Analyse de la variabilité dans la détermination de l’hormone parathyroïdienne intacte (IPTH) selon la méthode utilisée pour traiter l’échantillon | Nefrología

Introduction

Les modifications du métabolisme de calcium-phosphore sont un problème répandu et d’une grande importance pour les patients atteints de CKD (maladie rénale chronique) .1-8 approprié et tôt L’évaluation, ainsi que le traitement, c’est essentiel pour un contrôle optimal de nos patients.

La méthode de diagnostic idéale pour le grade et le type d’ostéodystrophie rénale est toujours la biopsie de crête iliaque après la tétracycline double étiquetage, 9-25 mais en raison de À sa nature envahissante et essentielle, il est d’une application difficile dans la pratique clinique quotidienne26 à l’heure actuelle, le diagnostic et le traitement de ces altérations sont basés sur la détermination des niveaux plasmatiques d’hormone parathyroïdienne intacte (IPTH) .10,17,27-31 Cependant, la détermination de cette hormone n’est pas simple et est soumise à une grande variabilité.32-34 En plus de cela, les méthodes utilisées pour traiter les échantillons IPTH ne sont pas normalisées, un fait qui pourrait constituer une source importante de variabilité pré-test.

objectif de l’étude

à ANA Variabilité de lyrse dans les résultats de détermination de l’IPTH en comparant différentes méthodes de traitement du même échantillon de plasma traitée avec de l’acide éthylènediaminetétraacétique (EDTA) chez les patients atteints de CKD à différentes étapes de développement.

matériau et méthode

Dans notre étude, nous avons analysé 294 échantillons de sang de 49 patients atteints d’une maladie chronique rénale (CKD) à différentes étapes de développement, de 18 patients transplantés à l’unité de greffe rénale (36,7%) et 31 de l’unité d’hémodialyse chronique à notre hôpital ( 63,3%).

Tous les échantillons de sang ont été collectés le matin (entre 8h et 9 h) après une huit heures rapide et une préialisation des patients subissant un traitement rénal substitutif. Le sang a été attiré au service d’hémodialyse de notre hôpital. Trois tubes d’EDTA ont été extraits de chaque patient: deux tubes 5 ml et un tube de 10 ml. Immédiatement après l’extraction, ils ont été envoyés au réfrigérateur au département de la médecine nucléaire, où chacun a été traité différemment, comme cela sera décrit ci-après.

groupe de référence ou groupe 1 (tube EDTA 5ML):

– échantillon de sang recueilli (et envoyé rapidement réfrigéré au département de la médecine nucléaire).

– Centrifugation réfrigérée.

– Plasma immédiatement congelé.

Groupe 2 (tube EDTA 10ML):

– échantillon de sang collecté.

– maintenu une heure à la température ambiante.

– Centrifugation normale.

– séparé en 3 tubes:

– Un des tubes est immédiatement congelé. Groupe 2A

– Un tube est réfrigéré pendant huit heures puis congelé. Groupe 2B

– Un autre tube est réfrigéré pour > 24 heures et congelés. Groupe 2C

Groupe 3 (Tube EDTA 5ML):

– échantillon de sang collecté.

– maintenu 3 heures à la température ambiante.

– centrifugation normale.

– séparé en deux tubes:

– immédiatement gelé. Groupe 3A

– Un tube est réfrigéré pour > 8 heures et congelés. Groupe 3B

Les méthodes de traitement utilisés pour les échantillons de sang dans notre étude étaient celles habituellement appliquées dans ce domaine. L’IPTH a été mesuré à l’aide du dosage immunoradiométrique (dosage total intact intact IRMA, 2e génération). La variabilité de l’onduleur obtenu était inférieure à 2,5%. Le groupe 1 a été considéré comme la norme d’or, car ce sont les conditions généralement recommandées pour ce type d’échantillons, indépendamment de la méthode ou du conservateur utilisé (EDTA ou Citrate).

Une deux par deux comparaison a été réalisée entre le IPTH signifient des valeurs moyennes dans le groupe de référence et les autres. Par conséquent, la normalité de la distribution a été vérifiée en premier en appliquant des tests de variance d’homogénéité et de normalité. Par la suite, nous avons effectué une comparaison par paires avec le test T, y compris la correction de Bonferroni. Le niveau de signification a été établi à p

résultats

L’âge moyen de la population étudiée était de 60,88 ± 17,65 et l’âge de 26 à 90 ans. Sur les 49 patients inclus dans l’étude, 25 étaient des femmes et 24 hommes, ce qui correspond à 51 et 49%, respectivement. La principale cause de la maladie rénale chronique est non affiliée, suivie d’origine vasculaire et glomérulaire. Les caractéristiques descriptives restantes de notre population d’étude sont affichées dans le tableau 1.

La valeur moyenne dans le groupe de référence était de 202,25 ± 199.72pg / ml. Les valeurs moyennes de l’IPTH intactes dans les autres groupes analysés, affichées dans le tableau 2, étaient de 196 ± 203,23pg / ml, 202,8 ± 200,2pg / ml, 200.06 ± 194.87pg / ml, 204.08 ± 204.073pg / ml et 197,94 ± 182.31pg / ml. Comme on peut le voir sur la figure 1, les résultats étaient pratiquement identiques pour chaque groupe, sans différences importantes en ce qui concerne le groupe de référence (p = 0,87, p = 0,99, p = 0,95, p = 0,96, p = 0,96, p = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96, P = 0,96), lorsque comparer avec les groupes 2a, 2b, 2c, 3a et 3b, respectivement).

Discussion

La détermination du sérum parathormone est difficile à quantifier car elle est assez instable à la fois en sérique et dans le sang43-45 (AV. 5 minutes). La méthode de référence est basée sur la filature réfrigérée et la congélation de l’échantillon immédiatement après l’extraction. Cependant, cette procédure est très difficile dans la pratique clinique quotidienne, car la néphrologie est non seulement limitée au domaine hospitalier. En général, les échantillons sont dessinés aux cliniques, puis envoyés aux hôpitaux de référence pour analyse. À l’occasion, ces cliniques sont à une distance à distance des hôpitaux. La plupart des échantillons ne sont ni tournés ni séparés dans le lieu d’extraction car ils n’ont pas les moyens nécessaires pour le faire. En plus de cela, les échantillons sont filés à la température ambiante. Nous pouvons découler de cette importance de savoir et de réduire la variabilité à un maximum dans la manipulation des échantillons.

actuellement, il n’y a pas de méthode standardisée de traitement. Il existe une certaine controverse sur la stabilité de la parathormone dans le sérum ou le plasma traité avec EDTA. Plusieurs études indiquent que la détermination de l’IPTH dans le sérum est moins stable que celle obtenue du plasma et des échantillons de sang conservés dans des tubes traités avec EDTA.35-42 Cependant, Omar et al.38 en 2001 ont observé que les niveaux d’IPTH dans l’EDTA ont diminué de 14,8. % après restant à la température ambiante pendant 48 heures. En plus de cela, récemment, Cavalier et al.42 a prouvé que des échantillons traités avec EDTA ne sont pas toujours plus stables que dans le sérum. Ils soutiennent que la stabilité de l’IPTH après 24 heures à -20 ° C est supérieure au sérum que pour le plasma traitée avec EDTA.

dans presque toutes les études effectuées à ce jour, Sérum et EDTA sont comparés.35-42 Cependant, l’une des limitations que notre étude présente est qu’un groupe de contrôle avec sérum (citrate) n’a pas été établi. Par conséquent, nous ne pouvons pas évaluer les déterminations de l’IPTH dans le sérum et le plasma (EDTA) une fois gelés à -20 ° C, ni la comparer avec les résultats de Cavalier et al. En plus de cela, nous n’avons pas analysé ce qui se passe après 48 heures à la température ambiante afin de comparer avec l’Omar et al. Résultats.

Les conclusions de cette étude ne montrent aucune différence significative entre le groupe de référence et les autres groupes analysés. Il est confirmé que les échantillons de plasma traités avec EDTA sont stables et que son utilisation est recommandée avec une centrifugation réfrigérée et une congélation immédiate est difficile à réaliser.

Conclusion

L’utilisation de l’EDTA en tant que conservateur Dans le traitement des échantillons analytiques de la détermination du sang de l’IPTH, permet un plus grand temps de traitement sans la congélation immédiate, affichant une variabilité minimale dans les résultats obtenus selon différentes méthodes de traitement. Ces résultats peuvent aider à établir des stratégies logistiques pour le traitement des échantillons de sang chez les patients atteints de la CKD.