TY – JOUR
T1 – DISPOSITION DE L’ARNA Design d’intrabodies à base de fibronectine qui détectent et inhibent une protéine de nucléocapsid de nucléocapsid de coronavirus de coronavirus grave
Au-Liao, Hsiang I.
AU – Olson, C. ANDERS
AU – HWANG, SEUGMIN
AU – DENG, HONGYU
AU – WONG, ELAINE
AU – Baric, Ralph S.
Au – Roberts, Richard W.
Au – Sun, Ren
py – 2009 / 6/26
y1 – 2009/6/26
N2 – la protéine NUCLEOCAPSID (n) Protéine du syndrome respiratoire aiguë grave (SRAS) Coronavirus joue des rôles importants dans la réplication virale et modulation des processus cellulaires hôtes. Les nouveaux ligands qui ciblent la protéine N peuvent ainsi fournir des outils pour suivre les cellules à l’intérieur de la protéine, détecter les points chauds d’interaction sur la surface de la protéine et découvrir des sites pouvant être utilisés pour développer de nouvelles thérapies anti-SARS. Utilisation de la sélection d’affichage de l’ARNm et de l’évolution dirigée, nous avons conçu des réactifs d’affinité de protéines en forme de nouveaux anticorps qui ciblent la protéine SRAS n avec une grande affinité et une sélectivité. Nos bibliothèques étaient basées sur une variante de 88 résidus du 10ème domaine de la fibronectine de type III de la fibronectine humaine (10FN3). Cette sélection a abouti à huit intrasdies indépendantes 10fn3, deux qui nécessitent le domaine N-terminal pour la liaison et six qui reconnaissent le terminus C, un avec KD = 1,7 Nm. Les intrasdies 10FN3 sont bien exprimées dans les cellules de mammifère et sont relocalisées par N dans les cellules infectées par le SRAS. Sept des intrasdies sélectionnées testées ne perturbent pas une fonction cellulaire lorsqu’il est exprimé seul in vivo et inhiber la réplication du virus de 11 à 5900 fois lorsqu’il est exprimé dans des cellules avant l’infection. Cibler deux sites sur SARS-N simultanément en utilisant deux distincts 10FN3S entraîne une inhibition synergique de la réplication du virus. © 2009 par la Société américaine pour la biochimie et la biologie moléculaire, inc.
AB – la protéine de la coronavirus respiratoire aiguë grave (SARS) joue des rôles importants dans la réplication virale et la modulation de la cellule hôte processus. Les nouveaux ligands qui ciblent la protéine N peuvent ainsi fournir des outils pour suivre les cellules à l’intérieur de la protéine, détecter les points chauds d’interaction sur la surface de la protéine et découvrir des sites pouvant être utilisés pour développer de nouvelles thérapies anti-SARS. Utilisation de la sélection d’affichage de l’ARNm et de l’évolution dirigée, nous avons conçu des réactifs d’affinité de protéines en forme de nouveaux anticorps qui ciblent la protéine SRAS n avec une grande affinité et une sélectivité. Nos bibliothèques étaient basées sur une variante de 88 résidus du 10ème domaine de la fibronectine de type III de la fibronectine humaine (10FN3). Cette sélection a abouti à huit intrasdies indépendantes 10fn3, deux qui nécessitent le domaine N-terminal pour la liaison et six qui reconnaissent le terminus C, un avec KD = 1,7 Nm. Les intrasdies 10FN3 sont bien exprimées dans les cellules de mammifère et sont relocalisées par N dans les cellules infectées par le SRAS. Sept des intrasdies sélectionnées testées ne perturbent pas une fonction cellulaire lorsqu’il est exprimé seul in vivo et inhiber la réplication du virus de 11 à 5900 fois lorsqu’il est exprimé dans des cellules avant l’infection. Cibler deux sites sur SARS-N simultanément en utilisant deux distincts 10FN3S entraîne une inhibition synergique de la réplication du virus. © 2009 par la Société américaine pour la biochimie et la biologie moléculaire, inc.
ur – http://www.scopus.com/inward/record.url?scp=67650555401&partnerID=8YFLogxK