el cost social i econòmic de l’accident cerebrovascular (CVA) està contínuament en augment i fins a la data hi ha poques possibilitats de reduir la mortalitat o la discapacitat derivades d’aquesta patologia. Per això la recerca de noves dianes terapèutiques per a la seva aplicació en clínica constitueix una necessitat prioritària. En el present estudi es va estudiar la resposta autofàgica a la isquèmia cerebral i la seva relació amb l’estrès de l’reticle. L’objectiu era aprofundir en el coneixement d’aquests mecanismes, que constitueixen potencials dianes terapèutiques contra el CVA.
En el primer capítol, es va realitzar un estudi comparatiu de la resposta autofàgica entre dues estructures cerebrals (escorça cerebral i hipocamp ) que presenten una vulnerabilitat diferencial a la isquèmia. Per a això, es va utilitzar un model ex vivo d’isquèmia basat en l’ús de seccions cerebrals. Aquest model permet la comparació de respostes de diferents estructures en idèntiques condicions experimentals (en particular, es van utilitzar 30 minuts de privació d’oxigen i glucosa seguit de 3 hores en condicions normóxicas). Per caracteritzar l’activitat autofàgica es van mesurar els nivells tant de marcadors d’inducció d’autofàgia com de substrats específics d’autofàgia (calculant així el flux autofágico). Els resultats obtinguts van permetre concloure que la OGD indueix una resposta autofàgica ràpida en l’escorça cerebral que no es va observar en l’hipocamp. El paper neuroprotector de l’autofàgia en l’escorça cerebral sembla implicar el control dels nivells de poliubiquitina i de l’alliberament de glutamat.
El segon capítol compara la resposta autofàgica entre estructures utilitzant un model d’isquèmia cerebral global. Aquest model va permetre estendre els resultats descrits en el capítol anterior a un model in vivo. Es va analitzar tant la resposta autofàgica a la isquèmia com la seva relació amb la resposta a les proteïnes mal plegades (UPR) induïda per l’estrès de reticle endoplàsmic. Tant en l’escorça cerebral com en l’estructura hipocampal CA1 es va observar activitat autofàgica que no va poder ser detectada a la regió hipocampal CA3. La resposta autofàgica en CA1 no sembla suficient per combatre l’estrès de reticle, el que explica la presència de secuestosomas (agregats de proteïnes mal plegades) observats en les neurones d’aquesta estructura. L’activació farmacològica de l’UPR va incrementar l’activitat autofàgica, eliminant els secuestosomas i reduint el dany isquèmic.
El tercer capítol analitza la relació entre autofàgia i la via perk de l’UPR a un model de cultius organotípics d’hipocamp sotmesos a OGD i RL. Aquest model permet controlar la concentració de fàrmac que arriba a les neurones i obtenir mostres d’una forma ràpida, el que permet estudiar diferències en les respostes entre temps molt curts. L’estudi va mostrar que la fosforilació de eIF2 (marcador de l’activació de la via Perk) va presentar una resposta ràpida i de curta durada. Quan està fosforilació es va mantenir al llarg de la RL, es va produir un efecte neuroprotector mediat per ATF4 (activating transcription factor 4). S’ha descrit que ATF4 és capaç de produir una resposta citoprotectora coneguda com a resposta integrada a l’estrès (ISR, integrated stress response). La ISR inclou l’activació de l’autofàgia i l’augment de l’activitat antioxidant. A l’contrari del que s’ha observat en altres models d’hipòxia, en el model aquí utilitzat l’efecte neuroprotector de ATF4 es deu a una resposta antioxidant més que a una activació de l’autofàgia. Això va permetre concloure que el pes específic dels diferents components de la ISR depèn de l’context cel·lular i de el model experimental.
Resum recollit de la base de dades TESEO