Introducció
Alteracions en el metabolisme de calci-fòsfor són un problema prevalent i de gran importància per als pacients amb CKD (malaltia renal crònica) .1-8 apropiat i primerenc L’avaluació, així com el tractament és vital per al control òptim dels nostres pacients.
El mètode de diagnòstic ideal per a la nota i el tipus d’osteodistròfia renal és encara la biòpsia de la cresta ilíac després de la etiquetatge doble de tetraciclina, 9-25, però, degut A la seva naturalesa invasiva i laboral, és de difícil aplicació en la pràctica clínica diària.26 En l’actualitat, el diagnòstic i el tractament d’aquestes alteracions es basen en la determinació de nivells plasmàtics d’hormona paratiroide intacta (IPTH) .10,17,27-31 No obstant això, la determinació d’aquesta hormona no és senzilla i està sotmesa a una gran variabilitat.32-34 A més d’això, els mètodes utilitzats per processar les mostres IPT no estan estandarditzades, un fet que podria ser una font important de variabilitat prèvia a la prova.
Objectiu de l’estudi
a ana La variabilitat de LYSE en determinació de l’IPth Resultats comparant diferents mètodes de processament de la mateixa mostra de plasma tractada amb àcid etilediaminetetacètic (EDTA) en pacients amb CKD en diferents etapes de desenvolupament.
Material i mètode
En el nostre estudi, vam analitzar 294 mostres de sang de 49 pacients amb malaltia renal crònica (CKD) en diferents etapes de desenvolupament, 18 van ser de pacients trasplantats a la unitat de trasplantament renal (36,7%) i 31 de la Unitat de Hemodialysis crònica del nostre hospital ( 63,3%).
Totes les mostres de sang es van recollir al matí (entre les 8 i les 9 del matí) després d’una vuit hores ràpides i prediatisis per als pacients sotmesos a un tractament renal substitutiu. La sang es va dibuixar al servei de Hemodialysis del nostre hospital. Es van extreure tres tubs d’Edta de cada pacient: dos tubs de 5 ml i un tub de 10 ml. Immediatament després de l’extracció, van ser enviats a la nevera al Departament de Medicina Nuclear, on cadascun es va processar de manera diferent, com es descriurà, ja que es descriurà.
Grup de referència o grup 1 (TUBE EDTA 5ML):
– Mostra de sang recollida (i ràpidament enviada refrigerada al departament de medicina nuclear).
– Centrifugació refrigerada.
– Plasma immediatament congelat.
Grup 2 (tub d’Edta 10ml):
– mostra de sang recollida.
– Manteniment d’una hora a temperatura ambient.
– Centrifugació normal.
– separats en 3 tubs:
– Un dels tubs està immediatament congelat. Grup 2a
– un tub es refrigerà durant vuit hores i després congelat. Grup 2B
– Un altre tub es refrigera per a > 24 hores i congelats. Grup 2C
Grup 3 (tub EDTA 5ml):
– mostra de sang recollida.
– mantingut > 3 hores a temperatura ambient.
– Centrifugació normal.
– separats en dos tubs:
– immediatament congelat. Grup 3a
– un tub es refrigerà per > 8 hores i congelats. Grup 3b
Els mètodes de processament utilitzats per a les mostres de sang en el nostre estudi van ser els que normalment s’apliquen en aquest domini. El IPth es va mesurar amb l’assaig immunoradiomètric (IRMA Total Scantibodies Assay, 2a generació). La variabilitat d’inundació obtinguda era inferior al 2,5%. El grup 1 es va considerar l’estàndard d’or, ja que es tracta de les condicions generalment recomanades per a aquest tipus de mostres, independentment del mètode o conservant utilitzat (EDTA o citrat).
A dues per dues comparacions es va realitzar entre el Valors mitjans IPTH al grup de referència i als altres. Per tant, la normalitat de distribució es va comprovar primer aplicant proves de variància i normalitat d’homogeneïtat. Posteriorment, hem realitzat una comparació per parelles amb la prova T, inclosa la correcció de Bonferroni. El nivell de significació es va establir a P
Resultats
L’edat mitjana de la població estudiada va ser de 60,88 ± 17,65 i l’edat oscil·la entre els 26 i els 90 anys. Dels 49 pacients inclosos en l’estudi, 25 eren dones i 24 homes, que corresponen al 51 i el 49%, respectivament. La principal causa de malaltia renal crònica no està afiliada, seguida d’origen vascular i glomerular. Les característiques descriptives restants de la nostra població d’estudi es mostren a la taula 1.
El valor mitjà del grup de referència va ser de 202,25 ± 199,72pg / ml. Els valors mitjans d’IPTH intacte en els altres grups analitzats, que es mostren a la Taula 2, van ser 196 ± 203.23pg / ml, 202,8 ± 200.2pg / ml, 200,06 ± 194,87pg / ml, 204,08 ± 204.073pg / ml i 197.94 ± 182.3100 / ml. Com es pot veure a la figura 1, els resultats eren pràcticament idèntics per a cada grup, sense diferències importants respecte al grup de referència (p = 0,87, p = 0,99, p = 0,95, p = 0,96, p = 0,90), quan Comparant amb els grups 2A, 2B, 2C, 3A i 3B, respectivament).
Discussió
La determinació del sèric parathormona és difícil de quantificar, ja que és bastant inestable tant en sèrum com en sang43-45 (Av. 5 minuts). El mètode de referència es basa en la filatura refrigerada i la congelació de la mostra immediatament després de l’extracció. No obstant això, aquest procediment és molt difícil en la pràctica clínica diària, ja que l’activitat de nefrologia no només es limita al domini de l’hospital. En general, es dibuixen mostres a les clíniques i després s’envien als hospitals de referència per a l’anàlisi. De vegades, aquestes clíniques es troben a la força dels hospitals. La majoria de les mostres no es giren ni es separen en el lloc de l’extracció, ja que no tenen els mitjans necessaris per fer-ho. A més d’això, les mostres es converteixen a temperatura ambient. Podem derivar d’aquesta la importància de conèixer i reduir la variabilitat al màxim en el maneig de mostres.
En l’actualitat, no hi ha cap mètode normalitzat per processar-los. Hi ha alguna controvèrsia sobre l’estabilitat de Parathormone en sèrum o plasma tractat amb Edta. Diversos estudis afirmen que la determinació de l’IPTH en sèrum és menys estable que la que es va obtenir de la mostra de plasma i de sang conservada en tubs tractats amb Edta.35-42, però, Omar et al.38 el 2001 va observar que els nivells d’IPTH a Edta van disminuir 14,8 % després de romandre a temperatura ambient durant 48 hores. A més d’això, recentment, Cavalier et al.42 va demostrar que les mostres processades amb EDTA no sempre són més estables que en sèrum. Argumenten que l’estabilitat de l’IPTH després de 24 hores a -20ºC és més gran en sèrum que per al plasma tractat amb Edta.
En gairebé tots els estudis realitzats fins ara, sèrum i EDTA es comparen.35-42 No obstant això, una de les limitacions que el nostre estudi presenta és que no es va establir un grup de control amb sèrum (citrat). Per tant, no podem avaluar les determinacions de l’IPTH en sèrum i plasma (EDTA) una vegada congelats a -20ºC, ni comparar-ho amb les conclusions de Cavalier et al. A més d’això, no hem analitzat el que es produeix després de 48 hores a temperatura ambient per comparar amb l’Omar et al. Resultats.
Les troballes d’aquest estudi no mostren diferències significatives entre el grup de referència i els altres grups analitzats. Es confirma que les mostres de plasma tractat amb EDTA són estables i es recomana el seu ús amb centrifugació refrigerada i la congelació immediata és difícil d’aconseguir.
Conclusió
L’ús d’Edta com a conservant En el processament de mostres analítiques per a la determinació de la sang de l’IPTH permet un major temps de processament sense el requisit de congelació immediata, mostrant una variabilitat mínima en els resultats obtinguts segons diferents mètodes de processament. Aquests resultats poden ajudar a establir estratègies logístiques per al processament de mostres de sang en pacients amb CKD.
Taula 1. Característiques descriptives de l’estudi Població
Taula 2. Valor IPTH mitjà (PG / ml) per a cada grup estudiat
Figura 1.