Introduction
CORONATUS DE CONITIOOBOLUS (C. coronatus) (entomophphétoraux) est un champignon cosmopolite et pathogène d’insectes de différentes commandes1; Il a été trouvé sur la décomposition de bois, de la portée des feuilles, de sol2 et également d’agent pathogène de mammifères, y compris à l’homme, qui produit de la rininomophoromycose, qui affecte la surface des voies respiratoires, peut endommager la muqueuse nasale et paranasale et même s’étendre à la peau de Le nez, la lèvre supérieure et la zone frontale-glablar3.
Le rapport de dommage humain est rare et est limité aux régions avec des climats tropicaux et une humidité élevée4. La vaste répartition de C. coronatus et les quelques cas de rinoéthomophtose réelle suggèrent que tous les isolats sont des agents pathogènes pour les animaux humains et supérieurs3,5.
dans la plante de production de champignons (Agaricus bisporus) Fungi Rioxal (Perote, Veracruz, Mexique) Une épidémie épizootique de C. coronatus a été détectée sur des mouches de l’espèce Lycoriella naïf (L. naïf), considérée comme le principal ravageur du champignon6. Le champignon est produit dans des navires fermés qui présentent des conditions similaires à un climat tropical humide7 et dans lequel il y a des mouches infectées par C. coronatus. Les travailleurs sont exposés aux deux facteurs de périodes prolongées, ce qui implique qu’ils sont en contact avec les spores du champignon et, malgré cela, il n’y a pas de réservoirs de rhinoétomhoromycose originaires des plantes de production de champignons.
La relation entre C. coronatus et sa large gamme d’hôtes sont dignes d’étude et une indication de variation intraspécifique peut être envisagée. Sur la base de ce qui précède, l’objectif de ce travail était d’étudier si elle existe ou non une variation génétique entre les isolats de C. coronatus des blessures humaines et d’autres sources (sol, insecte, compost).
pour déterminer le La variabilité génétique entre les isolats de différents hôtes est nécessaire pour utiliser des techniques moléculaires88. L’entretoise interne transcrite (STIS) est le lieu le plus populaire de la recherche myologique basée sur des séquences; C’est le plus réussi pour l’identification d’un grand nombre de champignons, il a donc été désigné comme un marqueur d’ADN du code à barres universel pour les champignons; En outre, sa capacité prouvée pour l’étude de la variation inter-intronsecificifique en fait un outil très puissant9-12. De même, la technique du polymorphisme dérivée de l’amplification aléatoire de l’ADN (RAPD) a acquis diverses utilisations dans l’étude de la diversité génétique; Dans Fungi a été utilisé avec succès principalement dans des études intrapécifiques13. Ces 2 techniques ont été implémentées dans 11 isolats de C. coronatus et leurs résultats ont été analysés et discutés en termes de distance génétique selon la source dont ils ont été isolés (sol, insectes et humains).
matériaux et métodosailiments
11 isolats de C. coronatus ont été utilisés; 8 d’entre eux ont été obtenus à partir de collections publiques et 3 ont été isolés par eux-mêmes (Lapilla 1, 4 et 5). Tous ont été traités pour les analyser avec des techniques rapd et une amplification de la région Radn-ITS2 STI1-5.8S (introns situés entre les gènes Radn 28S et 18S). La liste de tous les isolats et de la source prise est présentée dans le tableau 1.
Liste des isolats utilisés
HQ602773
HQ602775
Staffs 4: 004
Muestra de suelo de una plantación de pinoa, b, p
Royaume-Uni
HQ602778
Staffs 15: 008
Muestra du Sol de las orillas d’un espace de pastoreoa, b, d
Royaume – Uni
HQ602779
Staffs 10: 027
Muestra de suelos de plantación de hoja anchaa, b, p
Royaume – Uni
HQ602780
Staffs 1: 037
Muestra de suelos de una plantación de Pino alerce (Larix spp . ), b, p
Royaume – Uni
HQ602781
Staffs 04: (Larix spp . ) 427
Muestra de suelos de una plantación Pino de alerce est, b, p
Royaume – Uni
HQ602782
VPCI-126P
Humanob, il
Inde (Norte)
FN421422
Inse ctob, il
Hungría
AJ345094
FSU 784
champiñónb de compost, il
Alemania (Braunschweig)
JN943011.1
FSU 785
Myzus persicaeb, il
EE. UU.
JN943012.1
ARSEF: provenientes de la USDA-ARS champignons entomopathogènes Collection (.. Ithaca, New York, EE UU); ATCC 32865: proveniente de la American Type de Culture Collection (.. Rockville, MD, EE UU); Lycon: Estos aislamientos est colectaron de la planta de champiñones Rioxal (Mexique); États-majors: procedentes de la Colección del Dr. Arthur A. Callaghan de la Universidad Staffordshire, College Road, Royaume-Uni
Aislamientos Usados en el la RAPD.
Aislamientos Usados en el Son.
Aislamientos obtenidos en Este estudio.
Las de son est obtuvieron en Este estudio.
Las de son un obtuvieron del NCBI GenBank.
Los aislamientos de C . coronatus Lyco 1, 4 y 5 est obtuvieron en la planta de PRODUCCIÓN de champiñones Hongos Rioxal (Segun método de Papierok Hajek14 y), est DETECTO Donde el brote epizoótico de sobre un Hongo entomopatógeno moscas de la especie L. ingenua, Que fue por el especialista identificado Arthur A. Callaghan COMO C. coronatus. TODOs si aislamientos presentaron las características morfológicas propias de la especie (por ejemplo, les producidos de conidios solo por Esta especie). Realizaron est si postulados de Koch y con ellos Que se comprobó C. coronatus fue el causal de ENFERMEDAD agente SOBRE la L. ingenua.
Los aislamientos de 11 C. coronatus est le mantuvieron temperatura ambiente y en a preservaron Agua estéril de destilada. Para su desarrollo, est inocularon en MEDIO Dextrosa agar Sabouraud à 25 ° C
Extracción de l’ADN
obtuvo micelio liofilizado de los 11 aislamientos de C. coronatus Siguiendo por el método descrito Guzmán-Franco et al.15 . El ADN est extrajo mediante el método CTAB (bromuro de hexacetiltrimetilamonio) modificado de Ahrens y Seemüller16. El MACERADO est coloco en un tubo Eppendorf chien 400 ul de solución de lisis (sodio cloruro de 0,4 M, Tris-HCl 10 mM, EDTA 2 mM, 1% de PVP) est mezcló y con un agitador VORTEX homogenizar para. Enseguida est agregaron 50 pl de SDS à 20%, 40 ul de proteinasa K (10 mg / ml) y est Incubo à 65 ° C Durante una Hora. Después est agregaron solución 600 ul de 3% de CTAB (Sigma Chemicals, EE. UU.) Y est Incubo NuevaMente Durante 45min à 65 ° C Posteriormente est adicionó ONU volumen de cloroformo isoamílico y alcool (24: 1), y est mezcló centrífugo 10min à 14.000rpm, Donde est formaron 2 fases; la fase acuosa est coloco en un tubo Eppendorf con un volumen d’isopropanol y est Incubo à -20 ° C por 60min; después est centrífugo 10min à 14.000rpm. ADN el fue en resuspendido de Agua destilada 50 ul estéril; concentración y la Calidad del ADN est Estimo con un NanoDrop V3.7 ND-1000 (Thermo Scientific®, EE. UU.). Por último, el ADN est visualizó en gel non al agarosa de 1% de X 1 en TBE Buffer (Tris0,089M, Acido Borico 0,089M, EDTA 0,002M) chien teñido bromuro de etidio (0,5μg location-1 10min por) y con un est fotografió fotodocumentador-Gel Doc MOD. 2000 (Bio-Rad®, EE. UU.).
amplificación RAPD
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR por Sus Siglas en inglés) est realizó en un termociclador Mon Thermocycleur ™ cycleur Bio-Rad Modelo 580BR 09275. Il usaron Tubos de 0,5ml Eppendorf; volumen el finale de la mezcla fue 25 ul / y PCR contenía 4 ul de l’ ADN (80ng / ul), du tampon 10x, cloruro de magnesio 3 mm, 2,5 mm CADA de dNTP (Gene Choice), 1,5 U de Taq polimerasa (Biogenica) y CADA 2 pl de Iniciador (10 pmol).Les initiateurs aléatoires de la série Operon Technology® et de la série B d’Invitrogène (Tableau 2) ont été utilisés. À partir de 19 initiateurs éprouvés, seuls ceux qui ont donné des résultats reproductibles (3 amplifications) ont été utilisés dans l’analyse RAPD, donc à la fin de 13.
séquence des initiateurs rapD et des fragments amplifiés
34 (70,83)
Le programme d’amplification était d’un cycle dénaturé Ion initial à 94 ° C par déformement, suivi de 38 cycles de dénaturation à 94 ° C pendant 30 s, hybridation à 35 ° C pendant 30 s et extension à 72 ° C pendant 1,5 minute, suivi d’une extension finale à 72 ° C pour 5min. La taille des fragments amplifiés a été estimée à l’aide d’un marqueur de poids moléculaire de 1kb (QIAGEN). Dans l’amplification de chaque initiateur, les radicans zoophthora (isolés de Plutella Xylostella) et Cercospora Agavicola (isolés de la Tequilana d’agave) (Fig. 1), qui n’étaient pas incluses dans l’analyse des données RAPD. La gestion de ces isolats (croissance et extraction de l’ADN) est décrite à Guzmán-Franco et al.15 et Ayala-Escobar et al.17.
Produits PCR avec l’initiateur RAPD A18 sur un gel d’agarose de 1%. Lanes 1 et 10: Marqueurs; Lanes 2-4: Lapon 1, 4 et 5; Lanes 5 et 6: Arsef 512 et 1884; Lane 7: ATCC 32865; Lanes 8 et 9 témoins (Z. Radicans et C. Agavicola); Lane 11-15: Personnel 4: 004, Staff 15: 008, Staff 10: 027, Staff 1: 037, Personnel 04: 427.
analyse des données RAPD
la présence ou l’absence de motifs de rapd Les bandes étaient considérées comme un caractère indépendant et analysées visuellement des photographies de gels d’agarose; La présence a été enregistrée avec 1 et l’absence avec 0. Avec ces résultats Une matrice binaire a été construite lorsque les polymorphismes ont été découverts de chacun des initiateurs. De cette matrice de similitude et le coefficient d’accouplement simple, un dendrogramme a été construit; Pour générer et visualiser les relations NTSYS 2.0 a été utilisée. Pour obtenir un dendrogramme de solidité supérieure, 1 000 répliques bootstrap (BS) avec WinBoot ont été effectuées.
Amplification des régions ADNR-STS2 de l’ADNR -5.8 ADNR-STS2 de l’ADN ribosomal pour les 11 isolats de C. coronatus en utilisant son 5 universel initiateurs (5’ggaagtaaaagtcgtaacaagg) et STS 4 (5’tCCCCGCTTattgaTatumaTGC) 18. Les amplifications ont été effectuées dans des tubes Eppendorf de 0,5 ml et le volume final de l’échantillon par réaction était de 25 μl. Chaque réaction contenait 2 μL d’ADN (80NG / μL), tampon 10x, chlorure de magnésium de 2,6 mm, 2,5 mm de chaque DNTP (choix de gène), 1,5 u / μl de TAQ polymérase, 2μL de chaque initiateur (20pmol). Les tubes témoins contenaient de l’eau distillée stérile au lieu de l’ADN.Le programme d’amplification était un cycle de dénaturation initial à 95 ° C pendant 5min, puis 35 cycles de naturalisation à 95 ° C pendant 30 s, hybridation à 50 ° C par déformement, extension à 60,3 ° C par 1,5 min et une extension finale à 72 ° C pendant 5min. La taille des fragments amplifiés a été estimée à l’aide de 1kb et 100 marqueurs moléculaires de pb.
Pour trouver des différences au niveau des nucléotides entre les isolats, les produits PCR-STS ont été envoyés pour son nettoyage et son séquençage à la Société macrogène (Corée). Le séquençage a été réalisé dans les deux sens à l’aide des initiateurs universels 4 et 518.
Analyse des données de la région
Les 11 séquences STI ont été éditées manuellement avec Bioedit et Finctv 1.3. L’alignement de la séquence multiple a été effectué avec une W. Les séquences ont été déposées dans la NCBI Genbank (Tableau 1). Pour construire un arbre phylogénétique plus fiable, additionnez aux 11 séquences coronatus obtenues dans cette étude, 3 séquences de C. coronatus et l’une des thromboides de conidiobolus de NCBI Genbank (Tableau 1) ont été utilisées.
La sélection de C. Thromboides en tant que groupe externe a été fabriqué à partir d’une explosion (NCBI Genbank) avec les 11 séquences de C. coronatus et d’une analyse de parcimonie, dont les résultats ont porté une apparence étroitement liée à C. Coronatus, mais est différente dans la région.
avec Mega5 Un arbre phylogénétique a été construit avec des méthodes maximales de parcimonie, une jonction de voisinage (NJ) et une évolution minimale; Au cours des 2 derniers ans, le modèle Tamura-Nei a été utilisé. Évaluer la confiance des relations phylogénétiques; La solidité des nœuds a été estimée par analyse BS avec 2 000 répliques.
Pour analyser davantage la diversité génétique des isolats, les séquences STI ont été regroupées en fonction de son substrat ou de son hôte: 1) Insecte, 2) Sol , 3) humain et 4) compost; Avec le programme Mega5, un compte comptait un compte pour déterminer le nombre de sites variables à l’intérieur de chaque groupe et parmi tous les groupes, ainsi que la région où ils étaient (ITS1-5.8S Radn-STS2) (tableau 3). Pour ces 2 évaluations, le groupe externe n’a pas été envisagé.
Analyse de sites variables Totaux et à l’intérieur de chaque groupe dans la région Radn-Sts2 ITS1-5.8S
= « 27B56ABC97 »>
Id = « 7cf311f914 »>
Human 5
résultants RAPD
Les initiateurs sélectionnés ont amplifié 48 bandes avec une variation polymorphe de 22 à 100%; 34 bandes polymorphes ont été obtenues, ce qui entraîne 70,83% du polymorphisme; 2 à 9 bandes par initiateur ont été obtenues (tableau 2). La figure 1 montre les motifs de bac obtenus par l’amplification avec l’initiateur A18 et la différence génétique entre l’isolation évaluée de différentes sources sont visibles.
Le dendrogramme construit à partir de l’analyse des motifs de bande obtenus avec les 13 initiateurs. révèle la formation de 4 groupes principaux (A, B, C et D) avec une similarité de 40%. Les résultats indiquent un niveau élevé de diversité génétique. La stabilité des groupements obtenus a été évaluée avec une analyse BS avec 1 000 répliques (Fig. 1). Le groupe A comprend 8 isolats divisés en 2 sous-groupes, I et II; Sous-groupe I contient les isolats obtenus de L. naïfs Lycoire 1, Lycro 4 et Lycro 5 (Lyco 1 et Lycoire 4 ont une similitude de 100%); Le sous-groupe II est composé de personnel 4: 004 isolé, personnel 15: 037, personnel 10: 037, personnel 10: 027 et personnel 04: 427 (Staff 4: 004, Staff 15: 008 ont une similitude de 100%). Le groupe B comprend uniquement l’isolement ARSAF 1884 extrait de Mocis Latipe, avec une similitude de 80%. Le groupe C comprend uniquement l’isolement du NATSF 512 de Nilaparvata Lugens, avec une similitude de 50%. Dans le groupe D seul est l’isolement ATCC 32865 des blessures humaines, avec une similitude de 40%, ce qui présente la plus grande distance génétique du reste des isolats (Figure 2).
Dendrogramme construite à partir de l’analyse des fragments d’ADN de 11 isolats de C. Coronatus amplifiée avec 13 initiateurs rapD. Les chiffres à chaque point des nœuds représentent les valeurs de bootstrap.
(0,1 Mo).
Analyse de la région
Les initiateurs utilisés18 ont amplifié un fragment de 666 BP (les espaces ont été considérés comme des sites informatifs) correspondant au Les régions IT1-5.8S Radn-ITS2 dans l’isolation 11 évaluée. La longueur de chacune des régions était homogène dans tous les isolats: IT123 BB; 5.8s Radn, 155 pb; ITS2, 288 BP. L’alignement et l’analyse des séquences avec le programme Mega5 des ITS1-5.8S Radn-Is2 de C. coronatus isolats (tableau 1) représentent 69 sites variables entre les 14 isolats. Parmi ceux-ci, 40 se trouvent dans ITS1, ce qui en fait dans la région la plus polymorphe, à la fois tous les groupes et les isolats de chaque groupe. La région 5.8 est la plus conservée, car elle n’a que 3 sites variables entre les 14 isolats. À l’intérieur de chaque groupe, il y avait également des différences dans le nombre de sites variables totaux, le groupe provenant d’insectes avec le nombre le plus élevé (29) et le groupe d’humains le plus homogène (5) (tableau 3).
La variabilité de sa région fournissait des informations sur les modèles de diversification C. coronatus. Un arbre phylogénétique a été construit avec les méthodes statistiques de parcimonie maximum, de jonction de voisinage (NJ) et d’évolution minimale et utilisant C. thromboides en tant que groupe externe. Le même résultat a été obtenu avec les 3 approches de la topologie et de la prise en charge des branches (valeur BS); La région de sa région a clairement différencié C. coronatus de C. Thromboides (espèces étroitement liées). La figure 3 montre l’arborescence de l’analyse NJ.
Arbre philogénique basé sur la séquence du son Région de C. Coronatus, utilisant la méthode NJ. C. Thromboides a été utilisé comme groupe externe. Les numéros proches des nœuds représentent des valeurs de bootstrap exprimées en pourcentage de 2 000 répétitions.
Les distances génétiques entre les isolaulations sont représentées par la longueur de la branche des groupes formés. Les groupes A, B et C ont été formés. Le groupe A comprend 10 isolats divisés en sous-groupes I et II; Sous-groupe I contient le Lapon 1, Lapco 4 et Lapilla 5 isolats (obtenus L. naïf), FSU 784 (obtenu à partir de compost de champignon) et P1 (obtenu à partir d’insectes). Au sous-groupe II est le personnel 4: 004, Staffing 15: 008, personnel 10: 027, Staff 1: 037 et personnel 04: 427 (obtenu de sol); La valeur BS du nœud qui unit les sous-groupes I et II est faible (44%), mais la valeur BS du nœud qui unit les isolats du sous-groupe I est de 79% et le sous-groupe II est de 88%. Le groupe B comprend les isolats ASOF 512 et ARSF 1884 (isolés d’insectes d’homoptone et de coléoptère, respectivement) et enfin, dans le groupe C sont les isolats ATCC 32865 et VPCI-126P (extraits des lésions humaines). Ce groupe présente la plus grande distance génétique par rapport à d’autres isolats et sa valeur BS est de 98%.
Discussion
Les résultats de ce travail montrent la variation génétique évidente entre l’isolation de C. Coronatus évaluée, groupée selon son origine dans: 1) insecte, 2) le compost, 3) sol et 4) humain.
Bien que les principes de la technique avec des séquences STI diffèrent de ceux de la technique RAPD19,20, il est respecté Ce qui indique Soll21, qui prétend que pour les résultats obtenus avec une méthode considérée comme valide, ils doivent être confirmés avec au moins une technique différente. Nos résultats sont compatibles avec les deux techniques basées sur: 1) Il existe une variation intraspécifique des isolats évalués; 2) des isolats humains présentent la plus grande divergence génétique par rapport au reste des isolats; 3) La plus grande distance génétique entre les groupes d’isolation est donnée entre ceux de l’homme et des lycos (isolats de L. naïf).
même si des résultats comme ceux des Ribes et al.5, Valle et al .3 et wieloch et al.4 Suggérez que tous les isolats ne sont pas des agents pathogènes pour l’homme et que, à son tour, il s’agit d’une indication de la variation intraspécifique du champignon, aucune étude ne l’appuie. Ce travail est le premier à évaluer et à démontrer qu’il existe une variation intraspécifique au niveau moléculaire de C. coronatus liée à la source dont ils ont été pris.
Des études similaires ont évalué la variation d’autres entomophtorales avec RAPD et Amplification de son 22,23. Tout comme nos résultats montrent une distance génétique claire entre les isolats de différentes sources, Fargues et al.9 et Morton et al.24 ont signalé la relation entre la variation génétique et l’hôte.
Il y a des études sur le complexe de Fusarium, que, même si ce n’est pas un entomophrim, il partage avec C. coronatus la caractéristique d’infecter une large gamme d’hôtes, y compris l’homme. Zhang et al.25 recherchait une variation intraspécifique sans succès en 471 isolats de l’homme, du sol, des animaux, de l’air des hôpitaux et des plantes. La raison en est que le Fusarium est un champignon multi-hébergé26, qui implique que la même isolation peut infecter un grand nombre d’organismes de différents phyla.
Chaque microorganisme a un ensemble de fonctionnalités qui fonctionnent comme des facteurs de virulence dans ses hôtes; Cependant, il est inconnu de dans quelle mesure conditionne-t-il les mécanismes d’infection chez différents groupes hôtes. Une cause est l’absence de modèles permettant d’analyser la virulence entre groupes infectés27. Compte tenu des différentes sources dans lesquelles C. Coronatus a été trouvée et nos résultats qui montrent clairement la variation intraspécifique entre isolement, nous considérons que C. coronatus pourrait servir de modèle pour évaluer les mécanismes de virulence qui le rendent spécifique à chacun de chaque groupe. des organismes auxquels il attaque.
Même si nos résultats montrent une différence claire à un niveau moléculaire entre les isolats de C. coronatus de sources humaines et autres, dans ce travail, aucun résultat morphologique ou physiologique n’est présenté de les isolats pour vérifier si les différences génétiques sont traduites en différences phénotypiques; Cependant, nos propres observations (seulement avec des isolats) et d’autres auteurs qui nous aident à en déduire, en plus de soulever la possibilité qu’il existe un isolement qui n’est pas un agent pathogène humain. Hall et al.28 considère que la capacité de développer à 37 ° C est un critère d’évaluation du potentiel des champignons en tant que pathogènes humains; MIER ET L’AL.29 a travaillé dans une souche d’origine humaine et développée à 37 ° C, tandis que PapIerok et al.2 a étudié 10 souches, dont une seule d’origine humaine et une Hanseniella Miriapodo isolé de Hanseniella Miriapodo Unguiculata a augmenté à 37 ° C; Le reste provenait d’insectes de diverses commandes. Dans notre cas, l’effet de la température sur les isolats de Lyco 1, 4 et 5 a été observé, constatant qu’il n’y avait pas de développement à 37 ° C (données non présentées). En outre, nous avons observé que l’isolement ATCC 32865 (tiré de l’homme) a pris près de 4 jours de plus pour remplir un plat de Pétri de 85 mm de diamètre par rapport à ceux obtenus d’insectes (données non représentées) et avait un coton, une faible rugosité et des tonalités grisaçées, caractéristiques qui n’ont pas été présentées dans l’autre isolation évaluée. Ces caractéristiques soutiennent également les différences entre l’isolement des humains et le reste, ce qui pourrait être attribué à la source dont il a été obtenu et suggère que cela peut être un facteur qui génère des distances génétiques. Les résultats de López-Martínez et al.30 suggèrent également une variation intraspécifique et que tous les isolats ne sont pas des agents pathogènes de mammifères; Ils ont effectué des tests dans des souris, des hamsters et des cobayes avec une souche de C. Coronatus tiré de Postica Aenolamia et, bien qu’il y ait eu une invasion initiale chez tous les animaux, il a disparu 15 jours après l’inoculation, ce qui indique que le champignon n’était pas en mesure d’établir chacun les infecter. Ce qui précède met en évidence l’absence de pathogénicité de cette souche particulière chez les mammifères.
De cette manière, nos résultats sur la distance génétique avec STS et RAPD entre l’isolement de l’ATCC 32865 (humain) et ceux pris d’insectes, ainsi que les insectes Caractéristiques physiologiques et morphologiques des isolats de Lycos décrits ci-dessus, suggèrent que ce ne sont pas des agents pathogènes pour l’homme; Cela pourrait être la raison pour laquelle, malgré le fait que les travailleurs sont en contact avec le champignon, il n’y a pas de rapports de blessure chez l’homme par C. coronatus dans des plantes productrices de champignons.
Nos résultats ne sont pas concluants de suggérer l’utilisation de C.Coronatus dans le contrôle biologique des insectes; Des recherches sont nécessaires pour le déterminer, comme cela s’est produit avec la souche 251 du champignon Purpleocillium Lilacinus actuellement utilisé pour le contrôle biologique des nématodes, même si le champignon est signalé comme agent pathogène des humains et des animaux. Cette souche est la seule qui ne produit pas de la Pahecilotoxine, qui est l’agent causatif de préjudice chez l’homme31. Il convient de mentionner que pour C. coronatus, la coronatine du métabolite-1 a déjà été identifiée dans les larves de Galleria Mellonella et, bien qu’il soit nécessaire de déterminer son mode d’action, il serait intéressant d’enquêter si ce métabolite est capable de causer des modifications. Dans Humans4.
La taille de l’échantillon et le nombre d’hôtes / substrats de ce travail étaient limités, ce qui aurait pu affecter l’analyse de la diversité génétique et le nombre de branches formées dans les arbres phylogénétiques. Il est recommandé d’effectuer des tests avec un plus grand nombre d’isolats et comprennent des études de morphologie et de physiologie. Malgré ces limitations, nos résultats avec les techniques RAPD et STS fournissent des informations sur la diversité intraspécifique de C. coronatus liée à l’hôte / substrat.
Conflit d’intérêts
Les auteurs déclarent qu’il n’y a pas de conflit d’intérêts.