el creixement del blat de moro (Zea Mays L.). Planta i sòl. 2013; 366 (1-2): 119-32. DOI: 10.1007 / S11104-012-1382-5
46. Jannin L, Arkoun M, Our A, Laîné P, Goux D, Garnica M, et al. Anàlisi de microarrays d’efectes d’àcids húmics sobre el creixement de Brassica Napus: implicació de metabolismes N, C i S. Planta i sòl. 2012; 359 (1-2): 297-319. DOI: 10.1007 / S11104-012-1191-X
47.Trevisan S, Botton A, Vaccaro S, Vezzaro A, Quaggiotti S, Nardi S. Substàncies Humic afecten l’Arabidopsis Fisiologia alterant l’expressió de gens implicats en el metabolisme primari, el creixement i el desenvolupament. Botànica ambiental i experimental. 2011; 74: 45-55. DOI: 10.1016 / J.ENVEXPBOT.2011.04.017
48. Calderín A, Guridi F, Hernández Ol, Díaz mm, Huelva R, Mesa S, et al. Biotecnologia de materials humits obtinguts de vermicomposts per a fins agroecològics sostenibles. Diari africà de biotecnologia. 2013; 12 (7): 625-34. DOI: 10.5897 / AJBX12.014
49. Reyes JJ, Guridi F, Reynaldo im, Ruisánchez y, Larrinaga Ja, Murillo B, et al. EFECTOS DEL HUMU LÍQUIDO SOBRE ALGUNOS PARÁMETROS DE CALIDAD INTERNA EN FRUTOS DE TOMAT CULTIVADOS EN CONDICIONS DE ESTRÉS SALINO. Revista Centro Agrícola. 2011; 38 (3): 57-61.
50. Berbara Rll, García AC. Substàncies humiques i metabolisme de defensa vegetal. A: Ahmad P, Wani M, editors. Mecanismes fisiològics i estratègies d’adaptació en plantes sota l’entorn canviant. Springer, Nova York, NY; 2014. p. 297-319. DOI: 10.1007 / 978-1-4614-8591-9_11
51. Reyes JJ, Murillo B, Nieto A, Troyo E, Reynaldo IM, Rueda Eo, et al. HUMATOS DE VERMICOMPOST COMO MITIGADOR DE LA SALINIDAD EN ALBAHACA (OCUMIT BASILICUM L.). Revista de la Facultat de Ciències Agrarias. Universitat Nacional de Cuyo. 2014; 46 (2): 149-62.
52. Calderín A. Àcids humics de vermicompost com a via ecològica per augmentar la resistència de les plàntules d’arròs a l’estrès hídric. Diari africà de biotecnologia. 2012; 11 (13). DOI: 10.5897 / AJB11.1960
53. Calderín A, Azevedo L, Guridi F, Loss MV, Castro RN, Berbara RLL. Vermicompos húmic àcids com a via ecològica per protegir la planta d’arròs contra l’estrès oxidatiu. Enginyeria ecològica. 2012; 47: 203-8. DOI: 10.1016 / J.ECOLENG.2012.06.011
54. Cordeiro FC, Santa-Catarina C, Silveira V, de Souza Sr. Efecte d’àcid humic sobre l’activitat de la catalasa i la generació d’espècies reactives d’oxigen en blat de moro (Zea Mays). Biociències, biotecnologia i bioquímica. 2011; 75 (1): 70-4. DOI: 10.1271 / BBB.100553
55. De Vasconcelos ACF, Zhang X, Ervin EH, Kiehl J de C. Respostes antioxidants enzimàtiques a biostimulants en blat de moro i soja sotmesa a la sequera. Scientia Agricola. 2009; 66 (3): 395-402. DOI: 10.1590 / S0103-90162009000300015
56. Portuondo L. Avaluació estructural i funcional d’àcids húmics en interacció amb metalls tòxics en un cultivar d’interès agrícola. Revista de Ciencias Técnicas Agropecuarias. 2017; 26 (3): 39-46.
57. Schiavon M, Pizzeghello d, Muscolo A, Vaccaro S, Francioso O, Nardi S. Alts Substàncies Humiques Moleculars Millorar el metabolisme fenilpropanoide en blat de moro (Zea Mays L.). Revista d’Ecologia Química. 2010; 36 (6): 662-9. DOI: 10.1007 / S10886-010-9790-6
58. Tognetti VB, Mühlenbock P, Van Breausegem F. HomeStasis de l’estrès – La perspectiva Redox i Auxin: Homeostasi. Planta, cel·la & Medi ambient. 2012; 35 (2): 321-33. DOI: 10.1111 / J.1365-3040.2011.02324.x
59. Zandonadi DB, Santos MP, Dobbss LB, Olivares FL, Canel·les LP, Binzel ML, et al. L’òxid nítric media el desenvolupament d’arrels d’arrels i l’activació de la membrana de plasma H +–rosca. Planta. 2010; 231 (5): 1025-36. DOI: 10.1007 / S00425-010-1106-0